ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВОДОРАСТВОРИМОГО ВИТАМИННОГО СОСТАВА И КОЛИЧЕСТВА ФЛАВОНОИДОВ В ЛИСТОВОЙ ЧАСТИ РАСТЕНИЯ Cucumis sativus, ПРОИЗРАСТАЮЩЕГО В ФЕРГАНСКОЙ ДОЛИНЕ

АННОТАЦИЯ

В данной статье впервые методом высокоэффективной жидкостной хроматографии изучены состав и содержание количество флавоноидов и водорастворимых витаминов листьях Cucumis sativus, а также содержание галловой кислоты, рутина. Количество рутина и витамина В1 в листьях растения относительно высокое.

ABSTRACT

In this article, for the first time, the composition and content of flavonoids and water-soluble vitamins in the leaves of Cucumis sativus, as well as the content of gallic acid, rutin, B1, C, B6, PP, B9, B12, B2, were studied using high-performance liquid chromatography. That the amount of rutin and vitamin B1 in the leaves of the plant is relatively high.

Ключевые слова: Cucumis sativus, высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), флавоноиды: галловой кислоты, рутин, витамины: В1, С, В6, PP, В9, В12, В2.

Keywords: Cucumis sativus, high effective liquid chromatography (HPLC), flavonoids: gallic acid, rutin, vitamins: B1, C, B6, PP, B9, B12, B2

В настоящее время, с развитием медицины, доставка лекарственных средств пациентам становится все более актуальной. В то же время вещества, полученные из растений, превосходят вещества, полученные синтетическим путем, при лечении различных заболеваний. Растения содержат разные биологически активные вещества в зависимости от их климата, семейства и других пола.

В литературе исследованы микро- и макроэлементы, флавоноиды, алкалоиды, витамины, масличность плодовой части Cucumis sativus при этом сведения о химическом составе листовой и стеблевой части растения в литературе практически отсутствуют [1].

Цель работы: изучить витаминный состав и количество листовой части растения Cucumis sativus, произрастающего в Узбекистане.

О растении: Огурец обыкновенный, или Огурец посевной (лат. Cucumis sativus), — однолетнее травянистое растение, вид рода Огурец (Cucumis) семейства Тыквенные (Cucurbitaceae) [2].

Материалы и методы

Исследуемый материал (Cucumis sativus) был собран в июле 2023 года после окончания вегетационного периода растения.

Флавоноиды в образце определяли с помощью жидкостной хроматографии. 5-10 г пробы отбирают на аналитические весы и помещают в плоскую колбу вместимостью 300 мл. К нему добавляют 50 мл 70% раствора этанола. Смесь нагревали интенсивном перемешивании в течение 1 часа, снабженной магнитной мешалкой, обратным холодильником, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь охлаждают и фильтруют. К оставшейся части добавляют 25 мл 70%-ного этанола и реэкстрагируют 2 раза. Фильтраты объединяли и доводили до метки в мерной колбе вместимостью 100 мл 70% этанолом. Полученный раствор центрифугируют при скорости 6000-8000 об/мин в течение 20-30 минут.

В литературе в качестве элюентов для определения флавоноидов методом ВЖЭХ качестве элюентов использовали фосфорные, ацетатные буферные системы и ацетонитрил. Мы использовали фосфатную буферную систему и ацетонитрил. Хроматографические условия:

-Хроматограф Agilent-1200 (оснащен автодозатором)

-Колонка Exlipse XDB C 18 (обращенно-фазный), 5 мкм, 4,6х250мм

- Детектор на диодной матрице (DAD), 247 нм, 254 нм, 276 нм.

-Скорость потока 1 мл/мин.

- Элюент фосфатный буфер: ацетонитрил:

0-5 мин 95:5,

6-12 мин 70:30,

12-13 мин 50:50,

13-15 мин 95:5,

температура термостата 300 С, вводимое количество -10 мкл (вкол)

Сначала в хроматограф вводили рабочие стандартные растворы, а затем приготовленные рабочие растворы. Стандартные образцы кверцетина, рутина, апигинина, галловой кислоты, гиполаэтина, робинина, гиперозида и лютеонина, приготовленные в концентрации 10 мкг/мл, определяли по библиотечным данным и веществам [3].

Для исследования водорастворимых витаминов использовалась часть листа Cucumis sativus. Анализы были прове-дены с использованием метода ВЖХ с детектором на диодной матрице (ДАД).

Условия проведения хроматографирования: Хроматограф - Agilent 1200 Infinity с автодозатором (USA) подвижная фаза (градиентный режим) – аце-тонитрил – буферный раствор pH=2.92 (4% : 96%) 0-6 мин., (10% : 90%) 6-9 мин., (20% : 80%) 9-15 мин., (4% : 96%) 15-20 мин. объем инжекции – 20 мкл. скорость подвижной фазы – 1,000 мл/мин. колонка – Eclipse XDB – C18. детектор – диодно-матричный, длины волны 272нм, 292нм, 254нм, 297нм и 360 нм [4].

Pезультаты и обсуждение

В результате изучения флавоноидного состава растения Cucumis sativus. Состав и количество полученных флавоноидов представлены на рисунки 1 и в таблице 1.

Рисунок 1. Результаты спектра флавоноидов Cucumis sativus

Таблица 1.

Анализ состава и количества флавоноидов в растении Cucumis sativus

Как видно из этой таблицы, листовая часть растения содержит рутин и галловую кислоту. Видно, что количество рутина выше по сравнению с галловой кислотой. По данным литературы, биологическая активность рутина сильнее, чем у кверцетина, гесперидина и нарингина. [5].

Витамины в части листа Cucumis sativus представлены аскорбиновой кислотой (витамин С), а также витаминами В6, В9, В2, В12, PP и В1. Состав и количество водорастворимых витаминов представлены на рисунке 2 и в таблице 2.

Рисунок 2. Результаты спектра водорастворимых витаминов, определенных методом ВЭЖХ Сucumis sativus

Таблица 2.

Содержание и количество водорастворимых витаминов проанализированных в части листьев Cucumis sativus методом ВЭЖХ

Данные таблицы 2 показывают, что растение содержит водорастворимые витамины В1, С, В6, В9, В2, В12 и витамин РР. Исследования водорастворимых витаминов показали, что тиамин (витамин B1) присутствует в значительно больших количествах. Его количество достигает 1,3 мг/100 г. В литературе имеется много сведений о биологической активности тиамина (витамина В1) [6].

Выводы

Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) изучен состав и количество флавоноидов и водорастворимых витаминов в листовых частях растения Cucumis sativus. Oпределяли количество галловой кислоты, рутина и водорастворимых витаминов В1, С, В6, В9, В2, В12 и РР и сравнивали с данными литературы. На основании свойств флавоноидов и водорастворимых витаминов, обнаруженных в листовой части растения Cucumis sativus, был сделан следующий вывод о возможности создания биологически активной добавки из листовой части этого растения.

Список литературы:

1. Oragwu, Ifeoma & Okolo, Azubuike & Emmanuel, Ifeanyi & Osuagwu, & C., Collins & E., Onyia & A., Usiakpebru & Okechukwu, James. (2021). Phytochemical and Proximate Composition of Cucumber (Cucumis Sativus) Seed Oil. International Journal of Research and Scientific Innovation. 08. 244-250. 10.51244/IJRSI.2021.8207.
2. Флора Узбекистана, Том –V, Издательство академии наук Узбекской ССР. Ташкент -1961, стр-608
3. J.Tursunov, A.Ibragimov, U.Ishimov. Farg‘ona vodiysida o‘sadigan Cistanche mongolica o‘simligining poya qismi flavonoidlar tarkibi va miqdorini yuqori samarali suyuq xromatografik usulda aniqlash. Scientific journal of the Fergana State University.DOI:10.56292/SJFSU/vol28_iss4/a41.LicenseCC BY-NC-ND 4.0 (4)-2022г 198-стр.
4. Турсунов Жахонгир Исроилович, Ибрагимов Алиджан Аминович, & Ишимов Учқун Жомуратович (2021). ИЗУЧЕНИЕ АМИНОКИСЛОТНОГО И ВИТАМИННОГО СОСТАВА НАДЗЕМНОЙ И ПОДЗЕМНОЙ ЧАСТЕЙ РАСТЕНИЯ CISTANCHE MONGOLICA ПРОИЗРАСТАЮЩЕГО В УЗБЕКИСТАНЕ. Universum: химия и биология, (12-1 (90)), 72-75.
5. Балакина А.С., Трусов Н.В., Авреньева Л.И., Гусева Г.В., Аксенов И.В., Кравченко Л.В., & Тутельян В.А. (2016). Влияние рутина и гесперидина на экспрессию гена Nrf2 и активность гемоксигеназы-1 и nad(p)H-хиноноксидоредуктазы при их раздельном и совместном действии. Вопросы питания, 85 (3), 18-26. doi: 10.24411/0042-8833-2016-00031
6. Громова, О. А., Гупало, Е. М., & Никонов, А. А. (2008). Клиническая фармакология тиамина и бенфотиамина: «Старые» показания - новые механизмы молекулярного действия. Трудный пациент, 6 (2-3), 36-42.