ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ ГЕКСАНОВОЙ ФРАКЦИИ СПИРТОВОГО ЭКСТРАКТА РАСТЕНИЙ Adonis turkestanica И ЕЁ БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ

АННОТАЦИЯ

Изучен химический состав гексановой фракции спиртового экстракта надземной части растения Adonis turkestanica с применением ГХ-МС. В результате идентифицировано 18 соединений, определено преобладание жирных кислот и их этиловых эфиров. Обнаружено омега-3 - 9,12,15-октадекатриеновая и 11,14,17-эйкозанотриеновая кислоты содержанием 18.1% и 1.5% соответственно. Выявлена рост стимулирующая активность гексановой фракции в концентрации 0,001 и 0,0001%. В концентрации 0.1% наблюдаются ингибирования длины корней и высоты стеблей пшеницы на 36,26% и 46,54%, а для огурцов 28.19% и 61.3% соответственно.

ABSTRACT

The chemical composition of the hexane fraction of the alcoholic extract of the above-ground part of the Adonis turkestanica plant was studied using GC-MS. As a result, 18 compounds were identified, the prevalence of fatty acids and their ethyl esters was determined. Omega-3 - 9,12,15-octadecatrienoic and 11,14,17-eicosanotrienoic acids were found in the content of 18.1% and 1.5%, respectively.

The growth of the stimulating activity of the hexane fraction in concentrations of 0.001 and 0.0001% was revealed. In a concentration of 0.1%, inhibition of the length of roots and height of stems of wheat by 36.26% and 46.54% was observed, and for cucumbers by 28.19% and 61.3%, respectively.

Ключевые слова: Adónis turkestánica (Korsh), надземная часть, спиртовый экстракт, гексановая фракция, газовый хроматограф-масс-спектрометр (ГХ-МС), жирные кислоты, рост стимулирующая активность.

Keywords: Adónis turkestánica (Korsh), aerial part, alcohol extract, hexane fraction, gas chromatograph-mass spectrometer (GC-MS), fatty acids, growth stimulating activity.  

Введение

Адо́нис туркеста́нский - Adónis turkestánica (Korsh) (hbc/1/семейства Ranunculaceae, эндемик Памиро-Алая, включаетоколо30 видов распространён в Европе, Средней Азии и Памире, особенно горной системе Гиссар-Алае [1]. Представители рода предпочитают прохладный климат с тёплым летом и хорошо растут в защищённом, солнечном месте, отмечается продолжительным цветением (рис.1 а,б).

 а)   б)

Рисунок 1. Изображение цветков а) Adónis turkestánica (Korsh) б)Adoniс vernalis L

Адонис туркестанский лекарственное растение, разрешен к медицинскому применению и перспективны для использования в качестве лекарственных средств, как и другие виды Адониса. Он по биологической активности несколько уступает адонису весеннему Adoniс vernalis L. - горицвету весеннему[2]. Все части растения являются ядовитыми, содержит 0.07-0.15% цимарин, адонитоксин, адонивернит, сапонины и фитостерины [3 ].С лечебной целью используется надземная часть растения. В народной медицине настои и отвары надземной части растения применяют при лихорадочных состояниях, водянке, желтухе, инфекционных болезнях, тифе, гриппе, скарлатине и как успокаивающее центральную нервную систему средство[4]. Растение содержит сердечные гликозиды: производные строфандина и конвалтоксин; кумарины: скополетин и умбеллиферон; флавоноиды: витексин, адонивернин, а также каротин [5]., из-за чего представляет практический интерес для создания лекарственных средств и препаратов сельское хозяйства.

Целью данного исследования являются, изучение химического состава гексановой фракции спиртового экстракта надземной части растения Adónis turkestánica (Korsh) и её биологическая активность.

Материалы и методы исследования

Надземная часть растения Adónis turkestánica (Korsh) собраны в 12 июне 2024 года в окрестностях село Майданак Кашкадарьинской области Узбекистана.

Выделение экстрактивной суммы. Воздушно-сухие листья растения Adonisturkestanica (50г) измельчали до степени помола 2.0-3.0 мм, экстрагировали трехкратно 96%-ным этиловым спиртом 1:10 в гидромодуле (3 ×300 мл) методом ультразвукового перемешивания в течение 30, 30, 30 минут как описано [6]. Объединяли спиртовые экстракты, растворитель отгоняли при пониженном давлении. В результате получили 6.2 г экстрактивных веществ (12.4% от воздушно сухой массы – ВСМ) растения.

Получение гексанового экстракта. Полученный спиртового экстракта в количестве 2 грамма реэкстрагировали с растворителями гексаном, хлороформом и этилацетатом. Отделяли растворенные фракции по отделности и отгоняли растворитель на роторном испарителе при 40⁰С. Состав полученных фракций изучали с применением метода ГХ-МС.

Качественный и количественный состав ЭМ определяли на хромато-масс-спектрометре Agilent 5975С Inert MSD/7890A GC. Разделение компонентов смеси проводили на кварцевой капиллярной колонке AgilentHP-INNOWax (30 м × 250 мкм × 0.25 мкм) в температурном режиме: 60 °С (2 мин) – 4 °С/мин до 220 °С (10 мин) – 1 °С/мин до 240 °С (10 мин). Объем вносимой пробы составлял 0.2 мкм, скорость потока подвижной фазы (H₂) – 1.1 мл/мин. EI-MS спектры были получены в диапазоне m/z 10–550 а.е.м.

Компоненты идентифицировали на основании сравнения характеристик масс-спектров с данными электронных библиотек (Wiley Registry of MassSpectral Data-9th Ed.NIST MassSpectral Library, 2011) и сравнения индексов удерживания (ИУ) соединений, определенного по отношению к времени удерживания н-алканов (С₉–С₃₃), а также изучения их масс-спектральной фрагментации с таковыми, описанными в литературе Количественное содержание компонентов эфирных масел вычисляли из площадей хроматографических пиков [7].

Результаты и обсуждения

 Исходя из выше изложенного, представлял интерес изучение химического состава гексановой фракции спиртового экстракта надземной части растения Adónis turkestánica и их биологической активности.

Для чего получили спиртовый экстракт с применением ультразвукового воздействия [6]. Далее реэкстрагированием получили гексановую, хлороформную, этилацетатную и водорастворимую фракцию с соответствующими выходами 10%, 8%, 7.5% и 74.5%. Химический состав гексановой фракции изучали с применением метода ГХ/МС. Полученные данные приведены в табл. 1.

Таблица 1.

Компонентный состав гексановой фракции спиртового экстракта листьев растения Adonis turkestanica (Korsh)

Приведенные данные таблицы показывает, что основными компонентами гексановой фракции спиртового экстракта являются этиловые эфиры-8.2% и свободные жирные кислоты - 45.6%, где доминирует линоленовая и пальмитиновая кислоты с содержанием 18.1% и 16.5%, соответственно, а также следует отметить присутствии омега-3 - 11,14,17-эйкозанотриеновая кислоты содержанием 1.5% и др.

Следующими компонентами оказались углеводороды -22.3%, в частности, нонакозан-19.3% и гептокозан-3.0%, алкены – 3.1% (цис-9-трикозен -2.1%, неофитадиен - 1.0%) и дитерпеновый спирт - фитол 8.60%, а также (9E,12E,15E)-9,12,15-октадекатриен-1-ол -2.3%,9Z)-9,17-октадека-диенал -1.5% и гентриоконтан -5.2%. Cреди идентифицированных компонентов представляют интерес эйкозатриеновая кислота, которая играет роль нутрицевтика, человеческого и грибкового метаболита, а также важно для работы сердца, сосудов и мозга, поддержания в норме уровня холестерина, здоровья суставов, хорошего зрения, красоты кожи и волос и др. [8-10].

Кроме того имеются литературные данные о том, что препараты на основе суммы полиненасыщенных кислот обладают рост стимулирующим эффектом для семян горчицы, клубней картофеля, пшеницы и др. [11,12]. При норме расхода 10-7г/л, более высокие концентрации кислоты 20:4 (ω-6 арахидиновая кислота) снижали прорастания семян [11].

Изучена биологическая активность гексановой фракции спиртового экстракта в лабораторных условиях в пшенице и огурцах по методике [13]. По результатам первичного скрининга гексановая фракция в концентрации 0,001 и 0,0001% удлиняет длину корней пшеницы 6.8% и 9,28%, стеблей 116,3% и 117.0% соответственно. При замочке семян огурцов стимулирующий эффект корней составляет 29,66% и 31,22%, а стеблей -22,59% и 32,25%. Применения более высоких концентраций гексановой фракции, например, 0.1% приводит ингирования длины корней и высоты стеблей пшеницы 36,26% и 46,54%, а в огурцах 28.19% и 61.3% соответственно.

Заключение

Таким образом, изучен химический состав гексановой фракции спиртового экстракта надземной части растения Adonisturkestanica с применением ГХ-МС, в результате идентифицировано 1 8соединений, где преобладают жирные кислоты и этиловые эфиры их, следует отметить присутствии омега-3 - 11,14,17-эйкозанотриеновой кислоты содержанием 1.5% и др.

В результате первичного скрининга определены значительная рост стимулирующая активность гексановой фракции в семенах пшеницы и огурцах в 0.001% и 0.0001% концентрациях. Показано, что замочка семян водной эмульсией гексановой фракции спиртового экстракта увеличивает длину корней пшеницы 6.8% и 9,28%, высоту стеблей 116,3% и 117.0% соответственно. А замочка семян огурцов стимулируют длину корней на 29,66% и 31,22%, а высоту стеблей -22,59% и 32,25%, в 0.1% концентрации наблюдаются ингибирование длины корней и высоты стеблей пшеницы на 36,26% и 46,54%, а в огурцах 28.19% и 61.3% соответственно.

Работа выполнена в рамках бюджетного финансирования Института химии растительных веществ АН РУз.

Список литературы:

1. Пошкурлат А.П. Род горицвет- AdonisL. Систематика, распространение, биология. - М.: Наука. -2000. -198с.
2. To‘xtayev B.YO., Maxkamov T.X., To‘laganov A.A., Mamatkarimov A.I., Maxmudov A.V., Allayarov M.U. Dorivor va ozuqabop o‘simliklar plantatsiyalarini tashkil etish va xom-ashyosini tayyorlash bo‘yicha yo‘riqnoma.// - Toshkent.-2015. -144 b.
3. Исаков Т.Т. Виды растений Адониса и лекарственный препарат // Экономика и социум. -№12(91)-1. С. 1076-1078. - 2021.
4. Блинова К.ф. и др. Ботанико-фармакогностический словарь: Справ. пособие/ Под редакцией К.Ф. Блиновой, Г.П. Яковлева. М.: Высш.шк. -1990. –С.187
5. А.А. Устинова, В.Д. Белоногова. Фармакогностическое исследование шрота травы адониса весеннего // Медицинский альманах. -№ 6 (19).-2011. -C.252-253. https://cyberleninka.ru/article/n/farmakognosticheskoe-issledovanie-shrota-travy-adonisa-vesennego/viewer.
6. Zokirova U.T., Mamatkulova N.M., Khodjaniyazov Kh.U., Khidyrova N.K., Shakhidoyatov Kh.M. Polyprenols of Grape Vitis vinifera L. Leaves// Internat.J. Biochem.Res.Rev. -2013. -V.3. -N2. P. 97-107.
7. Mamarozikov U.B., Bobakulov Kh.M., Turaeva S.M., Zakirova R.P., Rakhmatov Kh.A., Abdullayev N.D., Khidyrova N.K. Сonstituent composition of the hexane fraction of the extract of Haplophyllum perforatum and its insecticidal activity // Chemistry of Natural Compounds. – United States. - 2019. - V. 55, №. 3. - Р. 568-570. DOI 10.1007/s10600-019-02746-z. 
8. Новицкий B.В., Карпов Р.С., Клименков С.В., Салмина А.Б., Котловский М.Ю., Машковская С.В., Кириченко Д.А., Бутьянов Р.А., Кускаев А.П., Большакова Е.В., Котловский Ю.В. Роль жирных кислот плазмы крови в патогенезестабильной стенокардии // Эксперим. и клин.исследования. -№4. -2007. - С.41–45.
9. Новицкий В.В., Карпов Р.С., Котловский М.Ю., Кириченко Д.А., Котловский Ю.В., Содержание ненасыщенных жирных кислот вплазме и эритроцитах крови больных с хронической формой ишемической болезнью сердца // Сиб. мед. обозрение. -Т.66. -№6. -2010.-С.18–21.
10. Захарова И.Н., Суркова Е.Н. Роль полиненасыщенных жирных кислот в формировании здоровья детей // Педиатрия. -Том 88. -№ 6.-2009. -С.84-91.
11. Петухова Н.И., Ландер О.В., Щербакова Д.В., Зорин В.В.Стимулирование роста и антистрессовой устойчивости растений с помощью производных полиненасыщенных липидов гриба Mortierella alpina ГР‑1 //Башкирский химический журнал. -Том 20. -№ 1, 2013. -С. 75-78
12. Рахимова Г.М., Исаев Р.Ф., Халимова Л.Х., Шараева А.А., Галиуллина Ю.Р., Радцева О.В. Влияние производных полиненасыщенных жирных кислот гриба – продуцента арахидоновой кислоты на рост и развитие пшеницы сорта «Омская-636» //Башкирский химический журнал. Том 21. № 2, -2014.-С.74-78.
13. Rakitin’s Y.V. method wasused. Аnd Rudnik V.E. “Primary biological evaluation of chemical compounds as plant growth regulators and herbicides” (Methods for determination regulators and herbicides. L.:Nauka.-1966. -Р.182-197.