ОПТИМАЛЬНЫЕ СРОКИ ЗАГОТОВКИ КОРНЕЙ СОЛОДКИ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ГЛАБРИДИНА И МЕСТО СБОРА НА ТЕРРИТОРИИ УЗБЕКИСТАНА

АННОТАЦИЯ

В данной работе проведено исследование количественного содержания изофлавона глабридина в корнях Glycyrrhiza glabra L. (солодки голой), произрастающей в различных регионах Узбекистана, в зависимости от сезона сбора. Основное внимание уделено сравнению уровня глабридина в образцах, собранных в Республике Каракалпакстан, Хорезмской и Сырдарьинской областях в марте, августе, октябре и декабре. Количественное определение глабридина проводилось методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием стандартного образца глабридина (чистота 98%, Sigma-Aldrich).

Результаты показали, что наибольшее содержание глабридина зафиксировано в корнях солодки, собранных в декабре в Сырдарьинской области — 0,152%. Полученные данные свидетельствуют о зависимости накопления глабридина от региона и периода вегетации, что важно учитывать при заготовке растительного сырья для фармацевтических и косметических целей.

ABSTRACT

This study examined the quantitative content of the isoflavone glabridin in the roots of Glycyrrhiza glabra L. (naked licorice) grown in various regions of Uzbekistan, depending on the harvest season. The study focused on comparing glabridin levels in samples collected in the Republic of Karakalpakstan, Khorezm, and Syrdarya regions in March, August, October, and December. Glabridin was quantified by high-performance liquid chromatography (HPLC) using a glabridin standard sample (98% purity, Sigma-Aldrich).

The results showed that the highest glabridin content (0.152%) was recorded in licorice roots harvested in December in the Syrdarya region. These data indicate that glabridin accumulation depends on region and growing season, which is important to consider when preparing plant materials for pharmaceutical and cosmetic purposes.

Ключевые слова: Глабридин, Glycyrrhiz aglabra L, сбор, сырья, количественное определение.

Keywords: Glabridin, Glycyrrhiza glabra L., harvesting, raw material, quantitative determination

Введение. Традиционные растительные средства привлекают внимание как перспективные альтернативные средства терапии различных заболеваний во многих странах. В последние десятилетия лекарственные растения получили более широкое признание из-за восприятия того, что эти растения, как натуральные продукты, имеют меньше побочных эффектов и повышенную эффективность по сравнению с их синтетическими аналогами [1]. Glycyrrhiza glabra L. — распространённое и знаменитое лекарственное растение. Солодку используют в медицинских целях с глубокой древности. Она популярна как в современной народной, так и в научной медицине [2].Также это растение имеет промышленное значение, поскольку содержит множество биоактивных компонентов, таких как глицирризиновая кислота, глицирретиновая кислота, ликвиритин, изоликвиритигенин, ликохалконы и глабридин[3-5].

Глабридин представляет собой изофлаван, тип изофлавоноидов Экстракт глабридина солодки является частью большого семейства растительных молекул — природных фенолов. Глабридин широко считается фитоэстрогеном и связан с многочисленными биологическими свойствами, начиная от антиоксидантных, противовоспалительных, нейропротекторных, антиатерогенных эффектов до регуляции энергетического обмена, а также включая противоопухолевые, антинефритические, антибактериальные и отбеливающие кожу активности [6-10]. Экстракт глабридина солодки является частью большого семейства растительных молекул — природных фенолов. Глабридин используется в качестве ингредиента в косметике и включён в Международную номенклатуру косметических ингредиентов (INCI) [13-14].

Продукты из корней Glycyrrhiza glabra, содержащие глабридин, находят широкое применение в фармацевтической, косметической и пищевой промышленности [11,12]. Одним из ключевых этапов в исследовании данного изофлавоноида является определение его количественного содержания в растительном сырье. Солодка, являясь одним из наиболее распространённых лекарственных растений на территории Республики Узбекистан, традиционно используется для получения глицирризиновой кислоты и её солей. Вместе с тем установлено, что корни растения содержат и другие биологически активные соединения, среди которых значительное место занимает глабридин. Его наличие обусловливает высокий научный и прикладной интерес к дальнейшему изучению сырья солодки, направленному на разработку эффективных методов количественного анализа и выделения данного соединения. В современных условиях исследование содержания глабридина и совершенствование аналитических подходов к его определению представляют собой актуальную задачу, имеющую значение для создания стандартизованных препаратов и более рационального использования природных ресурсов.

Целью данного исследования является изучение зависимости содержания изофлавона глабридина в корнях солодки голой (Glycyrrhiza glabra L.), произрастающей на территории Узбекистана, от фазы вегетации и места произрастания. Для достижения поставленной цели были проведены исследования с отбором образцов корней в различных регионах, преимущественно в Каракалпакстане, Хорезмской и Сырдарьинской областях. Заготовка сырья осуществлялась в разные периоды года — в марте, августе, октябре и декабре, что позволило проследить сезонные колебания содержания глабридина.

Материалы и методы: В качестве объекта исследования использованы корни солодки, произрастающей в Республике Каракалпакстан, Хорезмской и Сырдарьинской областина территории Республики Узбекистан.

В качестве объекта исследования были взяты образцы сухого экстракта глабридина, полученного из корней солодки. В качестве стандартного образца использовали глабридин (Sigma-Aldrich) с чистотой 98%.

Для количественного анализа глабридина методом ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии) использовали хроматограф (Shimadzu, Япония), модель "LC-20" с двумя насосами (модель - R2000), автосамплером (модель - AS3000) и УФ-детектором (модель - UV 1000) для сбора и анализа данных с использованием программы ChromQuest версии 4.1. Аналитическая процедура проводилась на колонке Supelco(150×4,6 мм), размер частиц SiO₂ — 5 мкм, с неподвижной фазой C₁₈. Длину волны для глабридина измеряли с помощью УФ-детектора при 282 нм. Метод ВЭЖХ проводился в следующих условиях:

- температура колонки: 40°C;

- длина волны детектора: 282 нм;

- внутренний объем инжектора: 20 мкл;

- скорость подвижной фазы: 1,0 мл/мин;

- подвижная фаза А: 0,1% раствор муравьиной кислоты;

- подвижная фаза B: ацетонитрил.

Также нами проводилась хроматографическое разделение на тонком с силикагелем 60 F₂₅₄ на алюминиевой пластина (10 × 10 см, толщина 250 мкм) в системе растворителей гексан-этилацетат (70:30). Вещества обнаруживали в УФ-свете или после опрыскивания реактивом ванилин с серной кислоты. Разделение глабридина на тонкослойной хроматографии (ТСХ) приведено в работе.

Описание методики. Хроматограф был приведен в рабочий режим, после чего в него пять раз вводили испытуемый раствор. На хроматограммах идентифицировали пик глабридина и определяли их площади. Время удерживания составляло примерно 9,23 мин. Растворы стандартных и испытуемых образцов хроматографировали по 5 раз каждый. На хроматограммах раствора стандартного образца время удерживания глабридина совпадало с временем удерживания в испытуемом образце, что подтверждает специфичность предлагаемой методики[13].

Результаты и обсуждение

Проведенные исследования в основном отбирали корни из Каракалпакстана, Хорезмской и Сырдарьинской области в марте, августе, октябре и декабре. Результаты анализа представлены в таблице.

Таблица 1.

Изменение количества изофлована глабридина в корнях солодки голой в зависимости от периода вегетации и места произрастания

Результаты, представленные в таблице, показало, что количество глабридина в корне солодке, собранного в декабре из территории Сырдарьинской области, содержание относительно высоко. В нашей дальнейшей работе в качестве объекта были выбраны образцы корней, собранные из этого места данного периода.

В ходе исследования было установлено, что содержание глабридина в корнях Glycyrrhiza glabra L., произрастающих на территории Узбекистана, значительно варьирует в зависимости от сезона заготовки и региона сбора. Полученные результаты, представленные в таблице, показывают выраженную тенденцию к увеличению концентрации изофлавона в зимний период, особенно в образцах из Сырдарьинской области.

Анализ данных позволяет выделить несколько ключевых закономерностей:

Сезонный фактор - минимальное содержание глабридина наблюдается в марте (0,102–0,130%), что связано с ранней фазой вегетации. К августу и октябрю содержание постепенно увеличивается, достигая максимума в декабре (0,108–0,152%). Это согласуется с литературными данными, указывающими на накопление вторичных метаболитов в период окончания вегетации.

Региональный фактор - наибольшие показатели стабильно регистрировались в образцах, собранных в Сырдарьинской области. Вероятной причиной является сочетание следующих факторов:

тип почвы и её минерализация, более сухой климат, специфика геоботанических условий региона.

Выводы

Содержание глабридина в корнях Glycyrrhiza glabra L., произрастающих на территории Узбекистана, зависит от фазы вегетации и региона произрастания.

Наибольшее количество глабридина выявлено в образцах, собранных в декабре, что подтверждает важность позднеосенней или зимней заготовки.

Максимальные показатели зафиксированы в корнях из Сырдарьинской области (0,152%), что делает регион наиболее перспективным источником сырья для фармацевтических и косметических производств.

Результаты исследования подтверждают необходимость учёта сезонно-региональных факторов при стандартизации сырья и разработке технологий получения глабридина.

Список литературы:

1. Batiha, G. E. S.; Beshbishy, A.M.; Tayebwa, D.S.; Adeyemi, O.S.; Shaheen, H.; Yokoyama, N.; Igarashi, I. Evaluation of the inhibitory effect of ivermectin on the growth of Babesia and Theileria parasites in vitro and in vivo. Trop. Med. Health. 2019, 47, 42.
2. Абу Али ибн Сино Канон врачебной науки III том Ташкент,1996.
3. Pavankumar R. M., Anet R. J., Shalini S. A. Green, environment-friendly and sustainable techniques for extraction of food bioactive compounds and waste valorization // Trends in Food Science & Technology. 2022. V. 128. P. 296–315. doi: 10.1016/j.tifs.2022.08.016
4. Хабибрахманова В.Р., Сысоева М.А., Халед Ш.М., Габдрахманова А.Р. Выбор экстрагента для увеличения выхода тритерпеноидных веществ и флавоноидов из сырья и шрота корня солодки (GlycyrrhizaeRadices) // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2016. Т. 19. № 11. С. 16–21
5. Саидов С. С., Каримов Р. К., Таджибаева М. Р., Донияров Г. Т. и др. Оптимизaция процесса экстракции корня солодки // Universum: технические науки. 2023. №6-3 (111). С. 61-66.
6. Belinky PA, Aviram M, Mahmood S, Vaya J. Structural aspects of the inhibitory effect of glabridin on LDL oxidation. Free Radic Biol Med. 1998;24:1419–1429. doi: 10.1016/s0891-5849(98)00006-9.
7. Kim M, Kim S, Kim Y, Han J. Absolute configurations of (±) glabridin enantiomers. Configurations. 2009;30:415–418. 
8. Aoki F, Nakagawa K, Tanaka A, Matsuzaki K, Arai N, Mae T. Determination of glabridin in human plasma by solid-phase extraction and LC-MS/MS. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2005;828:70–74. doi: 10.1016/j.jchromb.2005.09.012. 
9. Yokota T, Nishio H, Kubota Y, Mizoguchi M. The inhibitory effect of glabridin from licorice extracts on melanogenesis and inflammation. Pigment Cell Res. 1998;11:355–361. doi: 10.1111/j.1600-0749.1998.tb00494.x.
10. Dong W, Guo J, Wen H, Liu D, Xia K. U.S. Patent CN 101830906 A. Separation and purification method of high-purity glabridin. 2010
11. Zhu Y, Sun D. Patent CN 1680386 A. Method for producing high-purity glabridin by solvent extraction, adsorption and recrystallization. 2005
12. Changying H. Preparation of high purity glabridin from Glycyrrhizaglabra. Patent CN 101735233 A. 2010
13. А. I. Sanoev, B. S. Okhundedaev, Sh. Sh. Sagdullaev, et al., /Optimal time for harvesting licorice roots for the production of glabridin and the place of collection from the territory of Uzbekistan //Actual problems of the chemistriy of natural compounds., 111. (2023).