Влияние катионов металлов на механические и адгезионные свойства адгезивов

АННОТАЦИЯ

Для создания катехол-содержащих полимеров разветвленной и линейной структуры может быть применен ряд подходов. Данные полимеры представляют собой удобную платформу для исследования роли катехольной группы в целом в создании адгезионной связи между полимером и субстратом. Одним из неоспоримых целевых применений подобных материалов являются адгезивы и герметики медицинского назначения – в данных полимерных системах катехольная группа способна усиливать адгезию ко влажным поверхностям различных живых тканей.

Поскольку для адгезии катехол-содержащих материалов большое значение имеет процентное содержание катехола в составе макромолекулы, ставится задача получения полимеров с мольным содержанием катехола в составе основной полимерной цепи не более 30%. Конечным применением данных о биоимитирующих полимерах является использование их в композиционных адгезионных материалах, чувствительных к давлению, поэтому отдельного внимания требует вопрос совместимости получаемых полимеров с другими компонентами адгезива.

Применение нековалентного сшивания за счет введения ионов многовалентных металлов позволяет изменять адгезионные и механические свойства гидрогелей на основе биоинспирированных катехол содержащих полимеров простым варьированием соотношения катехольных фрагментов и ионов металлов. Причем природа металла значительным образом влияет на указанные свойства. Так, гидрогели, сшитые ионами кальция и магния могут применяться в качестве био-клеев, а ионами железа и никеля – для склеивания металлов. Поэтому исследование влияния природы и количества вводимых ионов многовалентных металлов является важной научной и практической задачей.

ABSTRACT

To create catechol-containing polymers of a branched and linear structure, a number of approaches can be used. These polymers represent a useful platform to study the role of a catechol group generally in the creation of an adhesive bond between the polymer and the substrate. One of the indisputable target applications of such materials are adhesives and sealants for medical use – the catechol group is able to enhance the adhesion to wet surfaces of various living tissues in polymer systems.

As far as for adhesion catechol-containing materials the percentage of catechol in macromolecule composition is of great importance, the task of producing polymers with a molar content of catechol in the main polymer chain consisting of not more than 30% is set. The end use of these biomimetic polymers is their use in composite materials of the pressure-sensitive adhesive; therefore, the issue of compatibility of polymers obtained with other components of the adhesive is required special attention.

The use of a non-covalent cross-linking due to the introduction of polyvalent metal ions allows to modify the adhesive and mechanical properties of hydrogels based on bioinspired catechol-containing polymers by the simple variation of the ratio of catechol fragments and metal ions. And the nature of the metal affects these properties significantly. Thus, hydrogels crosslinked with calcium and magnesium ions can be used as bio-adhesives, and iron and nickel ions – for metal bonding. Therefore, the study of nature and the amount of input multivalent metal ions influence is an important scientific and practical task.

В последнее время возрос интерес к исследованиям, сочетающим в себе фундаментальные аспекты химии и биологии. Одним из основных принципов в работах такого профиля стало изучение законов и “продуктов”, созданных природой, а также получение новых полностью синтетических функциональных материалов с применением полученных знаний.

Проводятся исследования, направленные на изучение механизмов адгезии морских моллюсков и ее силы в зависимости от присутствующих катионов металлов. Решение этой фундаментальной задачи позволит моделировать и синтезировать искусственные, чувствительные к давлению адгезивы (ЧДА), создающие прочное и стойкое адгезионное соединение в условиях различных сред. ЧДА - это особый класс вязкоупругих полимеров, которые образуют прочные адгезионные соединения с подложками различной химической природы после приложения небольшого внешнего давления в течение короткого промежутка времени.

Исследование особенностей молекулярной структуры биоинспирированных ЧДА, выявили зависимость их адгезионных свойств как от присутствия катехольных фрагментов в полимере, так и от катионов металла в среде, которые непосредственно образуют координационные связи. Координационные взаимодействия между катехольной группой полимера и ионом металла является основой для многочисленных биоматериалов.

Целью данной работы стал синтез биоинспирированных адгезивов на примере катехол-содержащих полимеров, описание их структуры, состава и изучение влияния катионов металлов на механические и адгезионные свойства [5].

Не так давно была доказана важная роль металл-координационных комплексов в определении структурных и механических свойств неминерализованных биологических материалов. В число этих свойств входит твердость, прочность и стойкость к истиранию. Эти динамические свойства вдохновляют на применение синтетических материалов, созданных на их основе. Тем не менее, механика их координации и сшивки, которые заложили основу проектирования материала, еще не решена.

Ниже представлены исследования взаимодействия координационных комплексов между металлами и катехинами. Результаты показывают, что существует жесткая и прочная сшивка, которая находится в координационных связях. Это сильно зависит от координационного состояния и типа металла [4].

Многие биологические материалы с сильными механическими и клеевыми свойствами зависят от их иерархической композитной структуры. Например, Fe-катехолат (1,2-дигидроксибензол) комплекс в биссусах мидий используется как эффективный метод нековалентного сшивания аминокислот с помощью ионов металлов.

Взаимодействие осуществляется за счет нековалентного взаимодействия атомов кислорода, входящих в состав дигидроксифениленового цикла с атомами металла или другого вещества поверхности[1]. Катехольные группы склонны к комплексообразованию с ионами металлов, содержащихся в морской воде в виде солей (прежде всего, ионы Fe²⁺, Fe³⁺, Ca²⁺) (рис. 1).

Рисунок 1. Химическое взаимодействие с образованием комплексных соединений между катехольными группами ДОФА и ионом металла Fe³⁺.

В работе для исследований была специально выбрана кислая среда (рН-5), поскольку обычно не анализируют свойства гидрогелей на основе катехина при данном pH среды. В пользу использования кислой среды говорят следующие факты: (I) к минимуму сведено окисление боковой цепи катехола, (II), способность полимеров удерживать поликатионы из-за протонирования повторяющихся аминных звеньев, и сведен к минимуму гидролиз ионов некоторых переходных металлов [1].

В данных условиях добавление ионов металлов, таких как Ni (II), Zn (II), Nd (II), Eu (III) и Со (III), в растворы полимеров, привело к слабовыраженному изменению в цвете и в результате получились лишь вязкие растворы. Однако добавление ионов Fe (III) и Cu (II) вызвало сильные изменения в цвете раствора, что объясняется взаимодействием этих ионов и катехолов. Было обнаружено, что указанные ионы металлов также индуцируют гелеобразование водных растворов.

Имеющим веские основания объяснением этого редкого случая гель-образования с ионами Fe (III) и Cu (II) даже при низких значениях рН является значительно более высокая плотность пирокатехина, который прививается этим полимерам.

Синтез мономера 1-(3,4-диметоксифенилен)-2-азоакриламида

Синтез проводили по методике [2]

Смесь из 6.72мл (0.04моль) 3.4- диметоксифениламина и 4.24г соды (0.04моль) в хлороформе помещают в трехгорлуюколбу, снабженную обратным холодильником, мешалкой и капельной воронкой. При охлаждении и интенсивном перемешивании по каплям прибавляют в течение 15 мин 3,2 мл (0.04моль) хлорангидрида акриловой кислоты. Перемешивание продолжают еще 2 часа при 65-70С [кипении].

После нагревания осадок [сода] отделяют фильтрованием, промывают хлороформом. Растворитель удаляется перегонкой в вакууме. После отгонки растворителя к остатку добавили воду и затем при интенсивном перемешивании добавили разбавленный раствор HCl до нейтрального pH. Затем экстрагировали раствор этилацетатом. 2 слоя разделили, органический слой отогнали. Затем к нему добавили смесь этилацетат и гексана (1:8), слили раствор с осадка (промыли раствором дважды по 50мл). Раствор отогнали. В результате получили вещество с выходом 55% (5.2г).

Синтез полимера на основе н-бутилакрилата, акриловой кислоты и 1-(3,4-диметоксифенилен)-2-азоакриламида

Радикальная гомо- и сополимеризация N-(3,4-диметоксифенэтил)- акриламида (ДМФЭА) характеризуется рядом специфических особенностей:образованием сшитых продуктов, ингибированием полимеризации при высоких содержаниях ДМФЭА, а также низкой растворимостью ДМФЭА в ряде органических растворителей. В этой связи синтез терполимера на основе ДМФЭА, н-бутилакрилата (БА) и акриловой кислоты (АК) является непростой задачей.

Сополимеризация этих мономеров в массе в присутствии вещественного инициатора N, N-азо-бис-изобутиронитрила (ДАК) приводит к образованию сшитого продукта, как за счет реакции передачи цепи на полимер (через бутилакрилатное звено), так и за счет возможного взаимодействия гидроксильных и карбоксильных групп. Для проведения терполимеризации была выбрана полимеризация в растворе. Выбор растворителя был основан на следующих соображениях:

a) последний должен обеспечить гомогенность среды на всем протяжении процесса полимеризации;

b) при выделении полимера растворитель должен достаточно легко удаляться из реакционной среды.

Поэтому после испытания растворимости ДМФЭА в ряде растворителей (ДМФА, метанол, вода, 1,4-диоксан) выбор был остановлен на 1,4-диоксане, который является также растворителем для БА и АК, а также ПБА и ПАК, кроме того, он легко удаляется посредством лиофилизации.

Таким образом, полимер был получена путем сополимеризации целевых мономеров в 1,4-диоксане при 60oC в герметичных стеклянных ампулах, с использованием динитрилаазо-бис-изомасляной кислоты (ДАК) как инициатора (рис.2).

Рисунок 2. Схема получения полимера на основе н-бутилакрилата, акриловой кислоты и 1-(3,4-диметоксифенилен)-2-азоакриламида.

В работе были использованы свежеперегнанные БА и АК, инициатор ДАК, который перекристаллизовывали перед использованием. При стоянии диоксан образует пероксиды, поэтому его необходимо было очистить. Для очистки к диоксану добавили 5% (об.) концентрированной серной кислоты и 2 часа кипятили с обратным холодильником. После охлаждения к диоксану при энергичном встряхивании добавили твердый гидроксид калия до тех пор, пока его гранулы не перестали разрушаться. Затем диоксан отфильтровали от осадка, добавили металлический натрий и снова кипятили с обратным холодильником. Затем перегоняли ещё раз. Готовили реакционную смесь с дозированным количеством мономеров согласно таблице 1.

Таблица 1.

Соотношение мономеров, использованных при синтезе.

К этой смеси добавляли рассчитанное количество раствора ДАК (2×10^-3 моль/л) в диоксане (1.4 мл),так что суммарная концентрация ДАК в реакционной смеси составляла 10^-3 моль/л. Реакционные смеси заливали в ампулы, подвешивали к вакуумной установке, дегазировали путем повторения циклов замораживания–размораживания до остаточного давления 5×10^-3 ммрт.ст. и ампулы запаивали. Ампулы помещали в термостат, разогретый до 60^оС, на 24 ч. По окончании полимеризации реакционные смеси стали заметно более вязкими, но сохранили способность к течению. Ампулы вскрыли, поместили содержимое в предварительно взвешенную колбу, промыли бензолом, и полимер лиофильно высушили.

Для замещения метильных групп был проведен гидролиз в метаноле с соляной кислотой.

Рисунок 3. Схема гидролиза полимера.

Высушенный полимер представляет собой белую липкую пленку. Выход полимера составил: D-10 0,2766 г (конверсия 37,9%).

Результаты синтеза 1-(3,4-диметоксифенилен)-2-азоакриламида

1-(3,4-дигидроксифенилен)-2-азоакриламид был синтезирован в одну стадию в соответствии со схемой, приведенной ниже.

Рисунок 4. Схема синтеза 1-(3,4-диметоксифенилен)-2-азоакриламида. Спектр ЯМР 1H (CDCl3, d,м.д., J/Гц)2.82 (т , 2H, CH2); 3.59 (м, 2H, CH2), 3.87 (с, 6H, СН3О); 5,62 (д, 1H, =CH-); 5.73 (c, 1Н, NH); 6.06 (м, 1H, =СН-); 6.27 (д, 1H, =CH-); 6.74 (д, 2H, Ar); 6.82 (д, 1Н, Ar);ИК-спектр, v, см-1: 3286(NH), 2937(CH2), 1659 (СО), 1625 (C=C), 1030 (C-O-C).

На спектре ЯМР ¹Н полученного соединения (рис. 5) присутствует триплет протонов метиленовой группы при бензольном кольце при 2.82мд, триплет протонов метиленовой группы при атоме азота при 3.47 мд, синглет шести протонов –O-CH₃, два дублета 5.62 мд и 6.26 мд и мультиплет 6.05мд метиленовой группы при двойной связи при, а также дуплетные сигналы трех протонов бензольного кольца при 6.73мд и 6.8 мд.

Рисунок 5. Спектр ЯМР ¹Н полученного 1-(3,4-диметоксифенилен)-2-азоакриламида

На ИК-спектре соединения (рис. 6) присутствуют ярко выраженные сигналы колебаний NH-связи при 3286 см^-1, сигнал валентных колебаний карбонильной группы при 1649 см^-1, сигнал деформационных колебаний С=С связи при 1625 см^-1‑, а также обертоны колебаний связей в бензольном кольце при 1542, 1516, 1262, 1158 и 766 см^-1.

Рисунок 6. ИК-спектр 1-(3,4-диметоксифенилен)-2-азоакриламида

Спектральные данные, как и данные элементного анализа, свидетельствуют о высокой чистоте полученного соединения.

Результаты синтеза полимера н-бутилакрилата, акриловой кислоты и 1-(3,4-диметоксифенилен)-2-азоакриламида

Сополимеризация мономеров в массе в присутствии ДАК приводит к образованию сшитого продукта счет передачи цепи на полимер (через бутилакрилатное звено). Поэтому, единственно возможным способом сополимеризации оказалась полимеризация мономеров в растворе. При этом исходили из следующих соображений: растворитель должен обеспечить гомогенность среды на протяжении всего процесса полимеризации, т.е. он должен растворять как исходные вещества, так и конечный полимер; растворитель должен достаточно легко удаляться из реакционной среды. После ряда проведенных экспериментов нами был выбран диоксан. Конечные, высушенные полимеры представляли собой белые, липкие пленки.

На ИК-спектре полимера (рис. 7) присутствует ярко выраженный сигнал валентных колебаний карбонильной группы при 1690 см^-1,сигналы валентных и деформационных колебаний алифатических фрагментов при 3800 см^-1 и 1450 см^-1 соответственно. Также на спектре присутствует небольшой пик валентных колебаний двойной связи при 1606-1653 см^-1 относящиеся к мономеру, не вступившему в реакцию. Стоит отметить, что все характеристические полосы, которые можно отнести либо к гидроксильным, либо к амидным группам на спектре либо не присутствуют, либо выражены крайне слабо. Это указывает на ассоциативный характер присутствия катехольных групп в полимерной цепи.

Рисунок 7. ИК-спектр полимера н-бутилакрилата, акриловой кислоты и 1-(3,4-диметоксифенилен)-2-азоакриламида

Адгезионные свойства синтезированного полимера

Адгезионные характеристики полимеров оценивали методом зондирования липкости. За величину адгезии принимали работу, затрачиваемую на разрыв адгезионного соединения каждого исследуемого образца с твердым субстратом (сухое стекло). Каждое адгезионное соединение было охарактеризовано в максимуме кривой в температуроном интервале от 25 – 28^оС до 80 – 90^оС.

Для оценки влияния ионов кальция на величину работы адгезии был синтезирован полимер и проведено исследование его адгезионных свойств в чистом виде и в присутствии CaCL₂.

На данный момент известно крайне мало свидетельств об исследовании адгезионных свойств катехол-содержащих биоинспирированных адгезивов в режиме одноосного растяжения до разрыва [3]: наиболее частыми методами, к которым прибегают исследователи для описания липкости таких адгезивов являются всевозможные вариации методик испытаний на отслаивание и поперечный сдвиг. Как уже было отмечено, испытание на адгезию посредством одноосного вдавливания, проводимое группой американских ученых, представляется наиболее близким по своей сути к тесту на одноосное растяжение до разрыва: в обоих методах рассматривается разрушение адгезионного контакта ЧДА под действием одноосного нагружения, используются примерно одинаковые по геометрии металлические зонды липкости, в обоих методах измерение адгезии основывается на количественной оценке энергии, пошедшей на полный разрыв адгезионного контакта. С учетом этого для более тщательной отработки процедуры измерения липкости биоинспирированных катехол-содержащих адгезивов в режиме одноосного растяжения до разрыва представляется необходимым учесть особенности опыта в измерении липкости катехол-содержащих гидрогелей зарубежными коллегами и постараться спроецировать некоторые существенные моменты на стандартную процедуру probe-tack.

Выводы

Была отработана методика получения биоинспирированных катехол-содержащих полимеров-адгезивов, структура которых была подтверждена данными ЯМР и ИК спектроскопии.

Показано, что введение в растворы катехолсодержащих полимеров ионово многовалентных металлов приводит к образованию нековалентных сшивок между цепями полимеров.

Продемонстрировано влияние природы ионов на комплексообразующую способность таких полимеров, а также на их механические свойства. Показано, что лучшей сшивающей способностью обладают ионы Fe³⁺.