ФИТОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ ДОБАВКИ (БАД) “Cistanche mongolica ”

АННОТАЦИЯ

В настоящее время особое внимание уделяется созданию биологически активных добавок, обладающих лечебными свойствами на основе растительного сырья, являющегося источником низкомолекулярных биорегуляторов, разработке нормативно-технической документации и внедрению в практику, а также классификации по ТН ВЭД на основе их химического состава. В этом направлении важное научно-практическое значение имеет определение состава биологически активных веществ дикорастущего растения Cistanche mongolica G.Beck  и создание на их основе различных биологически активных добавок и эффективных лекарственных средств, их внедрение в практику и разработка критериев сертификации. В данной статье представлен фитохимический состав биологически активной добавки под названием «CISTANCHE MONGOLICA» производимой в Ферганском государственном университете на основе растения Cistanche mongolica, произрастающего на территории Узбекистана. Приведены методы определения содержания микро- и макроэлементов, флавоноидов, аминокислот, витаминов и белков.

ABSTRACT

Currently, special attention is given to the creation of biologically active additives with therapeutic properties based on plant raw materials, which are a source of low molecular weight bioregulators, the development of regulatory and technical documentation, and their implementation in practice, as well as classification according to the Harmonized System (HS) based on their chemical composition. In this regard, the determination of the composition of biologically active substances from the wild plant Cistanche mongolica G.Beck, the creation of various biologically active additives and effective medicinal products based on them, their implementation in practice, and the development of certification criteria have significant scientific and practical importance. This article presents the phytochemical composition of the biologically active supplement called «CISTANCHE MONGOLICA», produced at Fergana State University based on the plant Cistanche mongolica, which grows in Uzbekistan. Methods for determining the content of micro- and macroelements, flavonoids, amino acids, vitamins, and proteins are provided.

Ключевые слова: Cistanche mongolica, высокоэффективная жидкостная хроматография, аминокислоты, флавоноиды, витамины, микро- и макроэлементы.

Keywords: Cistanche mongolica, high-performance liquid chromatography, amino acids, flavonoids, vitamins, micro- and macroelements.

Введение

Спрос на биологически активные добавки (БАД) природного происхождения в мировом масштабе неуклонно растет. БАД, изготовленные на основе компонентов лекарственных растений, востребованы не только в пищевой промышленности, но и в фармацевтической отрасли. В связи с этим одной из актуальных задач является разработка и внедрение международных кодов товаров для БАД, производимых в нашей стране, с целью их выхода на мировой рынок. Правильное определение кодов товаров на основе их химического состава позволяет обеспечить корректное взимание таможенных пошлин в процессе экспортно-импортных операций и способствует развитию соответствующих отраслей промышленности [1].

Материалы и методы исследования

Объектом исследования являлась биологически активная добавка «CISTANCHE MONGOLICA», производимая на базе подземной части растения Cistanche mongolica в Ферганском государственном университете.

Флавоноидный состав данного товара определялся с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Условия хроматографии: хроматограф – Agilent Technologies 1200; детектор – диодно-матричный; колонка – Eclipse XDB – C18, 3 мкм, 4,6×150 мм; объем инъекции – 10 мкл; подвижная фаза (в градиентном режиме) – ацетатный буфер (рН 3,0–3,2); скорость фазы – 1,0 мл/мин; ацетонитрил: (70%:30%) 0–6 мин, (65%:35%) 6–9 мин, (55%:45%) 9–15 мин, (70%:30%) 15–20 мин; длина волны детекции – 370 нм .

Витаминный состав определялся методом ВЭЖХ в градиентном режиме. В качестве подвижной фазы использовались ацетонитрил и буферный раствор. Спектральные данные получены в диапазоне длин волн от 200 до 400 нм. Значение рН буфера — 2,92. Соотношения ацетонитрил–буфер: 4:96 (0–6 мин), 10:90 (6–9 мин), 20:80 (9–15 мин), 4:96 (15–20 мин). Объем инъекции — 10 мкл; скорость потока — 0,75 мл/мин; колонка Eclipse XDB – C18, 5,0 мкм, 4,6×250 мм². Детекция осуществлялась при длинах волн 254, 272, 292, 297 и 360 нм.

Аминокислотный состав определялся по стандартным образцам фирмы Sigma Aldrich (Германия) с использованием ВЭЖХ-установки Agilent 1260 II Infinity (США) с флуоресцентным детектором (FLD). Стационарная фаза – колонка Poroshel 120 EC-C18 (150 мм × 4,6 мм × 4 мкм). Предколоночная дериватизация выполнялась в автоматическом режиме. Подвижные фазы: A – раствор дигидрофосфата натрия (40 мМ, pH 7,8); B – ацетонитрил:метанол:вода (45:45:10) – применялись в переменном режиме.[2-4]

Общий белковый состав определялся методом Кьельдаля. Суть метода заключается в гидролизе органических веществ концентрированной серной кислотой с последующим образованием сульфата аммония из аминогрупп белков. Остаточная кислота титруется щелочью. Из количества аммиака рассчитывается содержание азота, а затем и общее количество белка. Анализ проводился на гомогенизированной пробе с точностью до 0,1%. Опыт проводился в кельдалевской колбе согласно методическим указаниям.

Углеводный состав анализировался методом газовой хроматографии (ГХ) с пламенно-ионизационным детектором на приборе Shimadzu GC-2010. Условия: колонка Shimadzu Rxi-624Sil MS (30 м × 0,25 мм × 1,40 мкм); скорость подвижной фазы (азот) – 1,5 мл/мин; температура инжектора – 260°C, детектора – 280°C, колонки – 230°C. Образцы анализировались в виде ацетатов альдонитрилов .

Содержание макро- и микроэлементов определялось методом нейтронно-активационного анализа. Принцип метода основан на регистрации спектров гамма-излучения радиоактивных изотопов, образующихся при облучении образца нейтронным потоком. Выполнение анализа проводили на ядерном реакторе типа WWR, принадлежащем Академии наук Республики Узбекистан [5-6].

Результаты и обсуждения

Результаты количественного анализа флавоноидного состава биологически активной добавки «CISTANCHE MONGOLICA» представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Количественные результаты анализа флавоноидов БАД «CISTANCHE MONGOLICA» (%)

Витаминный состав биологически активной добавки «CISTANCHE MONGOLICA» представлен в таблице 2.

Таблица 2.

Количественные результаты анализа содержания витаминов в биологически активной добавке «CISTANCHE MONGOLICA» (%)

Аминокислотный состав биологически активной добавки «CISTANCHE MONGOLICA» приведён в таблице 3.

Таблица 3.

Аминокислотный состав биологически активной добавки «CISTANCHE MONGOLICA» (мг/г)

*– незаменимые (эссенциальные) аминокислоты

Общее содержание белка в биологически активной добавке «CISTANCHE MONGOLICA» приведено в таблице 4.

Таблица 4.

Общее содержание белка в биологически активной добавке  «CISTANCHE MONGOLICA» (%)

Углеводный состав биологически активной добавки «CISTANCHE MONGOLICA» приведён в таблице 5.

Таблица 5.

Углеводный состав биологически активной добавки «CISTANCHE MONGOLICA»

Состав и содержание макроэлементов в биологически активной добавке «CISTANCHE MONGOLICA» приведены в таблице 6.

Таблица 6.

Содержание макроэлементов в биологически активной добавке «CISTANCHE MONGOLICA» (мкг/г)

Содержание токсичных элементов в биологически активной добавке Cistanche mongolica представлено в таблице 7.

Таблица 7.

Содержание токсичных элементов в биологически активной добавке «CISTANCHE MONGOLICA» (мкг/г)

Состав и содержание микроэлементов в биологически активной добавке «CISTANCHE MONGOLICA» приведены в таблице 8.

Таблица 8.

Содержание микроэлементов в биологически активной добавке «CISTANCHE MONGOLICA» (мкг/г)

Анализ результатов исследования

Исходя из данных в таблице 1, установлено, что биологически активная добавка «CISTANCHE MONGOLICA» содержит флавоноиды: кверцетин, апигенин, рутин, лютеолин.

Результаты, представленные в таблице 2, показывают, что биологически активная добавка «CISTANCHE MONGOLICA» содержит витамины В1, В2, B6, B9, PP, C, а также количественные показатели витаминов, среди которых содержание витамина C значительно отличается и имеет явное преобладание по сравнению с другими витаминами.

Согласно данным таблицы 3, в составе биологически активной добавки «CISTANCHE MONGOLICA» присутствуют 19 аминокислот. Состав аминокислот в среднем составляет 0,338 мг / 1000 мг. Среди изученных аминокислот наибольшее содержание наблюдается в глутамине (1,38 мг / 1000 мг), аспарагине (0,92 мг / 1000 мг) и глицине (0,90 мг / 1000 мг).

Исходя из данных таблицы 4, расчетные результаты показывают, что содержание белков в биологически активной добавке «CISTANCHE MONGOLICA» составляет 5,16%.

Из данных таблицы 5 видно, что в составе биологически активной добавки «CISTANCHE MONGOLICA» были определены количественные показатели фруктозы и глюкозы, а содержание сахара в данной добавке составляет 0%.

Согласно данным таблиц 6-8, в составе биологически активной добавки «CISTANCHE MONGOLICA» присутствуют высокие уровни калия, натрия, железа и кальция. Результаты анализа K, Na, Ca в биологически активной добавке «CISTANCHE MONGOLICA» совпадают с данными литературы по другим видам растения Cistanche, таким как Cistanche tubulosa и Cistanche phelypae [12]. В образце исследуемой биологически активной добавки CISTANCHE MONGOLICA зафиксировано более высокое накопление Zn по сравнению с другими микроэлементами, что также характерно для Cistanche phelypae, в то время как образцы из Китая характеризуются высоким содержанием Fe. На основе полученных данных можно сделать вывод, что содержание токсичных элементов в биологически активной добавке «CISTANCHE MONGOLICA» очень низкое, а количество жизненно важных элементов значительно выше.

Заключение

В таможенной практике все виды кормов, полученных из растительного сырья, животных продуктов или с минеральным составом, классифицируются под кодом 21 группы с номером 2106 90 980 9. Исходя из этого, для биологически активной добавки «CISTANCHE MONGOLICA», на основе ее состава, включая витамины, флавоноиды, белки, углеводы, аминокислоты, микро- и макроэлементы, а также токсичные элементы, мы предлагаем следующий код в рамках Тарифной классификации внешней торговли Республики Узбекистан (ТК ВТ):

Считаем целесообразным при переходе с текущего кода подкатегории 2106 90 980 8 на 2106 90 980 9 также внести подкатегории для готовой формы биологически активной добавки, полученной из растительного сырья (фито-чай, таблетки, капсулы), в подкатегории для кода 2106 90 980 8.

Список литературы:

1. “Товарная номенклатура внешнеэкономической деятельности Республики Узбекистан”. Министерство внешней торговли Республики Узбекистан, Государственный таможенный комитет Республики Узбекистан. 2017 г., С.655.
2. Турсунов Ж.И., Ибрагимов А.А., Ишимов У.Ж. Изучение аминокислотного и витаминного состава надземной и подземной частей растения Cistanche mongolica, произрастающего в Узбекистане // UNIVERSUM: Химия и Биология ISSN: 2311-5459 УДК: 54+57 Выпуск: 12(90) Москва – 2021. –С. 72–77.
3. Бубечкова В.Н., Сумохлинов Ю.А., Гончаров Н.Ф. Аминокислотный состав некоторых представителей растений семейства розоцветных // Человек и его здоровье. 2009 №3 с. 134-137.
4. Шуляковская Т.А., Ветчинникова Л.В., Ильинова М.К., Канючкова Г.К., Репин А.В., Веселкова Л.Л. Аминокислотный, жирно-кислотный и углеводный состав сока некоторых видов рода Betula // Растительные ресурсы 2006, Т.42, вып.2, с. 69-77.
5. Du Y., Sheng J.-H., Cui X.-S., Zhai Z.-X., Dong H.-H., Guo Y.-H. Определение содержания минеральных элементов в Cistanche tubulosa из различных регионов // Спектроскопия и спектральный анализ. 2012. Т. 32. N10. - С. 2824–2827.
6. Турсунов Ж.И., Ибрагимов А.А., Курбанов Б.И. Макро- и микроэлементный состав Cistanche mongolica // UNIVERSUM: Химия и Биология. ISSN: 2311-5459. УДК 54+57. Выпуск: 9(75). Москва, 2020.-  С. 34.