Микробиологический анализ образцов чёрной смородины (Ribes Nigrum L.)

АННОТАЦИЯ

В результате проведенных исследований определен видовой состав фитопатогенных грибов, связанных с увяданием чёрной смородины Ribes nigrum L.  В поражённых растениях выявлено присутствие грибов трех родов - Fusarium spp., Alternaria spp.,Verticillium spp. Установлено наибольшее инфицирование кустов смородины грибами Verticillium и Fusarium – наиболее вероятных агентов трахеомикозного увядания, во второй половине вегетации (июль – август), что связано с температурным режимом территории Оренбургской области.

ABSTRACT

As a result of carried out studies, the species composition of phytopathogenic fungi related to the wilt of blackberry Ribes nigrum L. has been determined. In affected plants, the presence of fungi of three genera Fusarium spp., Alternaria spp., Verticillium spp. is identified. The greatest infection of currant bushes with fungi Verticillium and Fusarium which are the most probable agents of tracheaemic fading is found in the second half of the vegetation period (July-August) that is related to the temperature regime of the territory of the Orenburg region.

Введение

В последнее десятилетие в отдельных регионах РФ и за рубежом наблюдается массовое увядание чёрной смородины (Ribes nigrum L.). Ареал распространения и вредоносности заболевания включает Воронежскую, Оренбургскую, Ростовскую области, Нижнее и Среднее Поволжье, регионы Восточной Украины (Харьковская, Донецкая области) и Северо-Западного Казахстана [7,с.545].  В более северных областях (Брянская, Орловская, Тамбовская, Республика Башкортостан) это заболевание не зарегистрировано. Очерченный ареал охватывает степные регионы, характеризующиеся резко континентальным климатом с жарким и засушливым летом. При маршрутных исследованиях  проведённых нами в 2010 - 2015 гг.  в разных типах насаждений  Оренбургской области и на северо-западе Казахстана было отмечено усыхание 75-80% кустов культуры [11, с.24]. В частных садах средней и южной зоны Самарской области после 2010 г. сохранилось не более 5% кустов старых посадок, а вновь высаженные саженцы чёрной смородины на 90% усыхали в течение 3-4 месяцев после посадки. Некоторые исследователи  указывают на грибную природу данного заболевания, относя его к вилту [8, с.21]. Имеются сведения, что гибель R. nigrum может быть вызвана грибами рода Verticilliumspp. ,    Fusarium spp. и Alternaria spp. [5,с.36]. В связи с этим в последние годы ведется изучение видового состава фитопатогенных грибов, связанных с этой патологией.

Целью работы было определить  комплекс фитопатогенных грибов, заселяющих корни  и ветви черной смородины в условиях Оренбургской области.

Методика исследования

Полевые исследования проводили с апреля– по сентябрь 2013–2015гг. на экспериментальной базе ФГУСХП им. С.А. Попова (с. Нижний Гумбет, Октябрьского района) и  КХ «Сакмарское».Для микробиологического анализа отбирали  образцы растений черной смородины с хорошо выраженными признаками заболеваний: ослабленные, погибшие растения (рис. 1) и внешне здоровые (контрольные).

Рис.1 Образцы черной смородины, с признаками увядания и усыхания (1), контрольные растения без признаков заболевания(2)

Образцы отбирали с интервалом в 2 недели. Выделение грибов осуществляли методом «влажных камер» [2, с.552]. Исследуемые фрагменты образцов помещали в одноразовые чашки Петри, выстланные фильтровальной бумагой. Затем материал заливали дистиллированной водой с полным погружением, чашку закрывали  и оставляли  на сутки  для пропитки водой. После этого  избыток воды сливали. Образцы оставляли в чашках  при комнатной температуре на рассеянном свете. Через 3-4 дня осуществляли просмотр образцов. Наблюдение продолжали регулярно в течение месяца. Рост  мицелия и спороношения грибов  родов Fusariumspp.и Alternariaspp.наблюдался   через 24 - 48 часов, тогда как конидиальное спороношение гриба Verticilliumspp.отмечалось только через 2-3 недели.  Идентификацию грибов осуществляли по определителю болезней растений [10, с.303].

Результаты исследования

При микроскопировании в образцах выявлены грибница, а также хламидоспоры и конидии грибов Fusarium spp., Alternariaspp.и  Verticillium spp. (рис. 3-5). В некоторых образцах встречались конидиеносцы и конидии плесневых  грибов: пенициллиум (Penicillium spp.), аспергилл (Aspergillus spp.), ризопус (Rhyzopus spp.) и мукор (Mucor spp.).  На почках единичных образцов выявлены клейстотеции мучнистой росы Sphaerothecamors-uvae (Schw.) Berk.et Curt., а на корнях мицелий и хламидоспоры грибов Thielaviopsis spp. и Rhyzoctonia spp. (в данной работе не анализируются).

Помимо грибов в образцах было выявлено наличие  нематод и обыкновенного паутинного клеща (рис. 2). Результаты анализов представлены в таблице 1.

Данные грибы были выявлены как в живых и увядающих, так и в усохших образцах (Рис.3-5).

           Рис. 2. Tetranychusurticae                                           Рис. 3  Fusarium spp.

           (паутинный клещ)   ув. 1x100    

                          Рис. 4.Verticillium spp.                                 Рис. 5. Alternaria   spp.

Таблица № 1.

Частота встречаемости грибов на образцах черной смородины

*Примечание:

+ –низкая частота встречаемости патогена (поражено до 10 % растений);

++ –средняя частота встречаемости патогена (поражено до 50 % растений);

+++ –высокая частота встречаемости патогена (поражено более 50 % растений);

– –отсутствие патогенна.

В весенне-летний период и поздней осенью грибов рода Verticicillium spp.просматривается в наибольшем количестве или они отсутствуют. Его постепенное развитие начинается с середины июня и максимума достигает в июле-августе. Это совпадает с массовым увяданием растений черной смородины.

Грибы рода Fusarium spp.- встречаются в значительных количествах с ранней весны до середины мая. Далее их количество несколько уменьшается и вновь увеличивается в августе. После этого его присутствие уменьшается до минимума.

Грибы рода Alternaria spp.- отмечено максимальное количество рано весной (апрель) и в мае-июне. В остальное время он находится в небольшом количестве до конца сентября.

Вывод

В результате проведенных исследований в поврежденных растениях выявлено присутствие грибов трех родов - Fusarium spp., Alternaria spp., Verticillium spp. В ряде случаев обнаружены нематоды и паутинный клещ и грибы других видов. Обращает на себя внимание факт активации грибов во второй половине вегетации (июль-сентябрь), что определяется температурными факторами и низкой влагообеспеченностью. В условиях Оренбургской области наиболее жаркий период приходится на указанные месяцы. Выявлено, что в случае комплексной инфекции с Verticillium spp. и Fusarium spp.у растений наблюдалось увядание и последующая гибель. Наиболее вероятной причиной гибели черной смородины следует считать грибы рода Verticillium. Полученные результаты  позволяют конкретизировать этапы исследований, а также определить приёмы профилактики и терапии увядания чёрной смородины.