стажер-исследователь Института биофизики и биохимии при НУУз, Республика Узбекистан, г. Ташкент
КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ БЕЛКОВ В РАСТЕНИИ ВИДА Atriplex pratovii, ПРОИЗРАСТАЮЩЕГО НА ВЫСОХШЕМ ДНЕ АРАЛЬСКОГО МОРЯ
АННОТАЦИЯ
В работе был проведен количественный анализ белков в растении вида Atriplex pratovii, произрастающего на высохшем дне Аральского моря. Растения вида Atriplex pratovii выращивали в 5 различных почвах, в бумажных стаканчиках диаметром 5 см. Содержание общего белка в растительных образцах определяли по общему содержанию азота. Анализы были проведены в лабораторных условиях в колбе Кельдаля.
ABSTRACT
In this work, a quantitative analysis of proteins was carried out in a plant of the species Atriplex pratovii growing on the dried bottom of the Aral Sea. Plants of the species Atriplex pratovii were grown in 5 different soils, in paper cups 5 cm in diameter. The content of total protein in plant samples was determined from the total nitrogen content. The analyzes were carried out under laboratory conditions in a Keldahl flask.
Ключевые слова: белок, галофиты, Atriplex pratovii, растения, количественный анализ.
Keywords: protein, halophytes, Atriplex pratovii, plants, quantitative analysis.
Введение
В настоящее время восстановление Аральского моря в прежних размерах – очень трудная задача, и она обусловлена водохозяйственным состоянием Узбекистана.
Наряду с этим была подтверждена целесообразность концентрации усилий по защите Приаралья в социально-природном направлении.
В Узбекистане был принят ряд решений, а также реализованы проекты, которые позволяют в значительной степени стабилизировать ситуацию в Приаралье. В настоящее время идут работы по продолжению развития Аральского моря в направлении значительного прогресса и наращивания как жизненного, так и природного потенциала территорий [4].
На сегодняшний день будущее Аральского моря остается актуальной задачей, которую нельзя снимать с региональной повестки. А также использование природных ресурсов, особенно скрининг биологически активных веществ, содержащихся в видах растений, и их использование в различных областях производства, сельского хозяйства, а также медицины и фармации, считается одной из важнейших научных проблем [8].
Продуктивность видов растений, составляющих естественные пастбища, разбросанные по пустынным районам нашей республики, может быть рекомендована как ценные природные кормовые виды в зависимости от количества в их составе витаминов, белков и пептидов, углеводов.
Белки являются ключевыми регуляторами восприятия стресса. Растения, попадающие в условия стресса, синтезируют аминокислоту пролин в большом количестве. Пролин стабилизирует структуру белков, повышает количество связанной воды и уменьшает долю свободной воды. Растение тем самым становится устойчивым к засухе и высоким температурам. Аминокислота глицин тоже оказывает антистрессовое действие на растение и используется в синтезе большого количество белков, которые участвуют в регуляции стресса. Он тоже вырабатывается в большом количестве в условиях стресс-фактора. Эта аминокислота является очень хорошим проводником элементов питания, так как хорошо связывается с металлами и затягивает их в растения [2].
Солеустойчивые растения – галофиты, накапливающие большие концентрации солей в вакуолях из-за своего разнообразия, считаются богатым источником потенциальных новых культур. Галофиты испытаны в качестве овощных, кормовых и масличных культур в агрономических полевых испытаниях. Корма и продукты из семян галофитов могут заменить обычные ингредиенты в системах кормления животных с некоторыми ограничениями на их использование из-за высокого содержания соли и антипитательных соединений, присутствующих в некоторых видах. Галофиты находят применение в переработке засоленных сельскохозяйственных сточных вод и рекультивации засоленных почв в ирригационных районах засушливых зон, поэтому очень важно определять количество общих белков в данных растениях [5].
Растения галофит видов рода Atriplex, широко известные как солончаковые, являются хорошими кандидатами для посадки растений в засоленных районах и для повышения продуктивности в засушливых или полузасушливых регионах мира из-за их солеустойчивости и высокой продуктивности. Поэтому эти растения многие годы выращивали в качестве кормового кустарника на малоплодородных сельскохозяйственных угодьях в Южной Африке, Австралии, США и Ближнем Востоке. Виды рода Atriplex демонстрируют значительные различия в своем химическом составе и значительно различаются по своей реакции на соли натрия. В литературе имеется обширная информация о химическом составе и пищевых характеристиках видов Atriplex [1].
Методы
Нами были собраны биоматериалы растения вида Atriplex pratovii, произрастающего на высохшем дне Аральского моря. Для сохранения естественного состояния образцы хранили в холодильнике при –20 °С.
В данной работе был проведен количественный анализ белков растения вида Atriplex pratovii. Эксперимент проводили в лаборатории экспериментальной полиплоидии и филогении хлопка Института генетики и экспериментальной биологии растений и в лаборатории химии белков и пептидов АН РУз Института биоорганической химии.
Таблица 1.
Виды почвы, на которых выращивали растения вида Atriplex pratovii, произрастающего на высохшем дне Аральского моря
№ |
Виды почв |
Число семян |
Проростки (шт.) |
Всхожесть семян, % |
1 |
Полевая почва (песок – 0,25 г, орг. соед. – 0,25 г, почва – 0,5 г) |
9 |
3 |
33,3 |
2 |
Пористая почва 1 (песок – 0,25 г, почва – 0,25 г, торф – 0,25 г, полевая почва – 0,25 г) |
9 |
– |
– |
3 |
Песок |
9 |
– |
– |
4 |
Пористая почва 2, (почва – 0,25 г, полевая почва – 0,25 г, торф – 0,5 г) |
9 |
6 |
66,6 |
5 |
Торф (минеральное удобрение) |
9 |
6 |
66,6 |
Для нарушения покоя семена стратификацировали, то есть выдерживали семена в течение 10–20 дней в холодильнике. Микрофебрильную часть (органеллы клеток, поперечно полосатых мышц) образцов семян расслаивали, семена обрабатывали (стерилизовали) в слабом растворе перманганата калия (KMnO4) и затем промывали в дистиллированной воде для вымывания ингибиторов. Семена помещали в чашки Петри с увлажненной фильтровальной бумагой и помещали в термостат при температуре +27+33 °С на 24 часа. Семена высевали в теплице при температуре +22+24 °С в бумажных стаканчиках (диаметром 5 см и глубиной 12 см) и в различных почвах (табл. 1). Стаканчики регулярно поливали. Растения проросли в течение 1 месяца. Когда они стали достаточно большими, отдельные сеянцы переносили в отдельный горшок (диаметром 25 см и глубиной 50 см), содержащий такую же смесь почвы. Возраст растений определяли с момента прорастания семян [3].
Растения вида Atriplex pratovii выращивали в 5 различных почвах в бумажных стаканчиках диаметром 5 см (табл. 1).
Результаты и обсуждение
В образце почв под № 1 из посаженных 9 семян выросли только 3 проростка. В образцах почв под № 2 и 3 семена не проросли. И в образцах почв под № 4 и 5 из посаженных 9 семян выросли по 6 проростков. Самая плодотворная почва под № 4 и 5.
По методу Кельдаля определили количество белков в растении вида Atriplex pratovii. Содержание общего белка в растительных образцах определяли по общему содержанию азота [6]. Анализы проводили в лабораторных условиях в колбе Кельдаля. Массовая доля белка в образце составила 17,56%.
Выводы
Исходя из результатов, можно сделать вывод, что в составе вида Atriplex pratovii, произрастающего на высохшем дне Аральского моря, более 50% сухой массы растений составляют белки. Они играют важную роль для защиты от воздействия климатических факторов, таких как засуха, наводнения, и в условиях низкотемпературного и солевого стресса.
Список литературы:
- Шеримбетов С.Г. Atriplex pratovii sukhor. – М. : Ташкент, 2019. – 91 с.
- Atriplex canescens, a valuable plant in soil rehabilitation and forage production. A review / D. Ma [et al.] // Sci. Total Environ. – 2022. – Vol. 804. – P. 150287.
- Atriplex nummularia Lindl. As alternative for improving salt-affected soils conditions in semiarid environments: A field experiment / Y.J.A.B. Silva, Y.J.A. B. Silva, M.B.G.S. Freire, E.A.P.L. Lopes [et al.] // Chil. J. Agric. Res. – 2016. – Vol. 76, № 3. – P. 343–348.
- Hakeem K.R., Ahmad P., Ozturk M. Crop improvement: New approaches and modern techniques // Crop Improv. New Approaches Mod. Tech. – 2013, January. – P. 1–493.
- Identification of candidate genes related to salt tolerance of the secretohalophyte Atriplex canescens by transcriptomic analysis / H. Guo, L. Zhang, Y.N. Cui, S.M. Wang [et al.] // BMC Plant Biol. – 2019. – Vol. 19, № 1. – P. 1–17.
- Mandák B., Pyšek P. Fruit dispersal and seed banks in Atriplex sagittata: The role of heterocarpy // J. Ecol. – 2001. – Vol. 89, № 2. – P. 159–165.
- Mandák B., Pyšek P. The effects of light quality, nitrate concentration and presence of bracteoles on germination of different fruit types in the heterocarpous Atriplex sagittata // J. Ecol. – 2001. – Vol. 89, № 2. – P. 149–158.
- Mishra A., Tanna B. Halophytes: Potential resources for salt stress tolerance genes and promoters // Front. Plant Sci. – 2017. – Vol. 8. – P. 1–10.