СПЕКТРОСКОПИЧЕСКАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ МАТРИЦ БИОМАТЕРИАЛА В СЛИЗИ НАЗЕМНЫХ БРЮХОНОГИХ МОЛЛЮСКОВ (GASTROPODA, PULMONATA) МЕТОДОМ ATR-FTIR

АННОТАЦИЯ

Слизь наземных брюхоногих моллюсков представляет собой сложный биологический гидрогель, состоящий из белков, гликопротеинов и полианионных полисахаридов (включая гликозаминогликаноподобные компоненты), макромолекулярная организация которого регулирует гидратацию, адгезию и биологическую активность. Здесь мы сообщаем о первом сравнительном макромолекулярном ATR-FTIR профилировании слизи двух наземных легконогих брюхоногих моллюсков, собранных в горном Узбекистане: слизня Deroceras agreste (Agriolimacidae Wagner, 1935) и раковен улитки Monacha cartusiana (Hygromiidae Tryon, 1866). Слизь была получена путем естественного осаждения слизи на стерильные стеклянные пластины и высушена в суховоздушном термостате при температуре 37°C в течение 24 часов. Образцы высушенной слизи были проанализированы методом ATR-FTIR (4000-600 см^⁻1).Спектры выявили два различных состояния макроматрицы. В образце А (D. agreste) преобладали хорошо растворимые амид I (≈1657 см^-1) и амид II (≈1514 см^⁻1) со сравнительно более слабыми углеводными/ионными признаками, что согласуется с более компактной структурой, богатой белками/гликопротеинами, и меньшим количеством связанной воды. Напротив, образец В (М. cartusiana) продемонстрировали дополнительный карбонильный признак ≈1749-1717 см^⁻1 и более сильные полосы в области углевод/анион (≈1350-1000 см⁻1), что соответствует высокогидратированной матрице, обогащенной полианионными полисахаридами/GAG. Эти макромолекулярные различия подтверждают функциональную интерпретацию: структурная адгезивная/ барьерная слизь в сравнении с гидратированным, богатым ионами секреторным гелем, обладающим улучшенной смазкой и противомикробным / ранозаживляющим действием. Предложенные спектральные маркеры обеспечивают быстрый путь скрининга для стандартизации макромолекул, полученных из слизи брюхоногих моллюсков, и отбора биоресурсов для биомедицинских и фармацевтических разработок.

ABSTRACT

Terrestrial gastropod mucus is a complex biological hydrogel composed of proteins, glycoproteins and polyanionic polysaccharides (including glycosaminoglycan-like motifs), whose macromolecular organization governs hydration, adhesion and bioactivity. Here we report the first comparative macromolecular ATR-FTIR profiling of mucus from two terrestrial pulmonate gastropods collected in mountainous Uzbekistan: the slug Deroceras agreste (Agriolimacidae Wagner, 1935) and the shelled snail Monacha cartusiana (Hygromiidae). The mucus was obtained by the natural deposition of mucus onto sterile glass plates and dried in a dry-air thermostat at 37°C for 24 hours. Samples of dried mucus were analyzed by ATR-FTIR (4000-600 cm⁻1).The spectra revealed two distinct macromatrix states. Sample A (D. agreste) displayed dominant, well-resolved Amide I (≈1657 cm⁻¹) and Amide II (≈1514 cm⁻¹) with comparatively weaker carbohydrate/ionic signatures, consistent with a more compact protein/glycoprotein-rich network and reduced bound water. In contrast, Sample B (M. cartusiana) exhibited an additional carbonyl feature ≈1749–1717 cm⁻¹ and stronger bands in the carbohydrate/anion region (≈1350–1000 cm⁻¹), consistent with a highly hydrated polyanionic polysaccharide/GAG-enriched matrix. These macromolecular differences support a functional interpretation: a structural adhesive/barrier mucus versus a hydrated, ion-rich secretory gel associated with enhanced lubrication and antimicrobial/wound-responsive potential. The proposed spectral markers provide a rapid screening route for standardization of gastropod mucus-derived macromolecules and selection of bioresources for biomedical and pharmaceutical development.

Ключевые слова: слизь улитки/слизня; ATR-FTIR; гликопротеины; гликозаминогликаны; сульфатированные полисахариды; биоадгезия; биоразнообразие Узбекистана.

Keywords: snail/slug mucus; ATR-FTIR; glycoproteins; glycosaminoglycans; sulfated polysaccharides; bioadhesion; Uzbekistan biodiversity.

1. Введение

Слизь брюхоногих моллюсков все чаще считается высокоорганизованным биомакромолекулярным гидрогелем, а не просто защитным секретом. Он объединяет структурные белки, муциноподобные гликопротеины, полианионные полисахариды, минеральные компоненты и структурированную воду в многофункциональные адаптивные матрицы [1-3]. Физико-химическое поведение этого биологического материала определяется макромолекулярной структурой, включая плотность заряда, водородные связи, электростатические взаимодействия и ионную сшивку [4,5]. Эти свойства позволяют слизи брюхоногих моллюсков одновременно выполнять функции адгезива, смазки, защитного барьера и регенерирующего средства.

В последние годы интерес к слизи улиток и слизней значительно возрос из-за ее потенциала в биомедицине и фармацевтике. Натуральные влажные клеи, созданные на основе слизи слизней, продемонстрировали замечательные результаты в области заживления ран и тканевой инженерии [6]. Экстракты слизи улитки обладают антимикробной, противовоспалительной и ранозаживляющей активностью, что позволяет предположить, что их биологические эффекты тесно связаны с их макромолекулярным составом и организацией [7-9]. В частности, сообщалось, что сульфатированные полисахариды и гликозаминогликаноподобные макромолекулы, выделенные из слизи улитки, проявляют значительную биологическую активность, включая заживляющие и противовирусные свойства [10-12]. Эти результаты указывают на то, что слизь брюхоногих моллюсков представляет собой многообещающую биоматериальную платформу для трансляционных исследований.

Несмотря на растущее число биомедицинских исследований, остается несколько важных ограничений.

Во-первых, большинство исследований посвящено коммерчески выращиваемым видам или таксонам из ограниченных географических регионов [13-15]. Отсутствует систематическое макромолекулярное профилирование наземных легочных брюхоногих моллюсков из экологически разнообразных и малоизученных регионов, таких как Центральная Азия.

Во-вторых, во многих опубликованных работах особое внимание уделяется биологическим анализам без установления воспроизводимых химических отпечатков макромолекулярной матрицы, что затрудняет стандартизацию и сопоставимость [16,17].

В-третьих, хотя ИК-спектроскопия широко используется для определения характеристик белков и полисахаридов, ее применение к слизи брюхоногих моллюсков часто остается описательным. О спектральных характеристиках сообщается, но они редко используются в качестве диагностических классификационных маркеров, необходимых для отбора и разработки биоматериала [18-20]. До сих пор отсутствует практическая спектроскопическая схема, позволяющая отличить слизь с преобладанием белка от слизи, обогащенной полианионными полисахаридами.

Эти пробелы особенно очевидны для наземных брюхоногих моллюсков Узбекистана. Территория Узбекистана характеризуется выраженной ландшафтной и климатической неоднородностью, включая горные экосистемы, предгорные зоны и антропогенно трансформированные места обитания [21,22]. Эта экологическая мозаика поддерживает разнообразные малакофаунные комплексы с экологической адаптацией, характерной для конкретного региона [23-25]. Недавние исследования биоразнообразия задокументировали разнообразие видов и экологические закономерности в горных хребтах, таких как Нурата и Гиссар [26,27], однако биохимический и биомакромолекулярный потенциал этих наземных видов остается в значительной степени неизученным.

Кроме того, некоторые моллюски выступают в качестве промежуточных хозяев для трематод [28], что еще раз подчеркивает необходимость стандартизированных подходов к отбору проб и анализу слизи, если речь идет о биомедицинских применениях.

ATR-FTIR спектроскопия обеспечивает быстрый и надежный метод скрининга сложных биополимерных матриц. Это позволяет идентифицировать вторичную структуру белка с помощью полос амида I и амида II, определять колебания углеводного состава и распознавать анионные функциональные группы, такие как карбоксилаты, сульфаты и фосфаты [29-31]. При интерпретации в рамках макромолекулярной структуры ATR-FTIR может служить практическим методом снятия отпечатков пальцев, поддерживающим классификацию, скрининг и стандартизацию природных биоматериалов на ранних стадиях [32-34].

В этом контексте настоящее исследование посвящено недостаточно разработанной области: сравнительному определению макромолекулярного профиля слизи наземных легочных брюхоногих моллюсков из горного Узбекистана с использованием ATR-FTIR спектроскопии с четкой функциональной интерпретацией.

В то же время, по сравнению с предыдущими работами, настоящее исследование заполнит пробел в знаниях о регионе, предоставив первое в Узбекистане макромолекулярное ATR-FTIR-профилирование слизи наземных легочных моллюсков с целью выявления диагностических спектральных маркеров, отличающих слизистые матрицы с преобладанием белка и обогащенные полианионными полисахаридами. Это, в свою очередь, позволит получить функциональную интерпретацию взаимосвязи между макромолекулярным составом слизи моллюсков и потенциальным применением в биомедицине.

Целью данной работы является сравнительное определение характеристик ATR-FTIR высушенных матриц слизистых оболочек Deroceras agreste (Linnaeus,1758) (Agriolimacidae) и Monacha cartusiana (Müller, 1774) (Hygromiidae), собранных в горном Узбекистане.

2. Материалы и методы

2.1 Район исследования и условия окружающей среды

Сбор моллюсков проводился в горном регионе Узбекистана (северный склон Туркестанского хребта, Бахмальский район, Джизакская область). Местность характеризуется неоднородным растительным покровом, умеренно-континентальным климатом и мозаичными микрорайонами обитания (опавшие листья, заросли травы, трещины в почве и камни).

Биотоп места отбора проб показан на рисунке 1.

Рисунок 1. Биотоп места отбора проб (Бахмальский район, Туркестанский хребет)

Температура воздуха во время отбора проб колебалась в пределах 18-23°C, а относительная влажность - в пределах 65-72%. Отбор проб проводился ранним утром, чтобы обеспечить максимальную физиологическую активность образцов.

2.2 Биологический материал.

Исследованы два вида наземных легочных брюхоногих моллюсков: Deroceras agreste (Agriolimacidae)  и Monacha cartusiana (Hygromiidae). Идентификация проводилась с использованием морфологических диагностических критериев и стандартных малакологических ключей [15-17, 25].

Для каждого вида было подготовлено n = 5 независимых биологических образцов.  Каждый образец состоял из объединенной слизи, взятой у 4-5 взрослых особей, чтобы свести к минимуму индивидуальную изменчивость при сохранении характеристик на уровне вида. Общее количество проанализированных образцов: D. agreste: 20 особей и M. cartusiana: 35 особей.

На рисунках 2 и 3 показаны изученные моллюски.

2.3 Акклиматизация и лабораторный контроль

После сбора моллюсков в стерильных вентилируемых контейнерах доставляли в лабораторию и выдерживали в течение 24 часов при температуре 20 ± 1°C и относительной влажности 75 ± 5%

Такие контролируемые условия снижали вызванную стрессом изменчивость состава слизи.

2.4 Сбор слизи

Слизь была получена путем естественного осаждения на стерильные стеклянные пластины и выдерживалась в суховоздушном термостате при температуре 37°C.

Каждый биологический образец (n=5 для каждого вида) был обработан независимо.

2.5. Получение данных ATR-FTIR и спектральная обработка

Спектры ATR-FTIR регистрировали с помощью спектрометра Shimadzu ATR-FTIR (вспомогательное оборудование Miracle10 ATR), оснащенного кристаллом алмаза. Для этого высушенную слизь в виде порошка наносили на кристалл спектрометра и регистрировали ИК-спектр в диапазоне 4000-600 см^⁻1 (спектральное разрешение: 4 см^-1; количество сканирований: 32 за одно измерение). Для каждого биологического образца регистрировали три спектральных повтора и проводили групповое усреднение.

3. Результаты и обсуждение

3.1. Сравнительные спектры ATR-FTIR слизистых матриц

На рисунке 4 приведены ATR-FTIR спектры слизистых выделений моллюсков.

Спектры ATR-FTIR двух образцов слизи наземных брюхоногих моллюсков демонстрируют характерные паттерны поглощения, характерные для белково–полисахаридных гидрогелей [11-13]. Однако в карбонильной, амидной и углеводно-анионной областях наблюдаются явные межвидовые различия, указывающие на различные организации макромолекулярных сетей.

Рисунок 4. Спектры ATR-FTIR слизистых выделений моллюсков:

(а) Deroceras agreste;    (б) Monacha cartusiana.

3.2. Область с высоким волновым числом (3600-3200 см^-1): гидратация и структура с водородными связями

Оба спектра демонстрируют широкое поглощение в диапазоне 3600-3200 см^⁻1, соответствующем колебаниям растяжения O–H и N–H. Однако M. cartusiana демонстрирует значительно более широкую и интенсивную полосу по сравнению с D. agreste.

Расширение в этой области во многом связано с обширными водородными связями и гидратационными оболочками в полиэлектролитных полисахаридных системах [13,14]. Недавние исследования гидрогелей, полученных из слизи улитки, показали, что повышенное уширение O-H коррелирует с повышенным содержанием связанной воды и биологической активностью [6,19].

Следовательно, более сильная полоса O–H/N–H у M. cartusiana указывает на более гидратированную и богатую полианионами макромолекулярную сеть.

Диагностическая ценность: Ширина и интенсивность области площадью 3600-3200 см⁻1 могут служить косвенным показателем гидратации.

3.3. Карбонильная область (1749-1717 см^⁻1): маркер этерифицированных/кислых полисахаридов

Основным отличительным признаком является карбонильная область:

• у M. cartusiana имеется отчетливая полоса шириной ~1749-1717 см^⁻1.

• у D. agreste этой особенности нет.

Поглощение карбонила вблизи 1740 см^⁻1 характерно для этерифицированных или неионизированных карбоксильных групп в богатых полисахаридами матрицах [13,14]. В работе [2] авторы показали , что гепариноподобные сульфатированные полисахариды, выделенные из слизи улитки, демонстрируют сходные карбонильные признаки, связанные с ацетилированными уроновыми остатками .

Таким образом, наличие этой полосы у M. cartusiana указывает на обогащение полианионными углеводными компонентами.

Диагностическое значение: Полоса ~1740 см^⁻1 является мощным спектроскопическим различителем между двумя типами слизи.

3.4. Амидные области I и II: доминирование белкового остова

В обоих образцах видны сильные полосы амида I (~1657 см^⁻1) и амида II (~1514 см^⁻1), соответствующие колебаниям пептидного состава [11,12].

Однако у D. agreste эти полосы более четкие и относительно более доминирующие по сравнению с областью углеводного отпечатка. Сообщалось о сходных спектральных характеристиках богатых белком матриц слизи улитки, связанных со структурной адгезией и механической целостностью [6]. Напротив, у M. cartusiana амидные полосы частично перекрываются с углеводными/ионными вкладами, что указывает на более гетерогенный макромолекулярный состав.

Таким образом, относительное преобладание амидных полос позволяет предположить, что слизь D. agreste структурно управляется белками.

3.5. Углеводно-анионная область отпечатков пальцев (1350-1000 см^-1)

Область 1350-1000 см^⁻1 демонстрирует явные межвидовые различия:

• Повышенная интенсивность около ~1338 см^⁻1 и ~1234 см^⁻1 у M. cartusiana

• Более сильное растяжение C–O около ~1026 см^⁻1

Эти полосы соответствуют асимметричным колебаниям COO⁻, S=O и P=O, характерным для сульфатированных и фосфорилированных полисахаридов [13,14]. Аналогичные спектральные характеристики были обнаружены у полисахаридов слизи улитки, проявляющих биологическую активность [2,6,10].

Исследования ранозаживляющих экстрактов слизи улитки показывают, что богатые углеводами матрицы с выраженными анионными свойствами демонстрируют улучшенные регенеративные реакции [4,5,19].

Диагностическая ценность: Относительная интенсивность области 1350-1000 см^⁻1 по сравнению с амидом I служит показателем обогащения полисахаридами/GAG.

3.6. Сравнительный анализ маркеров

В таблице 1 приводятся сравнение спектральных ATR-FTIR маркеров слизи моллюсков и их интерпретация.

Таблица 1.

Сравнительные спектральные маркеры ATR-FTIR

3.7. Функциональное сравнение с последними литературными данными (2019-2025)

Недавние исследования показывают, что слизь брюхоногих моллюсков может демонстрировать либо:

1. Структурная адгезия, в которой доминирует белок [6]

2. Свойства полианионного гидратированного биоактивного гидрогеля [2,5,10].

Так, Саркар (Sarkar) и соавт. [1] подчеркнули, что богатые белком слизистые матриксы способствуют механическому сцеплению и адгезии во влажной среде. И наоборот, Ву (Wu) с соавт. [5] и Кодчакорн (Kodchakorn) с соавт. [2] сообщили, что фракции, богатые сульфатированными полисахаридами, улучшают гидратацию, взаимодействие ионов и биологическую активность.

Аналогичным образом Эль-Завави и Мона (EL-Zawawy, Mona) [4] продемонстрировали, что обогащенная углеводами слизь улитки обладает антимикробными и регенерирующими свойствами. Ауджи (Aouji) с соавт. [19] также подтвердили, что состояние гидратации и фракция углеводов значительно влияют на способность к заживлению ран.

Спектральные характеристики M. cartusiana согласуются с этими данными, подтверждая его классификацию как гидратированного полианионного матрикса. Напротив, D. agreste напоминает структурно сплоченные матрицы с преобладанием белка, о которых сообщалось в недавних фармакологических исследованиях слизи улиток [6].

Такой спектроскопический подход способствует раннему скринингу и стандартизации слизи брюхоногих моллюсков как регионального ресурса биоматериалов в соответствии с современными тенденциями исследований биоматериалов для фармакологии и биомедицины (Табл.2)

Таблица 2.

Спектральные маркеры и функциональное применение биоматериалов на основе слизи моллюсков

Заключение

Сравнительное ATR-FTIR-профилирование слизистых выделений двух видов наземных брюхоногих моллюсков, обитающих в горных районах Узбекистана, выявило выраженные различия в молекулярной организации их макромолекулярных матриц и относительном вкладе белковых и полисахаридных компонентов. Полученные спектроскопические данные свидетельствуют о существовании двух структурных типов слизистых биоматериалов, обладающих различными физико-химическими и функциональными свойствами.

Слизь Deroceras agreste соответствует относительно компактной и умеренно гидратированной матрице, в которой преобладают белки и гликопротеины. Спектр ATR-FTIR характеризуется интенсивными полосами Amide I (~1650 см⁻¹) и Amide II (~1540 см⁻¹), связанными с колебаниями пептидного состова. Эти особенности указывают на формирование плотной белково-гликопротеиновой сети с выраженными вязкоупругими свойствами, характерной для адгезивных и защитных биополимерных систем.

В отличие от этого, слизь Monacha cartusiana демонстрирует более гидратированную макромолекулярную структуру, обогащённую полианионными полисахаридами и гликозаминогликаноподобными компонентами. Для неё характерно появление карбонильной полосы в области 1749–1717 см⁻¹, а также усиление поглощения в углеводной области 1200–900 см⁻¹, что указывает на формирование гидратированной полисахаридной сети, способной участвовать в водородных и ионных взаимодействиях.

Выявленные различия позволяют определить диагностические ATR-FTIR-маркеры, включающие интенсивность полос Amide I–II, наличие карбонильного сигнала около 1740 см⁻¹ и развитие углеводных колебаний в диапазоне 1200–900 см⁻¹. Эти признаки могут использоваться для быстрой спектроскопической идентификации и функциональной классификации слизистых биоматериалов.

Полученные результаты показывают, что наземные брюхоногие моллюски горных экосистем Узбекистана представляют собой перспективный и практически не изученный источник биофункциональных макромолекул. Сочетание белково-адгезивных сетей и высокогидратированных полисахаридных матриц открывает возможности для разработки биомиметических гидрогелей, ранозаживляющих материалов и биоадгезивных композиций для медицинских и фармацевтических применений.

Список литературы:

1. Sarkar P., Iyengar D., Mukhopadhyay K. Emergence of snail mucus as a multifunctional biogenic material for biomedical applications // Acta Biomaterialia. 2025. Vol. 200. P. 21–46. DOI: 10.1016/j.actbio.2025.05.006.
2. Kodchakorn K., Chokepaichitkool T., Kongtawelert P. Purification and characterisation of heparin-like sulfated polysaccharides with potent anti-SARS-CoV-2 activity from snail mucus of Achatina fulica // Carbohydrate Research. 2023. Vol. 526. Article 108832. DOI: 10.1016/j.carres.2023.108832.
3. Deng T., Gao D., Song X., Zhou Z., Zhou L., Tao M., Jiang Z., Yang L., Luo L., Zhou A., Hu L., Qin H., Wu M. A natural biological adhesive from snail mucus for wound repair // Nature Communications. 2023. Vol. 14. Article 396. DOI: 10.1038/s41467-023-35907-4.
4. El-Zawawy N.A., Mona M.M. Antimicrobial efficacy of Egyptian Eremina desertorum and Helix aspersa snail mucus with a novel approach to their anti-inflammatory and wound healing potencies // Scientific Reports. 2021. Vol. 11. Article 24317. DOI: 10.1038/s41598-021-03664-3.
5. Wu Y., Zhou Z., Luo L., Tao M., Chang X., Yang L., Huang X., Hu L., Wu M. A non-anticoagulant heparin-like snail glycosaminoglycan promotes healing of diabetic wound // Carbohydrate Polymers. 2020. Vol. 247. Article 116682. DOI: 10.1016/j.carbpol.2020.116682.
6. Zhu K., Zhang Z., Li G., Sun J., Gu T., Ain N.U., Zhang X., Li D. Extraction, structure, pharmacological activities and applications of polysaccharides and proteins isolated from snail mucus // International Journal of Biological Macromolecules. 2024. Vol. 258. Part 1. Article 128878. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2023.128878.
7. Izzatullaev Z.I. Biodiversity of molluscs of Central Asia and the problem of conservation of their gene pool // Naukovyi Visnyk Uzhhorod University. Series Biology. 2016. No. 40. P. 51–54.
8. Kudratov J., Pazilov A., Maxammadiyev Z. et al. Diversity and ecology of molluscs (Gastropods) in mountain streams, Nurota Mountain Range, Uzbekistan // Biodiversitas. 2023. Vol. 24, No. 4. P. 2402–2408. DOI: 10.13057/biodiv/d240455.
9. Kudratov J., Pazilov A., Zokirova D., Otakulov B. Complexes of terrestrial molluscs of various biotopes in the Gissar Range, Uzbekistan // Acta Biologica Sibirica. 2024. Vol. 10. P. 349–359. DOI: 10.5281/zenodo.11160044.
10. Schileyko A., Pazilov A., Abdulazizova S.H. A new genus of the Bradybaenidae family (Gastropoda, Pulmonata) from Central Asia // Ruthenica. 2017. Vol. 27, No. 1. P. 31–37. DOI: 10.35885/ruthenica.2017.27(1).3.
11. Barth A. Infrared spectroscopy of proteins // Biochimica et Biophysica Acta – Bioenergetics. 2007. Vol. 1767, No. 9. P. 1073–1101. DOI: 10.1016/j.bbabio.2007.06.004.
12. Jackson M., Mantsch H.H. The use and misuse of FTIR spectroscopy in the determination of protein structure // Critical Reviews in Biochemistry and Molecular Biology. 1995. Vol. 30, No. 2. P. 95–120. DOI: 10.3109/10409239509085140.
13. Kačuráková M., Capek P., Sasinková V., Wellner N., Ebringerová A. FT-IR study of plant cell wall model compounds: pectic polysaccharides and hemicelluloses // Carbohydrate Polymers. 2000. Vol. 43, No. 2. P. 195–203. DOI: 10.1016/S0144-8617(00)00151-X.
14. Gieroba B., Kalisz G., Krysa M., Khalavka M., Przekora A. Application of vibrational spectroscopic techniques in the study of natural polysaccharides and their cross-linking process // International Journal of Molecular Sciences. 2023. Vol. 24, No. 3. Article 2630. DOI: 10.3390/ijms24032630.
15. Лихарев И.М., Раммельмейр Е.С. Наземные моллюски фауны СССР. Определители по фауне СССР. Вып. 43. М.; Л.: Издательство АН СССР, 1952. 511 с.
16. Лихарев И.М., Виктор А.Ю. Слизни фауны СССР и сопредельных стран (Gastropoda Terrestria Nuda) // Фауна СССР. Моллюски. Л.: Наука, 1980. Т. 3, вып. 5, № 122. 437 с.
17. Barker G.M. (Ed.). The Biology of Terrestrial Molluscs. Wallingford: CABI Publishing, 2001. P. 79–96.
18. Savitzky A., Golay M.J.E. Smoothing and differentiation of data by simplified least squares procedures // Analytical Chemistry. 1964. Vol. 36, No. 8. P. 1627–1639. DOI: 10.1021/ac60214a047.
19. Aouji M., Rkhaila A., Bouhaddioui B., Zirari M., Harifi H., Taboz Y., Lrhorfi L.A., Bengueddour R. Chemical composition, mineral profile, antibacterial and wound healing properties of snail slime of Helix aspersa Müller // Biomedicine (Taipei). 2023. Vol. 13, No. 4. P. 10–19. DOI: 10.37796/2211-8039.1424.
20. Li G., Shi Y., Zhu J., Zhu K., Hu B., Huang X., Sun Y., Li D., Zhang X. Active peptides derived from snail mucus promoted wound healing by enhancing endothelial cell proliferation and angiogenesis // International Journal of Molecular Sciences. 2025. Vol. 26, No. 21. Article 10341. DOI: 10.3390/ijms262110341.
21. Giordano L., Ferraro L., Caroppo C., Rubino F., Buonocunto F.P., Maddalena P. A method for bivalve shells characterization by FT-IR photoacoustic spectroscopy as a tool for environmental studies // MethodsX. 2022. Vol. 9. Article 101672. DOI: 10.1016/j.mex.2022.101672.
22. Shakarbaev E.B., Goncharenko G.G., Akramova F.D. Trematodes of molluscs from reservoirs of Uzbekistan // Zoodiversity. 2020. Vol. 54, No. 6. P. 505–512. DOI: 10.15407/zoo2020.06.505.
23. Newman D.J., Cragg G.M. Marine-sourced anti-cancer and cancer pain control agents in clinical and late preclinical development // Marine Drugs. 2014. Vol. 12, No. 1. P. 255–278. DOI: 10.3390/md12010255.
24. Ciavatta M.L., Lefranc F., Carbone M., Mollo E., Gavagnin M., Betancourt T., Dasari R., Kornienko A., Kiss R. Marine mollusk-derived agents with antiproliferative activity as promising anticancer agents to overcome chemotherapy resistance // Medicinal Research Reviews. 2017. Vol. 37, No. 4. P. 702–801. DOI: 10.1002/med.21423.
25. Pazilov A., Azimov D.A. Наземные моллюски (Gastropoda, Pulmonata) Узбекистана и сопредельных территорий. Ташкент: Фан, 2003. 316 с.
26. Kantor Y.I., Vinarski M.V., Schileyko A.A., Sysoev A.V. Catalogue of the continental mollusks of Russia and adjacent territories. Version 2.3.1. Moscow, 2010.
27. Балашов И.А. Коллекция наземных моллюсков Института зоологии НАН Украины // Науковий вiсник Ужгородського унiверситету. Серія Біологія. 2016. Вып. 40. С. 12–23.
28. Kantor Y.I., Sysoev A.V. Stalk-eyed gastropods in the catalogue of mollusks of Russia and adjacent countries. Moscow: KMK Scientific Press, 2005. P. 228–308.
29. Izzatullaev Z.I. Results of studying terrestrial molluscs of Central Asia and future perspectives // Fan chorrahalari (Biology). Samarkand: SamSU, 2005. P. 171–187.
30. Pazylov A. Terrestrial molluscs of the Fergana Valley and surrounding ranges: Abstract of PhD thesis. Moscow, 1992. 21 p.
31. Makhmudjanov Z.M. Ecological-taxonomic composition and lifestyle of Hygromiidae in Uzbekistan: Abstract of PhD thesis. Gulistan, 2021. 20 p.
32. Umarov F.U., Pazylov A.P. Ecology of some adventive terrestrial molluscs of the Fergana Valley // Scientific Bulletin of Andijan State University. Biological Research. 2020. No. 4 (48). P. 86–94.
33. Yuan Z., Wu S., Fu L., Wang X., Wang Z., Shafiq M., Feng H., Han L., Song J., El-Newehy M., Abdulhameed M.M., Xu Y., Mo X., Jiang S. A natural biological adhesive from slug mucus for wound repair // Bioactive Materials. 2025. Vol. 47. P. 513–527. DOI: 10.1016/j.bioactmat.2025.01.030.
34. Zhou Z., Deng T., Tao M., Lin L., Sun L., Song X., Gao D., Li J., Wang Z., Wang X., Li J., Jiang Z., Luo L., Yang L., Wu M. Snail-inspired hydrogel accelerates diabetic wound healing // Biomaterials. 2023. Vol. 299. Article 122141. DOI: 10.1016/j.biomaterials.2023.122141.