канд. биол. наук, старший преподаватель Ташкентского химико-технологического института, Узбекистан, г. Ташкент
АННОТАЦИЯ
В работе приводятся, результаты сравнительного исследования интерферон индуцирующий активности препарата Мегаферона относительно другого препарата Мегосина, являющегося производным природного полифенола –госсипола и относящегося к «слабым» индукторам интерферона.
Оценка индуцирующей активности препаратов проводилась в монослойной культуре клеток эмбриональной ткани человека и кур, культивированных трипсином. Показано, что Мегаферон, полученный как супрамолекулярный комплекс Мегосина с глицирризиновой кислотой, проявляет способность индуцировать интерферон в 10 раз выше, по сравнению со своим прекурсором -Мегосином, обладая при этом лучшей растворимостью. Эти преимущества нового интерферон индуцирующего препарата открывают широкие возможности его применения в медицинской практике.
ABSTRACT
The paper presents the results of a comparative study of interferon inducing the activity of the drug Megaferon relative to another drug Megosin, which is a derivative of natural polyphenol –gossipole and belongs to the “weak” interferon inducers.
Evaluation of the inducing activity of the preparations was carried out in a monolayer culture of cells of human embryonic tissue and chickens cultured with trypsin.
It was shown that Megaferon, obtained as a supramolecular complex of Megosin with glycyrrhizic acid, demonstrates the ability to induce interferon 10 times higher than its predecessor Megosin, and has better solubility. These advantages of an interferon-inducing drug open up wide possibilities for its use in medical practice.
Ключевые слова: индуктор, интерферон, госсипол, глицирризиновая кислота, Мегосин, Мегаферон, культуры клеток.
Keywords: inducer, interferon, gossypol, glycyrrhizic acid, Megosin, Megaferon, cell cultures.
Лекарственные средства, используемые при инфекционных вирусных заболеваниях, весьма разнообразны. Академик Ф.И. Ершов подразделяет антивирусные препараты на четыре основные группы: этиологические противовирусные химиопрепараты, интерфероны, индукторы интерферона, иммуномодуляторы [1, с. 17].
Кроме того, вирусы и многие бактерии также являются индукторами интерферона. По способности стимулировать интерферонообразование индукторы интерферона, могут быть «сильными» и «слабыми». Можно стимулировать выработку интерферона, вводя в организм определенные вещества. Этим положением обосновывается лечебная и профилактическая эффективность целой группы лекарственных препаратов.
Цель исследования. Поиск новых индукторов интерферона и противовирусных препаратов привел к обнаружению нового высокоактивного индуктора интерферона растительного происхождения – Мегаферон.
Нами изучена интерферон индуцирующая активность препарата Мегаферон – супрамолекулярного комплекса, который состоит из глицирризиновой кислоты и Мегосина, взятых в соотношении 2:1, соответственно.
Глицирризиновая кислота содержится в корнях солодки (лакрицы). Применяется как пищевой подсластитель и, как лекарственное средство в составе препаратов солодка. Химическое название — 20β-карбокси-11-оксо-30-норолеан-12-ен-3β-ил-2-О-β-D-глюкопирануронозил-альфа-D-глюкопиранози-дуроновая кислота. Химическая формула и молекулярная структура глицирризиновой кислоты проведена на рисунке 1 [4].
а б
Рисунок 1. Химическая формула (а) и молекулярная структура (б) глицирризиновой кислоты
Как известно, госсипол является один из пигментов хлопчатника, относится к природным полифенолам, токсичный и в свободном виде практически не растворяется в воде. Его производное b-аминоэтилсернокислая натриевая соль – «Мегосин» относится к группе индукторов интерферона, стимулирующих продукцию собственного эндогенного интерферона. Однако, препарат Мегосин, также имеет недостатки, ограничивающие его применение в медицинской практике: токсичность и малая растворимость в воде.
Как видно, из таблицы 1, препарат Мегосин по индукции интерферона может относиться к «слабым» индуктором. В то же время, его супрамолекулярный комплекс с глицирризиновой кислотой, называемый Мегафероном, хорошо растворим в воде, а интерферон индуцирующая активность достигает 1024 ед/мл, т.е. примерно в 10 раз выше, чем у самого препарата Мегосин [2, с. 6].
Таблица 1.
Составы, интерферон индуцирующая активности и растворимости препаратов
Препарат |
Состав |
Интерферон индуцирующая активность, ед/мл |
Растворимость, в воде |
Мегосин |
b-аминоэтилсернокислая натриевая соль госсипола |
64–128 |
Мало растворим |
Мегаферон |
Мегосин и глицирризиновая кислота (в соотношении 1:2) |
512–1024 |
Хорошо растворим |
Известно, что различные культуры клеток обладают различной интерферон индуцирующей способностью [3, с. 31]. Поэтому, нами проведено сравнительное исследование интерферон индуцирующей активности препаратов Мегосин и Мегаферон в монослойной культуре клеток эмбриональной ткани человека и кур, культивированных трипсином.
Культуры эмбриональных клеток выращены в 96 луночном плоскодонном планшете. Для приготовления первичного монослоя культуры клеток человека использована питательная среда «Игла» (90 %), а для куриных культур клеток питательная среда «199» с 2 % бычьей сывороткой. Планшет помещали в эксикатор с 3,5 % (по объему) СО2 и в течение 48 часов инкубировали в термостате при постоянной температуре 36,6оС. Затем на полученный монослой воздействовали растворами растворенных в питательной среде Мегосина и Мегаферона. После 12 часового термостатирования индуцированный интерферон титровали вирусом штамма A/Aichi/68/H3N2. Через 4 часа визуально оценивали активность интерферона методом четыре «+», с использованием оптического микроскопа. Полученные результаты приведены в таблице 2.
Таблица 2.
Сравнительное исследование интерферон индуцирующий активности препаратов Мегосин и Мегаферон
Культуры клеток |
Препарат |
|||
Мегосин |
Мегаферон |
|||
Доза, мкг/мл |
Титры интерферона, ед/мл |
Доза, мкг/мл |
Титры интерферона, ед/мл |
|
Культуры клеток эмбрионов кур |
100 |
128 |
100 |
1024 |
Культуры клеток эмбрионов человека |
100 |
64 |
100 |
256 |
Как видно, из таблицы 2 оба индуктора взяты в одинаковых дозах, т.е. в 100 мкг/мл. Но интерферон индуцирующая активность препарата Мегаферон больше, чем у своего прекурсора - Мегосина.
Таким образом, нами экспериментально доказана высокая биологическая активность нового препарата растительного происхождения – Мегаферона, обладающего при этом хорошей растворимостью в воде, что открывает широкие возможности его применения в медицинской практике.
Список литературы:
1. Ершов Ф.И. Антивирусные препараты. Справочник. 2-е изд. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006.
2. Намозов О.М. Методы регуляции биосинтеза эндогенного интерферона. Автореф. канд. биологических наук. Ташкент, 2003. - 20 с.
3. Садыков А.С., Ершов Ф.И., Новохатский А.С., Асланов Х.А., Ауелбеков С.А. Индукторы интерферона. Ташкент, 1978. - 304 с.
4. Википедия// [электронный ресурс] Режим доступа: https://ru.wikipedia.org/wiki/Глицирризиновая_кислота. (Дата обращения 20.09.2018).