ВЛИЯНИЕ КОМБИНАЦИЙ N-БЕНЗИЛЬНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ЦИТИЗИНА С ЯНТАРНОЙ КИСЛОТОЙ НА ТЕЧЕНИЕ ОСТРОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ЭТАНОЛОМ И СНОТВОРНЫМИ ПРЕПАРАТАМИ

АННОТАЦИЯ

Средства, содержащие янтарную кислоту (ЯК), относятся к препаратам метаболического типа действия, фармакотерапевтические эффекты которых направлены на восстановление биохимических реакций обмена веществ, нарушенных патологическими процессами. Алкогольная кома часто сопровождается дыхательной недостаточностью. Целью данной работы является изучение влияния комбинаций цитизина, N-(3,4-метилендиоксибензил)цитизина гидрохлорида и N-(3-бром-4-метоксибензил)цитизина гидрохлорида с янтарной кислотой в соотношении 1:1 на течение острого отравления алкоголем. Изученные композиции оказывают антитоксическое действие при отравлении алкоголем средней степени тяжести.

Янтарной кислота 10 мг/кг сокращает продолжительность наркотического сна на 40%, а композиция «цитизин:ЯК» - на 74,6%. Композиции «N-(3,4-метилендиоксибензил)цитизина гидрохлорид:ЯК» и «N-(3-бром-4-метоксибензил)цитизина гидрохлорид:ЯК» в дозе 2,0 мг/кг - на 42,8 и в дозе 1,0 мг/кг на 68,2% соответственно, уступая цитизину, ЯК и их композиции, но показывая достоверное сокращение продолжительности наркотического сна

ABSTRACT

Succinic acid (SA) containing remedies belong to drugs of a metabolic type of action, the pharmacotherapeutic effects of which are aimed at restoring biochemical metabolic reactions disturbed by pathological processes. Alcoholic coma is often accompanied by respiratory failure. The purpose of this work is to study the effect of combinations of cytisine, N-(3,4-methylenedioxybenzyl)cytisine hydrochloride and N-(3-bromo-4-methoxybenzyl)cytisine hydrochloride  with succinic acid in a ratio of 1:1 on the acute alcohol poisoning. The studied compositions have an antitoxic effect in moderate alcohol poisoning. Thus, SA 10 mg/kg reduces the duration of narcotic sleep by 40% and the composition "cytisine:SA" - by 74.6%. Compositions " N-(3,4-methylenedioxybenzyl)cytisine hydrochloride:SA" and N-(3-bromo-4-methoxybenzyl)cytisine hydrochloride:SA" at a dose of  2,0 mg/kg - by 42,8 and at a dose of 1,0 mg/kg 68.2%, respectively, yielding to cytisine, SA and their composition, but showing a significant reduction in the narcotic sleep duration.

Ключевые слова: острая алкогольная интоксикация, производные цитизина, янтарная кислота, антитоксическое действие.

Keywords: acute alcohol intoxication, cytisine derivatives, Succinic acid, antitoxic.

Употребление спиртных напитков было известно ещё в глубокой древности. В те далёкие времена и в наши дни алкоголь приносил и приносит неисчислимые беды. Он разрушает здоровье, семью, приводит к болезням, травмам и преступлениям [6] и его приём корреспондирует с  высоким уровнем самоубийств и несчастных случаев [2]. Средства, содержащие янтарную кислоту, относятся к препаратам  метаболевой         чувствительностического типа действия, фармакотерапевтические эффекты которых направлены на восстановление биохимических реакций обмена веществ, нарушенных патологическими процессами.

В практической деятельности врачу нередко приходится иметь дело с острыми состояниями, которые возникают в результате приёма алкоголя и его суррогатов, а также вызванными злоупотреблением ими [3,9].

Острая алкогольная интоксикация (алкогольное опьянение) – часто встречающееся состояние, оно может наблюдаться как у пациентов зависимостью от алкоголя, так и у здоровых лиц. Алкогольное опьянение является медицинской, социальной и юридической проблемой. Пьяные чаще участвуют в криминальных инцидентах, попадают в ДТП, становятся жертвами несчастных случаев в быту и на производстве. Значительная часть пациентов, обращающихся за помощью к травматологам, в момент травмы находилась в состоянии алкогольного опьянения [11].

При лечении острой алкогольной интоксикации необходим комплекс мероприятий, направленных, с одной стороны, на прекращение дальнейшего всасывания алкоголя и ускоренного выведение​ его из организма,​ а с другой - на защиту и поддержание​ систем или функций, страдающих от воздействия алкоголя [8].

В наших предыдущих экспериментах была изучена антитоксическая активность комбинаций N-бензильных производных цитизина с янтарной кислотой в соотношении 1:1 и получен патент на изобретение в Агентстве интеллектуальной собственности [1,3,5,7].

Цель. Изучить влияния комбинаций N-(3,4-Метилендиоксибензил) цитизина гидрохлорид и N-(3-Бром-4-метоксибензил) цитизина гидрохлорид с янтарной кислотой в соотношении 1:1 на течение острого отравления алкоголем и снотворными препаратами.

Материалы и методы. N-производные цитизина синтезированы в лаборатории химии алкалоидов ИХРВ АН РУз В.И.Виноградовой и Ш.Б.Рахимовым.

Острую алкогольную интоксикацию вызывали внутрибрюшинным введением 24% раствора этанола в дозе 4.8 г/кг [5] мышам весом 18-22 г. Вещества вводили подкожно за 10-15 мин. О действии веществ судили по продолжительности бокового положения (наркотического сна) животных. Фиксировали длительность бокового положения. Изучаемые соединения вводили перорально в дозах, указанных в таблице, за 30 минут до введения этанола.

Влияние комбинаций N-бензильных производных цитизина с янтарной кислотой (1:1) на продолжительность наркотического сна изучали на моделях сна, индуцированного введением уретана (в дозе 1300,0 мг/кг внутрибрюшинно) и этаминала натрия (в дозе 50,0 мг/кг внутрибрюшинно)

Полученные результаты обрабатывались статически с использованием программы OriginPro 9.0 (MicroCal Software, Northampton, MA) с вычислением средней арифметической, ошибки средней, t-критерия Стьюдента, критерием достоверности отличий явилось значение p < 0,05.

Результаты и обсуждение

Острая токсичность изученных композиций N-производных цитизина с ЯК

N-(3.4-метилендиоксибензил) цитизина гидрохлорид и янтарную кислоту брали в соотношении 1:1 у 6 мышей для каждой группы экспериментов. Подкожно вводили 30.0 мг/кг вещества. Через 10 минут движение замедлилось, дыхание было нормальным, внешний шум был нормальным, и летальных исходов в течение суток не наблюдалось. При введении дозы 35.0 мг/кг вещества через 8 минут снизилась двигательная активность, глаза были частично закрыты, отмечался тремор со снижением чувствительности к внешним звукам и болевым реакциям. Через 183 минуты погибло 1 из 6 животных. Выживших подопытных животных наблюдали в течение 14 дней. У остальных животных гибель не наступила. Подкожно вводили дозу 40.0 мг/кг. Через 5-7 минут движения замедлялись, глаза частично закрывались, уменьшалось болевое восприятие, и несколько снижалась слышимость внешних звуков. Из 6 подопытных животных 1 мышь погибла за 124 минуты, 2 мыши погибли за 8 часов, а 4 выжившие мыши не погибли в течение суток. После подкожного введения 45.0 мг/кг вещества через 5 минут замедлились движения, дыхание и частота сердечных сокращений были нормальными, у всех мышей наблюдался тремор, уменьшилось восприятие болевой чувствительности и звуков, и были расслаблены двигательные мышцы конечностей. 1 мышь умерла за 81 минуту, 2-я мышь за 248 минут, и 3-я мышь умерла за 1 день. Выживших животных наблюдали в течение 14 дней без дальнейшей смертности. При введении вещества в дозе 50.0 мг/кг через 7 минут замедлились движения, расслабились мышцы конечностей, частично закрылись глаза, уменьшились болевой чувствительности и слух на внешние звуки. На 69 минуте, 83 минуте, 99 минуте и 156 минуте 4 из 6 подопытных животных погибли. При введении вещества в дозе 55.0 мг/кг двигательная активность подопытных животных снижалась через 3-5 минут, дыхание и частота сердечных сокращений были нормальными, у всех мышей наблюдался тремор, уменьшение болевой чувствительности и слышимости внешних звуков, и мышцы конечностей были расслаблены. 1 мышь умерла за 41 минуту, 2 мыши умерли за 82 минуты, 3-я мышь умерла за 94 минуты, 4-я мышь умерла за 102 минуты, 5-я мышь умерла за 114 минут, и 1 мышь выжила. При дозе 60.0 мг/кг 100% смертность наблюдалась у всех 6 животных. (Таблица 1) ЛД50 составила 45.0 (39.1±51.7) мг/кг.

Таблица 1.

Острая токсичность N-(3,4-метилендиокси-бензил)цитизина гидрохлорид

N-(3-бром-4-метоксибензил) цитизина гидрохлорид и янтарная кислота взяты в соотношении 1:1. При подкожном введении вещества в дозе 25.0 мг/кг через 10 мин активность немного снижалась, чувствительность к внешним звукам и болевые реакции были в норме, состояния гибели у подопытных животных в течение суток не наблюдалось.

При введении дозы 50.0 мг/кг через 8-10 минут двигательная активность животных снижалась, глаза частично закрывались, уменьшалось болевое восприятие внешних звуков, наблюдался тремор, гибели в течение суток не было.

При подкожном введении вещества в дозе 70.0 мг/кг поведение уменьшалось через 5 минут, уменьшались болевые реакции на внешние звуки, незначительно снижалась частота дыхательных и сердечных сокращений, у всех животных наблюдался тремор, у 1 из 6 наблюдалась гибель. Выжившие животные имели неограниченный доступ к воде и пище в условиях вивария, дальнейшей гибели животных при этой дозе не наблюдалось.

У животных, которым вводили дозу вещества 75.0 мг/кг, через 5 минут снизилась двигательная активность, уменьшалась болевая и звуковая реакция, у всех животных наблюдался тремор, у 2 из 6 подопытных животных наблюдалась гибель.

При подкожном введении дозы 80.0 мг/кг вещества наблюдалось замедление двигательной активности, опущение верхнего века, мочеиспускание и икота, снижение дыхания, сердцебиения, восприятия внешних звуков и болевой чувствительности, у 3 из них наблюдалась смерть в течение дня.

При подкожном введении вещества в дозе 85.0 мг/кг у животных через 3-5 минут наблюдалось замедление темпов дыхания, усиление дыхания, но снижения болевой и звуковой чувствительности, потирания мордочки и икоты, гибели не наблюдалось в течение первого дня. Однако со вторых суток наблюдалась двигательная активность животных, замедленное дыхание и икота, 4 из 6 подопытных животных погибли.

При подкожном введении в дозе 90.0 мг/кг через 2 минуты замедлилось движение животных, через 3 минуты началась дрожь, смерть наблюдалась у 5 животных из 6, за время наблюдения за экспериментом в живых осталось 1 животное.

При введении вещества в дозе 100.0 мг/кг в течение 1 суток погибло 100% подопытных животных. ЛД₅₀ составило 80.0 (70.7±90.4) мг/кг. (Таблица 2)

Таблица 2.

Острая токсичность N-(3-бром-4-метоксибензил) цитизина гидрохлорид

Антитоксическое действие фармакологических композиций N-производных цитизина с ЯК

Антитоксическое действие композиций изучали на мышах. Полученные результаты представлены в таблице 3, из которой видно, что изученные композиции в соотношении 1:1 обладают антитоксическим действием при алкогольном отравлении средней степени. Так, ЯК 10.0 мг/кг уменьшает продолжительность наркотического сна на 40%, композиция «цитизин:ЯК» - на 74.6%. Композиции «N-(3,4-метилендиоксибензил) цитизина гидрохлорид:ЯК» и «N-(3-бром-4-метоксибензил) цитизина гидрохлорид:ЯК” в дозе 2.0 и 1.0 мг/кг – на 42.8 и 68.2%, соответственно, уступая цитизину, ЯК и их композиции, но проявляя при этом достоверное снижение продолжительности наркотического сна.

Таблица 3.

Влияние комбинаций цитизина и его производных с ЯК (1:1) на острую алкогольную интоксикацию у мышей (N=10)

Примечание: *Р=0,05 по сравнению с контрольной группой

На модели с уретаном сочетание цитизина с янтарной кислотой (1:1) в качестве препарата сравнения уменьшало продолжительность сна на 69,2% и 67,5% соответственно в дозах 0,1-0,5 мг/кг по сравнению с контрольными животными. Новое исследуемое вещество проявило наибольшую активность в дозах 0,5-1,0 мг/кг (44,4% - 48,9%) среди всех введенных доз комбинации N-(3,4-метилендиоксибензил)цитизина гидрохлорид:ЯК. N-(3-бром-4-метоксибензил)цитизина гидрохлорид в дозах 0,5-1,0мг/кг уменьшал продолжительность сна на 41,3% и 43,7% соответственно по сравнению с контрольными животными. Как известно из полученных результатов, антитоксическая активность новых композиций не проявила высокой активности по сравнению с показаниями янтарной кислоты и препарата сравнения. Полученные результаты представлены в таблице 4.

Таблица 4.

Влияние комбинаций цитизина и его производных с ЯК (1:1) на наркотическое действие уретана у мышей при подкожном введении (N=6)

Примечание: *Р=0,05 по сравнению с контрольной группой

При исследовании влияния изучаемых композиций на продолжительность сна, индуцированного этаминалом натрия, янтарная кислота в дозах 50,0 мг/кг и 100,0 мг/кг по сравнению с контрольными животными составила 52,2% и 55,3% соответственно, а комбинация цитизина с янтарной кислотой (1:1) в дозах 0,1 и 0,5 мг/кг - 72,7% и сокращение продолжительности сна на 69,5%.  Среди всех доз вновь изученной композиции N-(3,4-метилендиоксибензил)-цитизина гидрохлорид:ЯК 0,5-1,0 мг/кг проявили наибольшую антитоксическую активность. Эти дозы сокращали продолжительность сна на 45,7–51,3% соответственно по сравнению с контрольными животными.   Комбинация N-(3-бром-4-метоксибензил)цитизина гидрохлорид:ЯК (1:1) в дозе 1,0 мг/кг снижала продолжительность сна на 45,8% по сравнению с контрольными животными.  В ходе экспериментов было доказано, что по антидотным свойствам новые композиции не превосходят янтарную кислоту и препарат сравнения. Полученные экспериментальные результаты представлены в таблице 5.

Таблица 5.

Влияние комбинаций цитизина и его производных с ЯК (1:1) на наркотическое действие этаминала натрия у мышей при подкожном введении (N=6)

Примечание: *Р=0,05 по сравнению с контрольной группой

Выводы: В связи с чем определена перспективность комбинированной терапии: комбинация N-бензильных производных цитизина и янтарной кислоты демонстрирует выраженный протекторный эффект при острой интоксикации этанолом и снотворными препаратами; янтарная кислота усиливает антиоксидантное и детоксикационное действие цитизиновых производных, ускоряя метаболизм токсинов.

Определены механизмы действия N-бензильных производных  цитизина: блокируют никотиновые рецепторы, снижая нейротоксическое действие этанола и барбитуратов, стабилизируют работу ЦНС, предотвращая угнетение дыхательного центра. Янтарная кислота активирует цикл Кребса, улучшая энергообеспечение клеток в условиях гипоксии; связывает ацетальдегид (токсичный метаболит этанола), уменьшая повреждение печени.

Можгл сделать вывод в том, что комбинация N-бензильных производных цитизина и янтарной кислоты представляет собой многоцелевую терапию для коррекции острых отравлений, сочетая нейропротекцию и метаболическую поддержку. Результаты исследований обосновывают ее внедрение в практику токсикологии и наркологии после завершения полного цикла доклинических и клинических испытаний.

Список литературы: