Зависимость полиморфизма генов свертывания крови от групповой и резусной принадлежностей крови у женщин

АННОТАЦИЯ

В работе представлены результаты исследования полиморфизма генов FII, FV, FVII, FGB, SERPINE1, ITGB3 и результаты определения групповой и резусной принадлежностей крови пациенток, находившихся на учете в женской консультации Краевого перинатального центра г. Краснодара. Выявлена общность исследуемых полиморфизмов с генетическим фактором – группой крови.

ABSTRACT

Relations between polymorphisms of genes FII, FV, FV, FGB, SERPINE1, ITGB3 and group-rhesus supplies blood of patients, who was registered in the antenatal clinic of the Children's Regional Clinical Hospital of Krasnodar has been researched. Study revealed common polymorphisms to genetic factors - blood group.

Введение. Появление и проявление патологических аллелей генов может возникнуть при изменение внешних или внутренних воздействий (особенности питания, беременность, инфекции, прием лекарств, образ жизни тяжелый физический труд, стресс и т.д.) на организм. Причем, многие аллельные гены могут не проявлять патологическую активность долгое время. Предпосылками для формирования патологических процессов, по мнению Ф.Н. Гильмияровой и др. [1] является принадлежность к определенным группам крови системы антигенов AB0. Группы крови АВ0 у человека определяются тремя альтернативными вариантами гена гликозилтрансферазы (А, В, 0), расположенного на 9-й хромосоме, наследуясь с учетом множественного принципа: действие различных вариантов одного гена проявляется в равной степени, независимо друг от друга. На основании нуклеотидной последовательности полиморфизма, который детектируется на данной хромосоме, к настоящему моменту описано большое число аллелей гена АВ0. Но только те полиморфные замены, которые приводят к смене аминокислоты, являются критичными в определении активности и субстратной специфичности гликозилтрансферазы и, таким образом, ответственными за различный АВ0-фенотип [2].

Целью исследования стало определение зависимости полиморфизма генов свертывающей системы крови от генов групповой и резусной принадлежностей крови у беременных женщин.

Материал и методы исследования. С целью изучения влияния генетических факторов на полиморфизмы генов свертывания крови было проведено исследование крови 100 женщин с диагнозом привычная невынашиваемость беременности (ПНБ). Исследования проводились с определением групп крови системы антигенов АВ0, Rh-фактора, и определением наличия полиморфизма генов свертывающей системы крови. Определение группы крови у реципиентов проводилось, стандартными изогемаглютинирующими сыворотками двух серий каждой группы или моноклональными антителами. Анализ полиморфизма генов проводился методом ПЦР с ориентацией на 3 варианта результатов: 1) гомозигота по аллели 1 (нормальная гомозигота); 2) гетерозигота; 3) гомозигота по аллели 2 (патологическая или мутантная гомозигота).

При анализе 100 историй болезни пациенток обнаружено, что кровь пациенток с 0_αβ(I) Rh⁺ групповой и резусной принадлежностью составляла 18%, с А_β(II) Rh⁺ – 39%, с B_α(III)Rh⁺ – 25%, для AB₀(IV)Rh⁺–лишь 4%. Однако количество пациенток не обладающих резус-фактором у 0_αβ(I)Rh^- и A_β(II)Rh^-принадлежностью составила по 5%, с B_α(III)Rh^-– 4%. Кровь пациенток, содержащая антигены AB₀(IV)Rh^- не была получена в результате исследования.

Для изучения связи полиморфизмов (гетерозиготный, гомозиготный патологический или нормального варианта полиморфизма аллельных генов) генов свертывания крови и генов групповой и резусной принадлежностей были выбраны следующие гены свертывающей системы крови: ген FV, ген FII, ген FVII, гены FGB, PAI-1, ITGB-3.Результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Количество полиморфизма, случаев

Общее количество случаев, когда гены не имели патологических изменений (гомозигота нормальная), составляли 433 из 600 рассмотренных случаев. Гены имеющие гетерозиготные полиморфизмы были отмечены в 130 случаях, гомозиготные патологические полиморфизмы - в 37 случаях. Все полученные данные были обобщены в таблицу 2.

Таблица 2.

Полиморфизмы генов свертывания крови и групповой и резусной принадлежностей

«-» – Знак минус означает отсутствие данной формы полиморфизма, Гет. – Гетерозигот, Г.П. – Гомозигота патологическая (мутантная), Г.Н. – Гомозигота нормальная

Полиморфизмы (гетеро-, гомо- патологий) гена PAI-1, встречались в 83 пробах крови пациенток, 29 из них имели A_β(II)Rh⁺ группу крови; полиморфизм гена FV встречался только в гетерозиготной форме (шесть из 100 проб); в генах FII и FVII полиморфизмы обнаружены лишь в единичных случаях: для FII была отмечена только гетерозиготная форма, для FVII – патологическая гомозигота. Для оценки влияния генов свертывания крови на формирование ПНБ проводился подсчет частот встречаемости аллелей по формуле 1.

           P(A)= (2N₁ + N₂)/2n,                                                  (1)

где P – частота встречаемости аллели; А – аллель; N₁ – число патологических гомозигот по исследуемому аллелю; N₂ – число гетерозигот; n – объем выборки.

Полученные данные были внесены в таблицу 3.

Таблица 3

Частота встречаемости полиморфизма генов

Наиболее часто встречаются в гетерозиготной и патологической гомозиготной форме гены FGB, PAI-1, ITGB-3. Следует заметить, что полиморфизмы аллелей FGB закономерны и являются клинически значимыми для определения патологических процессов при ПНБ у женщин с первой группой крови – 0_αβ (I) Rh⁺ и Rh^- принадлежностью, второй группой крови – A_β (II) Rh⁺ и Rh^- принадлежностью, с третьей группой крови – B_α (III)Rh⁺ и Rh^- принадлежностью; полиморфизмы генотипаITGB-3 также закономерны и являются клинически значимыми у женщин с первой группой крови – 0_αβ (I) Rh⁺, второй группой крови – A_β (II) Rh⁺, с третьей группой крови – B_α (III)Rh⁺.

Для расчета критерия  были взяты часто встречаемые полиморфизмы генов свертывания крови (таблица 4).

Таблица 4

Расчет критерия  для антигенов системы АВ0 и антигенов системы Резус (5% значимость=5,99)

Расчет критерия  для 0_αβ(I) Rh⁺ групповой и резусной принадлежностей генов FGB, PAI-1, ITGB-3 указывает на то, что при 5% уровне значимости нуль гипотеза опровергается только для генотипов FGB, ITGB-3, для 0_αβ(I) Rh^- – для генотипов PAI-1 и ITGB-3 нуль гипотеза принимается, т.е. расхождения случайны.

У пациенток с A_β(II)Rh⁺ группой крови для генотипов FGB, ITGB-3 нуль гипотеза опровергается, при A_β(II) Rh^- – расхождения случайны у генотипов PAI-1 и ITGB-3.

Критерия  для B_β(III) Rh⁺ групповой и резусной принадлежностей показал, что нуль гипотеза принимается только для генотипа PAI-1. В случае с антигенами эритроцитов B_β(III) Rh^-нуль гипотеза принимается, расхождения случайны.

Расхождения между эмпирическими и теоретическими частотами для AB₀(IV) Rh⁺ принадлежностей (четвертая положительная группа) являются случайными. Для антигенов эритроцитов, относящихся к AB₀(IV) Rh^-расчет критерия   отсутствовал.

Таким образом, в результате проведенного исследования, нами было отмечено, что эритроциты, содержащие антигены A_β (II) Rh⁺ группы крови имели наибольшее количество патологических полиморфизмов генов свертывания крови (30 случаев из 37);наибольшая частота встречаемости полиморфизма характерна для генов свертывания крови FGB (0,2), PAI-1 (0,565), ITGB-3 (0,21), наименьшая частота встречаемости, следовательно, возникновение полиморфизма генов свертывания крови, характерна для генов FV (0,03), FII (0,005), FVII (0,01); наиболее значимыми в диагностике возникновения патологических процессов во время течения процесса беременности женщин являются полиморфизмы гена FGB и ITGB-3.        

Антигены системы АВ0 и антигены системы Резус могут оказывать влияние на возникновение патологических процессов системы свертывания крови, что может быть использовано в акушерской практике.