АМИНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ ПОДЗЕМНОГО СТЕБЛЯ Cistanche salsa, ПРОИЗРАСТАЮЩЕГО В ФЕРГАНСКОЙ ДОЛИНЕ

АННОТАЦИЯ

Особое внимание уделяется созданию биологически активных добавок с лечебными свойствами на основе растительного сырья, являющегося источником низкомолекулярных биорегуляторов, проявляющих биологическую активность, разработке и внедрению нормативно-технических документов, химическому составу. В связи с этим большое научное и практическое значение имеет проведение научных исследований, направленных на определение состава биологически активных веществ дикорастущего вида растения Cistanche salsa, создание на их основе различных биологически активных добавок и эффективных лекарственных средств, внедрение их в практику, разработка критериев сертификации. В данной статье с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии изучен аминокислотный состав и количество подземной стеблевой части растения Cistanche salsa, собранной в Ферганской долине Республики Узбекистан, а также определены количества следующих аминокислот: Аспарагин, Серин, Глутамин, Гистидин, Глицин, Треонин, Аргинин, Аланин, Лизин, Валин, Метионин, Глутамат, Триптофан, Фенилаланин, Изолейцин, Пролин.

ABSTRACT

Particular attention is paid to the creation of biologically active additives with medicinal properties based on plant raw materials, which are a source of low-molecular bioregulators exhibiting biological activity, the development and implementation of regulatory and technical documents, and the chemical composition. In this regard, it is of great scientific and practical importance to conduct scientific research aimed at determining the composition of biologically active substances of the wild plant species Cistanche salsa, creating various biologically active additives and effective drugs on their basis, introducing them into practice, and developing certification criteria. In this article, using high-performance liquid chromatography, the amino acid composition and quantity of the underground stem part of the Cistanche salsa plant collected in the Fergana Valley of the Republic of Uzbekistan were studied, and the quantities of the following amino acids were determined: Asparagine, Serine, Glutamine, Histidine, Glycine, Threonine, Arginine, Alanine, Lysine, Valine, Methionine, Glutamate, Tryptophan, Phenylalanine, Isoleucine, Proline.

Ключевые слова: Cistanche salsa, ВЭЖХ, аминокислоты: Аспарагин, Серин, Глутамин, Гистидин, Глицин, Треонин, Аргинин, Аланин, Лизин, Валин, Метионин, Глутамат, Триптофан, Фенилаланин, Изолейцин, Пролин.

Keywords: Cistanche salsa, HPLC, Amino acids: Asparagine, Serine, Glutamine, Histidine, Glycine, Threonine, Arginine, Alanine, Lysine, Valine, Methionine, Glutamate, Tryptophan, Phenylalanine, Isoleucine, Proline.

Введение

В настоящее время, с развитием медицины, все большую значимость приобретает доставка лекарственных средств пациентам. Основную часть лекарственных средств, используемых в медицинской практике, составляют биологически активные вещества, выделенные из растительных компонентов. Учитывая это, была поставлена ​​цель выбрать растение с лечебными свойствами, распространенное в нашем регионе, выделить в нем биологически активные вещества, определить его структуру и фармакологические свойства. Одним из таких лекарственных растений является растение Cistanche salsa. Результаты ряда исследований показывают, что использование аминокислоты и ряда биологически активных и полезных веществ Cistanche высокоэффективно в медицине, сельском хозяйстве и пищевой промышленности. Растения в зависимости от его рода, климата, семейства и других особенностей содержат различные биологические активные веществ [1,2].

Цель работы: изучение аминокислотного состава подземного стебля Cistanchesalsa, произрастающего в Ферганской долине.

Материалы и методы исследования

В качестве исследуемого образца использован подземный стебель растения Cistanche salsa, собранный в Алтыарыкском районе Ферганской области в апреле 2024 года. Образец растения был проанализирован на качественные и количественные показатели аминокислот с использованием стандартных образцов, поставленных компанией Sigma Aldrich (Германия). Определение проводилось с помощью флуоресцентного детектора (FLD), установленного на жидкостной хроматографической системе Agilent 1260 II Infinity, производства Agilent Technologies, США. В качестве неподвижной фазы использовалась колонка Poroshell 120 EC-C18 (150 мм × 4,6 мм × 4 мкм), произведённая в США. Предколоночная дериватизация осуществлялась в автоматическом программируемом режиме. Для анализа аминокислот в качестве подвижной фазы использовались: фаза A — раствор дигидрофосфата натрия (40 мМ), pH 7,8, и фаза B — смесь ацетонитрила, метанола и воды (в соотношении 45:45:10), с применением градиентного режима.

Время | Фаза A % (раствор дигидрофосфата натрия, 40 мМ, pH 7,8) | Фаза B % (ацетонитрил : метанол : вода = 45:45:10).Таблица 1.

Таблица 1.

Подвижные фазы для аминокислотного анализа

Скорость потока составляла 1 мл/мин, температура термостата — 40 °C, объём инъецированного образца — 5 мкл, анализ проводился в течение 30 минут, и были получены следующие хроматограммы.

Рисунок 1. Хроматограмма, полученная из стандартных образцов 16 различных аминокислот

Гидролиз аминокислот, содержащихся в образце, проводился следующим образом:

Сначала все образцы были измельчены до размера 1 мм. Измельчённый образец массой 5,0 г был взвешен с точностью до 0,001 мг на аналитических весах (FA220 4N). Далее навеску поместили в колбу объёмом 200 мл с обратным холодильником, добавили 50 мл раствора соляной кислоты (6 N), и колбу установили в термостат при температуре 110 °C. Гидролиз проводился в течение 24 часов с перемешиванием на магнитной мешалке. После завершения гидролиза раствор охладили до комнатной температуры, из него отобрали 10 мл и центрифугировали в течение 10 минут при 12000 об/мин. Затем из центрифугата отобрали 5 мл и нейтрализовали с помощью 6 N раствора гидроксида натрия.

После этого 1 мл раствора профильтровали через фильтр с размером пор 0,45 мкм, поместили в виал и получили следующие результаты [2,3,4,5].

Результаты и обсуждения О растении: Cistanche salsa (принадлежит к семейству Orobanchaceae) — паразитическое растение, произрастающее в основном в пустынных и полупустынных районах. Его морфологические особенности следующие: Корень Cistanche salsaявляется специфическим — он присоединяется к корням других растений (чаще всего представителей семейства Chenopodiaceae) с помощью гаустория (органа-присоски). Самостоятельно существовать не может, живёт за счёт растения-хозяина. Стебель, выходящий из-под земли, — мясистый, толстый, богатый соком и имеет жёлто-коричневый цвет. Высота обычно составляет от 10 до 40 см, иногда и выше. Листья отсутствуют или очень короткие, имеют чешуевидную форму и плотно прилегают к нижней части стебля.Цветки собраны в плотные колосовидные соцветия. Цвет их может варьироваться от сине-фиолетового, жёлтого до белого, диаметр около 1–2 см. Цветков много, они двуполые и имеют колокольчатую форму. Период цветения —весна-лето.Плод — сухая коробочка, внутри которой содержится множество мелких семян. Семена очень мелкие, порошкообразные, легко разносятся ветром.Cistanche salsa произрастает преимущественно на лёгких почвах, каменистых и засушливых участках. Она хорошо адаптирована к жаркому и сухому климату, часто встречается на окраинах естественных лесов или в горных районах.Растение часто взаимодействует с другими видами, а его цветы служат источником нектара для различных насекомых (например, пчёл).Cistanche salsa занимает особое место в экологии растений, а в некоторых регионах используется также в декоративных целях.Химический состав Cistanche salsa включает в себя множество активных веществ, определяющих её фармацевтическую, терапевтическую и экологическую значимость. Особенно в местах её естественного произрастания, Cistanche salsa признаётся источником различных природных биоактивных соединений.Cistanche salsaраспространена в пустынных районах Центральной Азии (включая Казахстан, Узбекистан, Таджикистан). Предпочитает сухие, солончаковые и песчаные почвы, паразитируя рядом с такими растениями, как саксаул и бозалик [1].

Полученные результаты представлены в таблице 2.

Таблица 2.

Состав и количество аминокислот стебля и подземных частей стебля растения Cistanche salsa, произрастающего в Ферганской долине

Полученные результаты были пересчитаны по следующей формуле, чтобы перевести единицы измерения с мг/л в мг/г:

По количественному составу аминокислот в растениях рода Cistanche проведён ряд научных исследований. В частности, в статье о фитохимических исследованиях Cistanche salsa (семейство Orobanchaceae), опубликованной в журнале «Химия растительного сырья» (авторы: Ж.Ж. Каржаубекова¹*, Н.Г. Гемеджиева¹, Ж.С. Набиева²), было определено аминокислотное содержание стеблевой части растения Cistanche salsa, собранного в районе села Айдарли Республики Казахстан, с использованием аналогичных методов. В результате исследования было выявлено наличие 14 аминокислот, среди которых преобладали аргинин, пролин и серин[6]. Результаты показывают, что содержание аминокислот глицина и лизина в подземных частях стебля растения Cistanche salsa, произрастающего в Ферганской долине, показало более высокий Аминокислоты аспарагин, глутамин, гистидин, глутамат, триптофан вообще не обнаружены.

Заключение

Аминокислоты глицин и лизин, которые в большом количестве содержатся в этом растении, оказывают положительное влияние на центральную нервную систему, полезны для снижения неврозов, стресса, бессонницы и раздражительности, улучшают качество сна, при приеме на ночь глицин углубляет сон и повышает утреннюю бодрость, улучшает умственную деятельность, повышает концентрацию внимания, память и скорость реакции, участвует в синтезе коллагена и глицина. Глицин и лизин важны для выработки коллагена в организме, который: сохраняет эластичность кожи, увеличивает прочность волос и ногтей, приносит пользу для здоровья суставов, полезен для сердечно-сосудистой системы, стабилизирует сердечный ритм, помогает поддерживать нормальное артериальное давление, оказывает положительное влияние на состав крови, участвует в синтезе гемоглобина и эритроцитов, на основании следующих свойств, из подземного стебля этого растения можно производить биологически активную добавку, которая лечит эти заболевания.

Список литературы:

1. Хожиматов О.К. О запасах перспективного лекарственного растения Cistanhe salsa G.Beck. // Биоразнообразие в растительном мире Узбекистана: проблемы и достижения. – Материалы республиканской научно-практической конференции. Карши, 2018. – С. 87-89
2. Турсунов Ж.И., Ибрагимов А.А., Ишимов У.Ж. Изучение аминокислотного и витаминного состава надземной и подземной частей растения Cistanche mongolica, произрастающего в Узбекистане // UNIVERSUM: Химия и Биология Научный журнал: Выпуск: 12(90) Москва – 2021 - С. 72–77.
3. Турсунов Ж.И «Изучение новых структурированных стероидов и других нейтральных соединений на примере растений Aconitum septentrionale Koelle и Cistanche mongolica G.Beck». Монография. «Монография – Фергана: Отдел репродукции ФДУ», 2024. – 127 с..
4. Du Y., Sheng J.-H., Cui X.-S., Zhai Z.-X., Dong H.-H., Guo Y.-H. «Определение содержания минеральных элементов в Cistanche tubulosa из различных регионов». Спектроскопия и спектральный анализ. 2012. Т. 32. N10. С. 2824–2827.
5. Du Y., Sheng J.-H., Cui X.-S., Zhai Z.-X., Dong H.-H., Guo Y.-H. Determination of the content of mineral elements in Cistanche tubulosa from different area // Spectroscopy & Spectral Analysis. 2012. Vol. 32. N10. Pp. 2824–2827.
6. Каржаубекова.Ж.Ж, Гемеджиева.Н.Г., Набиева.Ж.С. С фитохимическим исследованиям Cistanche salsa (Orobanchaceae). //Журнал, Химия растиельного сырья. 2016. №4. С. 123–130.