АМИНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ СЕМЕНА ГОРЬКОГО МИНДАЛЯ

АННОТАЦИЯ

Целью исследования было выявление аминокислот, содержащихся в семенах горького миндаля, выращенного в Ферганской области. Состав семян определен методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Из результатов в семенах горького миндаля было исследовано 16 из 20 различных аминокислот. Аминокислоты в образце содержали 13 типов аминокислот, причем было обнаружено, что они содержат наибольшее количество лизина (8,124 мг/г). Также было исследовано, что из незаменимых аминокислот присутствуют трианин (3,20 мг/г), изолейцин (1,106 мг/г), аргинин (0,93 мг/г), фенилаланин (0,434 мг/г), валин (0,176 мг/г) и метионины (0,169 мг/г). В образце не обнаружен гистидин, триптофан, глютамин, аспарагин и глютамат. Таким образом, семена горького миндаля богаты незаменимыми аминокислотами, которые можно использовать для приготовления натуральных средств народной медицины.

ABSTRACT

The aim of the study was to identify the amino acids contained in the seeds of bitter almonds grown in the Ferghana region. The composition of the seeds was determined using the method of high-performance liquid chromatography. From the results, 16 out of 20 different amino acids were studied in bitter almond seeds. The amino acids in the sample contained 13 types of amino acids, and they were found to contain the largest amount of lysine (8,124 mg/g). It has also been studied that trianine (3.20 mg/g), isoleucine (1.106 mg/g), arginine (0.93 mg/g), phenylalanine (0.434 mg/g), valine (0.176 mg/g) and methionines (0.169 mg/g) are present from essential amino acids. Amino acids such as histidine, tryptophan, glutamine, asparagine and glutamate were not found in the sample. Thus, the seeds of bitter almonds are rich in essential amino acids, which can be used to prepare natural remedies of traditional medicine.

Ключевые слова: горький миндаль, семена, аминокислоты, лизин, высокоэффективная жидкостная хроматография.

Keywords: bitter almonds, seeds, amino acids, lysine, high-performance liquid chromatography.

ВВЕДЕНИЕ. В настоящее время на фармацевтическом рынке наметилась тенденция к использованию лекарственных препаратов природного происхождения, которые в отличие от синтетических обладают более мягким действием и не вызывают побочных эффектов. Особая роль при этом отводится амино-кислотам. Поэтому поиск нового, более дешевого сырья для выделения аминокислот представляется актуальным [1].

Аминокислоты составляют физиологически важную группу соединений, участвующих в синтезе специфических тканевых белков, ферментов, нуклеиновых кислот, сложных углеводов, жиров, гормонов и других, необходимых для живых организмов соединений и способны поддерживать нормальное функционирование органов и систем при экстремальных состояниях внешней среды [2, 3]. Отдельные аминокислоты показаны в профилактике и лечении многих патологических состояний. Глютаминовая кислота участвует в поддержании дыхания мозговых клеток, стимулирует окислительные процессы. Аланин представляет интерес как эффективное средство профилактики ишемических нарушений в мозге [2]. Пролин входит в состав синтетических ноотропных средств, является основной составляющей коллагена [4]. Метионин восстанавливает клетки печени и защищает организм от токсинов. [5]. Лейцин, метионин, аспарагиновая и глютаминовая кислоты оказывают положительное влияние на сердечно-сосудистую систему, аспарагиновая и глютаминовая кислоты применяются при аритмиях, гипоксиях, а также заболеваниях центральной нервной системы [6]. Производными аминокислот являются энкефалины, эндорфины, динорфины и другие нейропептиды, а также высвобождающие факторы гипоталамуса, гормоны гипофиза [7]. Аминокислоты, обладая широким спектром фармакологического действия, придают другим веществам легкоусвояемую и безвредную форму, одновременно потенцируя их эффект [8].

Однако до сих пор лекарственные растения не рассматриваются в качестве источника легкоусвояемой формы аминокислот в комплексе с другими фармакологически активными веществами с целью их использования при лечении ряда патологий. В связи с этим нами проведены исследования по изучению аминокислотного состава горького миндаля[9].

Горький миндаль - небольшое дерево или кустарник из семейства родственных, высотой около 1,5 м. Листья черешковые, ланцетные с длиннозаостренной верхушкой, до 3 - 4 см длиной и 1,5 - 2 см шириной. Цветки обоеполые, светло-фиолетовые, 14-19 мм в высоту, 8-11 мм в ширину. Кожура миндаля покрыта толстыми волосками, длиной 20-38мм. Мякоть горькая на вкус. Горький миндаль цветет с марта по апрель и плодоносит с июня по июль. Произрастает на холмах и горах Самаркандской, Кашкадарьинской, Сурхандарьинской, Ферганской долины и Ташкентской областей на высоте 850-2500 м над уровнем моря, среди скал и на плодородных почвах[10]. В семенах содержится 50% масла и 2,5-4% глюкозида амигдалина, из которого приготавливают различные лекарства. Масло из семян горького миндаля применяют от кашля, жары, пневмонии и болезней почек. Корни горького миндаля используется для дубления кожи и окрашивания тканей в желтый цвет[11].

Цель исследования - определение качественного и количественного состава аминокислот, содержащихся в горьком миндале, с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

В качестве образцов были выбраны семена горького миндаля Amygdalus bucharica, произрастающего в Ферганской области. Качественный и количественный состав аминокислот, содержащихся в них идентифицированы с помощью детектора флуоресцентного детектора (FLD) устройства ВЭЖХ Agilent 1260 II Infiniti.

Была использована предколонка Agilent Poroshell 120 EC-c-18 (США), с размерами 150 мм × 4,6 мм × 4 мкм, управление которой выполнялось в автоматическом программируемом режиме.

При проведении анализа в качестве подвижной фазы использовали раствор дигидрофосфата натрия (40 мМ) с рН 7,8 и смесь – ацетонитрил : метанол : вода в соотношении 45:45:10.

Режим работы ВЭЖХ приводится в таблице 1.

Таблица 1.

Режим работы ВЭЖХ

Аминокислоты и их производные были идентифицированы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Режим хроматографирования осуществлялся в следующих условиях: расход 1 мл/мин, объем введенной пробы 5 мкл при температуре термостата 400С, время анализа 30 минут. В результате были получены хроматограммы аминокислот и сравнены со стандартными образцами аминокислот.

Выделение аминокислот, содержащихся в образце, проводили следующим образом: навеску 5 г (с точностью до ±0,001 мг) измельченных до 1 мм, семян горького миндаля помещали в круглую колбу, снабженную обратным холодильником, куда вносили 50 мл 6% раствора соляной кислоты. Кислотное извлечение аминокислот проводили при термостатировании 110°C и постоянном перемешивании с помощью магнитной мешалки в течение 24 часов.

После завершения процесса раствор охлаждали до комнатной температуры и, взяв 10 мл из образца, центрифугировали при 1200 об/мин в течение 10 минут. Затем 5 мл раствора нейтрализовали с помощью 6 н. NaOH, отфильтровали в фильтре 0,45 мкм и по 1 мл загружали в виалы для последующего хроматографирования.

ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

С помощью метода высокоэффективного жидкостного хроматографии были получены следующие результаты (табл. 2, Рис. 1).

Таблица 2.

Количество аминокислот, содержащихся в семенах горького миндаля  (в расчете на мг/г)

Рисунок 1. Хроматограмма аминокислот в семенах Amygdalus bucharica

Рисунок 2. Диаграмма аминокислотного состава горького миндаля

Из диаграммы, представленной на рисунке 2, также видно, что в семенах горького миндаля было обнаружено 16 из 20 различных аминокислот. Аминокислоты в образце содержали 13 типов аминокислот, причем было обнаружено, что лизин содержится в большем количестве (8,124 мг/г). Лизин - одна из незаменимых аминокислот, составляющая основной компонент молекулы белка. Он помогает укрепить иммунную систему, считается антивирусным средством, особенно против вируса герпеса. Также лизин участвует в метаболизме кальция в организме и защищает от развития остеопороза. L-лизин предотвращает нарушение метаболизма глюкозы и развитие сахарного диабета.

Анализируемый образец содержит трианин (3,20 мг/г), изолейцин (1,106 мг/г), аргинин (0,93 мг/г), фенилаланин (0,434 мг/г), валин (0,176 мг/г) и метионины (0,169 мг/г), относящихся к незаменимых аминокислотам. Из заменимых аминокислот были обнаружены глицин (5,32 мг/г), серин (0,932 мг/г), пролин (0,409 мг/г) и аланин (0,395 мг/г). Образец не содержал гистидина, триптофана, глутамина, аспарагина и глутамата. Из моноаминокарбоновых кислот 7 видов были идентифицированы в семенах горького миндаля. Моноаминодикарбоновые кислоты (аспарагин и глютамин) отсутствуют. В основном, исследованные образцы содержали в большом количестве алифатические кислоты. Из ароматических аминокислот были обнаружены тирозин и фенилаланины, а из гетероциклических кислот - пролин и гистидины.

Количество аминокислот в образце увеличивалось в следующем порядке: Met < Val < Ala < Pro < Phe < Arg < Ser <Ile< Tri < Gly < Lys.

Заключение. Таким образом, семена горького миндаля богаты незаменимыми аминокислотами, которые можно использовать для приготовления натуральных средств народной медицины. Также есть возможность приготовить из него экстракт биологически активных веществ и использовать его для профилактики различных заболеваний.

Список литературы:

1. Шмалько Н.А. Амарант –перспективная пищевая культура XXI века // Наука Кубани. – 2007. –Прил. –С. 6–13.
2. Шкроботько П.Ю. Аминокислотный состав подземных органов валерианы Фори и валерианы бузинолистной // Фармация. — 2009. — №7. — С.19-23.
3. Шуляковская Т.А. Динамика содержания аминокислот в почках и листьях Betula pubescens и B. pendula (Betulaceae) в течение вегетационного периода // Растительные ресурсы. — 2007. — Т. 43, вып. 4. — С. 87-94.
4. Шилова И.В. Аминокислотный и минеральный состав надземной части Atragene speciosa Weinm // Химико-фармацевтический журнал. — 2002. — Т.36. — №11. — С. 36-38.
5. Калиниченко К.Ю. Аминокислотный состав сока из листьев лопуха (Arctium lappa L.) // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. — 2012. — № 2. — С. 15-18.
6. Asqarov I.R., Isayev Yu.T., Maxsumov A.G., Qirg’izov Sh.M. Organik kimyo T.: G.Gulom nomidagi nashriyot-manbaa ijodiy uyi. 2022y. -752b.
7. Кароматов И. Д., Ражабова Д. Лечебные свойства растения миндаль // Эл. научн. журнал «Биология и интегративная медицина», электр. Научн.журн.-2018. - №6. – С.152-164.
8. Халматов Х.Х., Усмонхўжаев А.Х., Махсумов М.И., Ахмедов Ў.А. Атлас лекарственных растений Узбекистана. -Т. «Узбекистан» 2015. с.99.
9. Скрябина Е.Н. Аминокислоты растений рода Melampyrum L. / Е.Н. Скрябина, Е.Е. Галишевская, В.Д. Белоногова // Медицинский альма­нах. — 2012. — № 5 (24). — С. 206-208.
10. Бурханова Х.В., Каримова Д.Б. (2024). Сравнительный анализ минерального состава различных сортов миндаля. Универсум: Технические науки, 7 (4(121)), 20-24.
11. Simsek, M. Chemical, Mineral, and Fatty Acid Compositions of Various Types of Walnut (Juglans regia L.) in Turkey. Bulg. Chem. Commun. 2016, 48, 6670.