ВЫДЕЛЕНИЕ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИРУЛЕНТНОСТИ МЕСТНОГО ШТАММА ГРИБА PHYTOPHTHORA INFESTANS ИЗ КЛУБНЕЙ КАРТОФЕЛЯ

Зооспорангии гриба Ph.infestans, выросшие на клубнях картофеля образцов 4, 5 и 9 с помощью микологической петли были пересеяны на питательный агар с овсяными отрубями,  нутом и картофелем.

Колонии гриба Ph.infestans на питательной среде с овсяными отрубями на 6 сутки роста бесцветные, редким едва заметным  мицелием, на агаризованной картофельной среде  колония гриба выпуклая, рыхлая, белого цвета  с ровными краями (рис.2).

Изучение морфологии гриба Ph.infestans, выращенного на питательной среде с картофельным агаром, показало,  что  спорангии гриба  подобны форме лимона. Наблюдалось наличие амфигийных антеридий,  оогоний, а также хламидоспор (рисунок 3). Полученные нами данные по морфологии Ph.infestans были сопоставлены нами с морфологическими данными D. Shimelash [11] и S.Gómez-Gonzàlez [12], что показало их соответствие.

Рисунок 3. Микроскопический анализ морфологии Ph.infestans, выделенного из клубней картофеля:

 а) спорангий в виде лимона; b) хламидоспора; с) амфигийный антеридий и оогоний

Для идентификации вирулентности гриба, возбудителя инфекции, был использован метод повторного искусственного инфицирования [9]. Клубни здорового картофеля сорта Пикассо были инфицированы микроскопическим грибом Ph.infestans. Инфицированные клубни инкубировали при температуре 24°С в течение 21 суток.

Рисунок 4. Клубни картофеля сорта Пикассо, искусственно инфицированные грибом Ph.infestans:

(21 суточная инкубация). 1 – инфицирование мазочным методом , 2 – прививочное инфицирование, 3 – контроль.

На протяжении исследований на 12 сутки в опытных вариантах наблюдались изменения по сравнению с контролем, и на повторно инфицированных картофелинах были образованы коричнево-бурые пятна (рисунок 4). После повторного инкубирования нарезанных клубней в таких же условиях, при микроскопическом анализе наблюдалось появление на этих кусочках картофеля зооспорангиев гриба Ph.infestans.

Таким образом, как показывают полученные результаты, патологические и морфологические признаки гриба, выделенного из  пораженного Ph.infestans картофеля, сопоставимы с признаками, которые описаны авторами в научной литературе [13, 11, 12]. Изучение  вирулентности в целях определения гриба как возбудителя заболевания, показало, что Ph.infestans при повторном инфицировании проявляет признаки заболевания. Согласно результатам исследований из 9 изученных клубней картофеля, 3 заражены фитофторозом, что подтвердило проведение микроскопического анализа о наличии в них зооспорангиев микроскопического гриба Ph.infestans.

Список литературы:

1. Пашков Д.А., Ветрова Е.В. Идентификация и биологическая характеристика фитопатогенов вызывающих гнили клубня картофеля при хранении / Конференция Ломоносов 2019. Секция микробиология. –С. 1-21.
2. Бонадысев С.А., Иванюк В.Г., Журомский Г.К. Фитосанитарное состояние картофеля в Беларуси и пути его улучшения // Матер. междунар. юбилейной науч.-практ. конф.: научные труды. – Минск, 2003. – Ч. 2. – С.105-119.
3. Хамираев У.К. Наличие Phytophthora infestans (mont.) de bary на территории узбекистана и применение современных фунгицидов в борьбе с ней // Бюллетень науки и практики — Bulletin of Science and Practice научный журнал (scientific journal) Т.4. №2. 2018 г. –С. 148-152.
4. Филлипов А.В. Фитофтороз картофеля // Защита и карантин растений. – 2005. – №4. – С.74-91.
5. Duniway, J. M. Role of physical factors in the development of Phytophthora diseases. In Erwin, D. C., Bartnicki-Garcia, S. and Tsao, P. H. (eds). Phytophthora: Its Biology, Taxonomy, Ecology, and Pathology. APS, St. Paul, MN, 1983. pp. 175-187.
6. Каримов А., Джумабаев К., Нерозин С., Эшмуратов Д. Болезни картофеля и меры борьбы с ними / Проект “Улучшенные технологии орошения перспективных сортов картофеля для мелких фермерских хозяйств подверженных стрессам в условиях Ферганской долины”. Руководство для фермеров и специалистов водного и сельского хозяйства. Ташкент, 2014. –С. 2-14.
7. Поликсенова В.Д., Храмцов А.К., Пискун С.Г. Методические  указания  к  занятиям  спецпрактикума  по  разделу «Микология. Методы экспериментального изучения микроскопических грибов» для студентов 4 курса дневного отделения специальности «G 31 01 01 – Биология» / Мн.: БГУ, 2004. – 36 с.
8. Дьяков Ю.Т., Еланский  С.Н. Общая фитопатология : учебное пособие для среднего профессионального образования /Москва : Издательство Юрайт, 2017. — 230 с.
9. Яруллина Л.Г., Ибрагимов Р.И., Цветков В.О., Яруллина Л.М., Шпирная И.А. / Цитохимические и биохимические методы исследования микроорганизмов – возбудителей болезней растений: учебное пособие // Уфа: РИЦ БашГУ, 2016. -92 с.
10.  Еланский С. Н. Особенности развития фитофтороза в России // Защита картофеля. 2015. – № 1. – С. 8-11., Дьяков Ю.Т., Еланский  С.Н. Общая фитопатология : учебное пособие для среднего профессионального образования /Москва : Издательство Юрайт, 2017. — 230 с.
11.  Daniel Shimelash, Birtukan Dessie/ Novel characteristics of Phytophthora infestans causing late blight on potato in Ethiopia // Current Plant Biology 24 (2020) 10017. –P. 1-9.
12.  Gómez-Gonzàlez S., Castañeda-Sànchez D., Morales-Osorio J. / Media preferences, micro-morphometric analysis, and cardinal growth temperature determination for Phytophthora infestans sensu lato isolated from different hosts in Colombia // Brazilian Journal of Biology, 2020 , vol. 80, no. 1 pp.167-179.
13. Каримова В.К., Нечай Н.Л., Есимсеитова А.К., Нурмаганбетова А.Н., Измаганбетова А.Ж., Какимжанова А.А. / Использование изолятов гриба Phytophthora infestans в клеточной селекции картофеля // Биотехнология. Теория и практика. 2013, №4, стр. 36-41.