ИЗУЧЕНИЕ РЕПРОДУКТИВНОЙ ТОКСИЧНОСТИ СУММЫ ПОЛИФЕНОЛОВ ИЗ РАСТЕНИЯ Rhus glabra НА ЛАБОРАТОРНЫХ КРЫСАХ

АННОТАЦИЯ

Из Сумаха голого, Rhus glabra, выделена сумма полифенолов (танинов), названная Glabtan. В ходе доклинических испытаний проведено изучение эмбриотоксического, тератогенного действия и влияния Glabtan на репродуктивную функцию лабораторных крыс. Использовано 180 самок, 90 самцов. Результаты исследования показали, что при длительном внутрижелудочном введении в дозах 50 и 100 мг/кг Glabtan не влияет на течение беременности и внутриутробное развитие плодов, плодовитость и репродуктивную функцию самок и самцов, показатели физического развития потомства крыс в раннем постнатальном периоде жизни.

ABSTRACT

A sum of polyphenols (tannins) with the assigned name of Glabtan was isolated from the smooth sumac (Rhus glabra). In the course of preclinical trials, embryotoxic and teratogenic effects, as well as the impact of Glabtan on the reproductive function of rats was studied in 180 females and 90 males. The findings from the study demonstrated that after prolonged intragastric administration of the product at the doses of 50 and 100 mg/kg, it produced no effects of the course of pregnancy, intrauterine fetal development and on the fecundity and reproductive function of the rat males and females, as well as on the parameters of physical development of the rat progeny in the early postnatal period of life. 

Ключевые слова: Rhus glabra, полифенолы, эмбриотоксичность, тератогенность, репродуктивная функция, безопасность

Keywords: Rhus glabra, polyphenols, embryotoxicity, teratogenicity, reproductive function, drug safety

Лекарственные растения с древних времен использовались для лечения и профилактики различных заболеваний. В ведущих фармацевтических компаниях мира значительно возросла разработка новых растительных препаратов и их использование в медицинской практике. В настоящее время установлено, что полифенольные соединения, выделенные из растений, обладают широким спектром биологического действия, включая антиоксидантную, антигипоксантную, противовирусную, противовоспалительную, сосудорасширяющую активность и др., а также влияют на различные ферментные системы организма. Они являются наиболее распространенными антиоксидантами в рационе человека и имеют значительное структурное разнообразие [1,6,7,13,31]. За счет этого полифенольные соединение являются ценным источником для создания новых перспективных лекарственных препаратов, обладающих направленным действием и минимальной токсичностью.

Род Rhus (семейство: Anacardiaceae, порядок: Sapindales) состоит из более чем 250 видов, распространенных в тропиках, субтропиках и умеренных поясах. Традиционно экстракты и продукты из видов Rhus широко использовались как часть традиционной лечебной практики для лечения грибковых, бактериальных и протозойные инфекции человека и животных. Большая часть биологической активности этих растений связана с флавоноидами, фенольными и терпеноидными соединения, присутствующими в различных видах и включает противомикробное, цитотоксическое, противораковое, антиоксидантное, противовирусное, противовоспалительное и противомалярийное действие [14,19,22,27,28,29].

В этом направлении долгое время работают сотрудники Института биоорганической химии АН РУз, где разрабатываются новые фармакологические препараты на основе полифенольных соединений растительного происхождения [8,24,25,26], и одним из успешных проектов является разработка и внедрение в медицинскую практику препарата Рутан, представляющего собой сумму танинов из Сумаха дубильного, Rhus coriaria. против вируса СOVID-19 [3,5].

Следующим объектом исследования явился Сумах голый, Rhus glabra, также богатый танинами. Выделенная сумма полифенолов из этого растения, ПС-5, названная Glabtan, в экспериментальных условиях показала свою перспективность как потенциального средства с высокой биологической активностью. В настоящее время проводятся доклинические испытания безопасности Glabtan, в связи с чем, целью работы явилось изучение репродуктивной токсичности препарата (оценка влияния на репродуктивную функцию, а также эмбриотоксического, тератогенного действия препарата).

Материалы и методы исследования. Исследование репродуктивной токсичности Glabtan проводили на крысах согласно [9]. В работе использовано 90 самцов и 180 самок. Манипуляции с лабораторными животными проводили в соответствии с Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях [15].

Изучение влияния вещество Glabtan на репродуктивную функцию крыс, самок и самцов по отдельности, проведено на 60 самцах и 120 самках белых беспородных крыс массой 160±20 г. Животные были разделены на 5 группы по 10 самцов и 20 самок. В опытах над самками Glabtan внутрижелудочно вводили самкам в течение 15 дней в дозах 50 и 100 мг/кг массы тела, затем животных спаривали с интактными самцами в соотношении 2:1 в течение 10 дней. В опытах над самцами Glabtan вводили самцам внутрижелудочно в дозах 50 и 100 мг/кг массы тела в течение 48 дней, затем животных спаривали с интактными самками в соотношении 1:2 в течение 10 дней [9]. Оплодотворение регистрировали с помощью вагинальных мазков, на третьей неделе часть беременных самок умерщвляли и вскрывали. Оценивали состояние репродуктивных органов самок, подсчитывали количество желтых тел в яичниках, количество имплантаций в матке, живых и мертвых плодов, вычислили индекс фертильности. В каждой группе самок часть беременных крыс оставляли до родов и в течение одного месяца наблюдали за развитием потомства (по 20 от каждой группы) - общим физическим состоянием, поведением и гибелью крысят. О состоянии репродуктивной функции самцов судили по результатам исследования репродуктивных органов самок, спаривавшихся с самцами, получавшими Glabtan.

Эксперименты по эмбриотоксичному действию проводились на белых крысах, массой 160±20 г. Животные были разделены на 3 группы по 10 самцов и 20 самок. В течение 48 дней самцам внутрижелудочно вводили: 1 опытной группе - Glabtan в суточной терапевтической дозе 50 мг/кг, 2- опытной группе Glabtan, 100 мг/кг, 3- группе (контрольной) воду. Далее, по истечении указанного срока, самок крыс подсаживали к самцам в соотношении 2:1. В течение недели беременных крыс-самок выделяли по наличию сперматозоидов в вагинальном мазке и ежедневно до забоя им вводили препарат в тех же дозах. В ходе эксперимента наблюдали за общим состоянием животных, приемом пищи и поведением. Забой животных осуществляли на 20-й день беременности. Для изучения аномалий развития внутренних органов 20 плодов из контрольной и опытной групп помещали в жидкость Буэна на 1-2 недели, 20 плодов фиксировали в 96% этаноле для изучения состояния скелета по методу Доусона в модификациях А.П. Дыбана с соавторами [2]. Определяли уровень эмбриональной смертности (эмбриолетальное действие), показатели пред- и постимплантационной гибели, изменение массы тела, кранио-каудальные размеры плодов, задержку оссификации скелета (общая задержка развития), анатомические отклонения от нормы, проявляющихся до или после рождения (тератогенное действие).

Результаты исследований статически обработаны общепринятыми методами с определением средней величины (М) и средней ошибки (m) с помощью компьютерной программы Microsoft Excel, а также анализ четырехпольных таблиц с поправкой Йейтса для малых чисел, статистически значимыми приняты различия при уровне значимости p<0,05.

Результаты и их обсуждение. Результаты исследований влияния Glabtan на репродуктивную функцию белых крыс показали, что длительное внутрижелудочное введение Glabtan в дозах 50 и 100 мг/кг самкам в течение 15 дней, самцам в течение 48 дней не повлияло на состояние и поведение подопытных крыс, показатели репродуктивной функции (табл. 1). Индекс фертильности самок во всех опытных группах остался на уровне показателя контрольной группы – 90%. Оставалось стабильным количество мест имплантации и желтых тел на 1 самку во всех опытных группах без значимых различий с контрольными показателями. Среднее количество живых плодов на 1 самку в контроле составило 8,4±0,5, в опытных группах с самками, получавшими Glabtan в дозах 50 и 100 мг/кг, этот показатель составил 8,2±0,6 до 8,8±0,4, а в опытных группах с самцами, получавшими Glabtan в дозах 50 и 100 мг/кг, соотвтетсвенно 8,6±0,7 и 8,8±0,3 (p>0,05 по сравнению с контролем для всех групп).

Таблица 1.

Влияние препарата Glabtan на плодовитость и репродуктивную функцию крыс (М±m)

У оставленных рожать самок всех опытных групп сроки родов составили 20-21 день, процесс родов и забота о потомстве были без особенностей. Среднее количество плодов на одну самку, соотношение крысят по полу, уровень гибели новорожденных крысят не изменялись в пометах всех экспериментальных групп. Сроки отлипания ушной раковины, появления первичного волосяного покрова, прорезывания резцов, открытие глаз, опускание семенников и открытие влагалища в пометах как опытных, так и контрольных групп достоверно не различались. Гибели самок в период вскармливания во всех группах не зафиксировано. В экспериментах по оценке эмбриотоксичности препарата Glabtan в дозах 50 и 100 мг/кг, плодовитость самок составила 80 и 90%, соответственно, что соответствует контрольным значениям (табл. 2).

Таблица 2.

Показатели физического развития потомства крыс препарата Glabtan в раннем постнатальном периоде жизни (М±m)

Ежедневный осмотр беременных самок после введении Glabtan не выявил существенной разницы в их общем состоянии, опрятности от беременных самок контрольной группы. Показатель предимплантационной гибели эмбрионов в контроле составил 1,49%, при введении Glabtan в дозах 50 и 100 мг/кг – 1,5 и 1,36%, показатели постимплантационной гибели – 2,98, 3,03 и 2,7%, соответственно. Масса плодов в контроле и опытных группах введения Glabtan в дозах 50, 100 мг/кг, составляет соответственно 3,3±0,2; 3,1±0,18, и 3,2±0,3 г. Не имеют существенных отличий и кранио-каудальные размеры плодов: 27,6±1,6; 26,9±1,2 и 27,2±1,1 мм, соответственно (табл.3).

Таблица 3.

Влияние Glabtan на течение беременности у крыс и внутриутробное развитие плода на 20 день беременности (М±m)

В ходе изучении тератогенного действия препарата Glabtan в дозах 50 и 100 мг/кг при внешнем осмотре плодов каждого помёта внешних и внутренних аномалий не выявлено: подкожных кровоизлияний, кровоизлияний в лицевой череп, грудную и брюшную полости, в головной и спинной мозг; расширений желудочков мозга; изменения числа ребер (по 13 справа и слева) видимых аномалий внешнего развития не зафиксировано.

Таким образом, Glabtan при внутрижелудочном введении в дозах 50 и 100 мг/кг не влияет на репродуктивную функцию крыс и не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действием.

Обсуждение. В настоящее время использование традиционных лекарственных средств, пищевых добавок, полученных из растительных источников, стало привлекательным сегментом в лечении многих заболеваний, связанных с образом жизни. Фенольные соединения занимают особое место благодаря низкой токсичности и высокой плейотропной эффективности, опосредованной в основном антиоксидантным свойствами. Однако, в научной литературе накапливается информация об отрицательных последствиях использования фенольных соединений: выявлено наличие прооксидантной и эстрогенной активности, канцерогенного потенциала, цитотоксических эффектов; показаны индукция апоптоза и взаимодействие флавоноидов с лекарствами [20].

Неоднозначны и данные по репродуктивной токсичности полифенолов наряду с крайне ограниченным объемом информации о безопасности этих соединений для репродуктивных процессов, что свидетельствует о значительном пробеле в этой области, который требует дополнительных исследований профиля безопасности активных полифенольных соединений в экспериментальных условиях, а также накопления и анализа данных по ситуациям из клинической практики [4].

В частности, в высоких концентрациях полифенолы (кверцетин-3-О-рутинозид, изомеры протокатеховой и кумаровой кислот) из лечебного растения Антирея бурбоника (A. borbonica) с антиоксидантным и противовоспалительным действием, проявили эмбриональную и личиночная токсичность на модели эмбриона рыбки данио, причем вид экстракции имел значение [30].

В другом эксперименте на мышах с использованием методики ограничения роста плода на фоне снижения кровоснабжения матки и пупочной артерии исследовали влияние гранатового сока на исходы беременности. Предполагалось, что негативное влияние, связанное со снижением маточного, плацентарного и плодового кровотока, будет нивелировано кормлением самок мышей гранатовым соком, богатым антиоксидантами и биоактивными полифенолами. По мнению исследователей, использование гранатового сока должно было улучшить маточный и плацентарный кровоток и тем самым усилить рост плода. Вопреки гипотезе, которая была положена в основу эксперимента, набор веса у плода мыши не происходил. Наоборот, добавка гранатового сока уменьшала вес, окружность головы и живота помета. Таким образом, полученные в исследовании данные не подтверждают безопасность и клиническую эффективность использования полифенолов в рационе мыши и не могут быть рекомендованы для улучшения исходов беременности и предотвращения ограничения роста плода [16].

Для другого известного полифенола куркумина, желтого пигмента Curcuma longa, с различным спектром биологической активности, также показано токсическое действие на стадию бластоцисты эмбрионов мышей, последующее прикрепление эмбриона и рост in vitro. Результаты показывают, что в концентрации 24 мкМ в течение 24 часов воздействие куркумина in vitro запускает апоптоз и замедляет раннее постимплантационное развитие после передачи мышам-хозяевам. Кроме того, куркумин индуцирует эффекты апоптотического повреждения бластоцист мыши посредством образования активных форм кислорода и дополнительно способствует митохондриально-зависимым апоптическим сигнальным процессам, нарушающим последующее эмбриональное развитие. In vivo исследования подтвердили значительное снижение коэффициента имплантации среди имплантированных эмбрионов и более высокий уровень неспособности нормально развиваться при воздействии куркумина [12]. В следующем исследовании куркумин вызывал значительное снижение скорости созревания ооцитов, оплодотворения и эмбрионального развития in vitro. Обработка ооцитов куркумином во время созревания in vitro (24 мкМ) приводила к усилению резорбции постимплантационных эмбрионов и снижению веса плода. Эксперименты на мышиной модели in vivo показали, что потребление питьевой воды, содержащей 40 мкМ куркумина, приводит к снижению созревания ооцитов и оплодотворению in vitro, а также к раннему повреждению эмбрионального развития. Наконец, предварительная обработка специфическим ингибитором каспазы-3 эффективно предотвращала эффекты повреждения, вызванные куркумином, что свидетельствует о том, что повреждение эмбрионов куркумином происходит в основном через каспазозависимый апоптотический процесс [11]. Дальнейшие исследования in vitro показали, что в концентрациях 6, 12 или 24 мкМ в течение 24 часов куркумин дозозависимо вызывает повреждения в бластоцисте мышей на стадии имплантации и на ранней стадии после имплантации, вплоть до полной гибели эмбрионов при 24 мкМ. Кроме этого, после предварительной обработки куркумином значительно увеличилась доля гигантских клеток трофобласта на один имплант [18].

Дополнительные доказательства этих эффектов получены из недавнего исследования на модели рыбок данио. Было обнаружено, что экстракт Curcuma Longa, очень богатый фавоноидами (наиболее представленны катехин, эпикатехин и нарингенин), при воздействии на эмбрионы и личинки рыбок данио в различных концентрациях (7,80, 15,63, 31,25, 62,50, 125,0 и 250,0 мкг/мл) в разные часы после оплодотворения (24-120 ч) проявлял токсическое действие в дозе выше 62,50 мкг/мл, в дозе 125,0 мкг/мл повышал смертность эмбрионов и вызывал морфологические деформации у личинок [23].

Другие фенольные соединения были протестированы на эмбриотоксичность с использованием in vitro тест-системы эмбриональных стволовых клеток (EST), состоящей из 2 клеточных линий (мышиные фибробласты, клетки BALB/c-3T3, и мышиные эмбриональные стволовые клетки, клетки mES-D3): карнозиновая кислота, выделенная из розмарина и применяемая в составе некоторых лекарственных препаратов, но чаще в пищевых и косметических производствах, а также процианидин, полифенол, присутствующий во многих продуктах питания, включая виноград, яблоки и овощи, широко используемый в лекарствах, косметике и пищевых продуктах. Карнозиновая кислота проявляла более выраженное цитотоксическое действие на клетки mES, чем на клетки 3T3 (IC₅₀ 3T3, 26,28±3,861 мкг/мл; IC₅₀ ES, 5,771±1,297 мкг/мл), для ингибирования дифференцировки клеток в кардиомиоциты ID₅₀=6,143±0,575 мкг/мл. Клетки 3T3 были особенно чувствительны к цитотоксическому действию процианидина по сравнению с клетками mES (IC₅₀ 3T3, 12,1±1,828 мкг/мл; IC₅₀ ES, 145,139±21,121 мкг/мл) в анализе цитотоксичности. Анализ дифференцировки показал, что процианидин слабо ингибирует дифференцировку ES-клеток (ID50, 72,493±2,706 мкг/мл). В результате для карнозиновой кислоты показана слабая эмбриотоксичность, а процианидин является безопасным и неэмбриотоксичным в условиях проведенного эксперимента [21].

Отсутствие токсического влияния препарата на репродуктивную функцию крыс и эмбриотоксического и тератогенного действия, показанные для суммы полифенолов из Сумаха голого, Rhus glabra, в наших исследованиях, было показано ранее в работе по изучению эмбриотоксичности экстракта Rhus coriaria L. В этом исследовании оплодотворенные эмбрионы рыбок данио подвергались воздействию экстракта в концентрации 9,37 мкг/мл в течение 96 ч: не было выявлено видимых токсических эффектов на развитие эмбрионов; смертность составила 5% (одна личинка) за весь период испытаний. Через 48 часов после оплодотворения вылупившиеся личинки составляли 95% [17].

Российские ученые в ходе исследования влияния полифенольного экстракта черники на репродуктивную (генеративную) функцию самок крыс при курсовом внутрижелудочном введении также показали отсутствие репродуктивной токсичности, эмбриотоксичности у полифенолов черники [10].

Заключение. Препарат Glabtan в исследованных дозах 50; 100 мг/кг не обладает эмбриотоксическими, тератогенными свойствами и не оказывает негативного влияния на репродуктивную функцию белых беспородных крыс.

Cписок литературы:

1. Величко В. И., Саид Е.В., Ткачук В.В., Карпинская Т.Л., Барсегян А. А. Применение полифенолов винограда в комплексной терапии пациентов с сахарным диабетом 2 типа на фоне избыточной массы тела/ // Інтегративна Антропологія.  – 2015. – №. 1. (25). – С. 55-57.
2. Дыбан А.П. и др. Методические указания по изучению эмбриотоксического действия фармакологических веществ и влияние их на репродуктивную функцию //М.: МЗ СССР. – 1986. – С. 21.
3. Зиявитдинов Ж.Ф., Ощепкова Ю.И., Абдулладжанова Н.Г., Салихов Ш.И. Структура полифенолов листьев сумаха дубильного Rhus coriaria L //Химия растительного сырья. – 2020. – №. 1. – С. 133-140.
4. Коваленко Л.В., Белоцерковцева Л.Д., Каспарова А.Э., Мордовина И.И., Гуляев А.Е., Кавушевская Н.С., Синюкова Т.А. Оценка влияния полифенолов и флавоноидов растительного сырья на течение беременности и ее исходы //Вестник СурГУ. Медицина. – 2021. – №. 1. – С. 67-74. https://doi.org/10.1234/10.34822/2304-9448-2021-1-67-74
5. Патент РУз № IAP 06574 Средство, блокирующее протеазу 3СLрrо и РНК-полимеразу RdRp РНК вирусов//Салихов Ш.И.,  Aisa A., Shen J., Xu Y., Xu H., Xiao .,  Jiang Х., Zhang L., 3иявитдинов Ж.Ф.Ощепкова Ю.И., Мирзаахмедов Ш.Я., Абдулладжанова Н.Г., Бердиев Н.Ш.
6. Писарев Д. И. и др. Биологическая активность полифенолов растительного происхождения. Перспектива использования антоцианов в медицинской практике //Актуальные проблемы медицины. – 2012. – Т. 18. – №. 10 (129). – С. 17-24.
7. Рахимов Р.Н., Гайибов У.Г, Гайибова С.Н, Комилов. Дж. Эргашев Н.А, Асраров М.И, Арипов Т.Ф. Антирадикальная активность полифенольных соединений выделенных из растений семейства Euphorbia //Universum: химия и биология. – 2018. – №. 11 (53). – С. 15-19.
8. Рахимов Р.Н., Гайибов У.Г, Комилов Э.Дж, Эргашев Н.А, Абдуллажанова Н.Г. Арипов Т.Ф. Влияние полифенольного соединения пс-1 на проницаемость мембран митохондрий печени крыс. Доклады Академии Наук Республики Узбекистан. – 2018. – №. 1.  – С. -60-66.
9. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. //Под ред. Миронова А.Н.- М. – 2012. – С. 80-93.
10.  Шульгау З.Т., Коваленко Л.В., Белоцерковцева Л.Д., Сергазы Ш.Д., Толмачева О.В., Жуликеева А.М., Гуляев А.Е., Каспарова А.Э., Мордовина И.И., Белова Е.А., Синюкова Т.А., Логутенко А.В. Влияние экстракта черники на репродуктивную (генеративную) функцию самок крыс //Вестник СурГУ. Медицина. – 2021. – №. 3 (49). – С. 83-92.
11.  Chen C.C., Chan W.H. Injurious effects of curcumin on maturation of mouse oocytes, fertilization and fetal development via apoptosis //International journal of molecular sciences. – 2012. – Т. 13. – №. 4. – С. 4655-4672.
12.  Chen C.C., Hsieh M.S., Hsuuw Y.D., Huang F.J., Chan W.H. Hazardous effects of curcumin on mouse embryonic development through a mitochondria-dependent apoptotic signaling pathway //International Journal of Molecular Sciences. – 2010. – Т. 11. – №. 8. – С. 2839-2855.
13.  Ebrahimi A., Schluesener H. Natural polyphenols against neurodegenerative disorders: potentials and pitfalls //Ageing research reviews. – 2012. – Т. 11. – №. 2. – С. 329-345.
14.  Elagbar Z. A., Shakya A. K., Barhoumi L. M. and Al‐Jaber H. I. Phytochemical diversity and pharmacological properties of Rhus coriaria //Chemistry and Biodiversity. – 2020. – Т. 17. – №. 4. – С. e1900561.
15.  European Directive 2010/63/EU on the protection of animals used for scientific purposes. September 22, – 2010. Official Journal of the European Union, L 276/33 – L276/79.
16.  Finn-Sell S. L., Cottrell E. C., Greenwood S. L. et al. Pomegranate Juice Supplementation Alters Utero-Placental Vascular Function and Fetal Growth in the eNOS−/− Mouse Model of Fetal Growth Restriction //Frontiers in Physiology. – 2018. – С. 1145.
17.  Giovanna Lo Vecchio, Nicola Cicero, Vincenzo Nava, Antonio Macrм, Claudio Gervasi, Fabiano Capparucci, Marzia Sciortino, Giuseppe Avellone, Qada Benameur, Antonello Santini and Teresa Gervasi Chemical Characterization, Antibacterial Activity, and Embryo Acute Toxicity of Rhus coriaria L. Genotype from Sicily (Italy) //Foods. – 2022. – Т. 11. – №. 4. – С. 538.
18.  Huang F.J., Lan K.C., Kang H.Y., Liu Y.C., Hsuuw Y.D., Chan W.H., Huang K.E. Effect of curcumin on in vitro early post-implantation stages of mouse embryo development //European Journal of Obstetrics and Gynecology and Reproductive Biology. – 2013. – Т. 166. – №. 1. – С. 47-51.
19.  Khoshkharam M., Shahrajabian M. H., Singh R. B., Sun W., Magadlela A., Khatibi M. and Cheng Q. Sumac: a functional food and herbal remedy in traditional herbal medicine in the Asia //Functional Foods and Nutraceuticals in Metabolic and Non-Communicable Diseases. – Academic Press, 2022. – С. 261-266.
20.  Kyselova Z. Toxicological aspects of the use of phenolic compounds in disease prevention //Interdisciplinary Toxicology. – 2011. – Т. 4. – №. 4. – С. 173-183. doi:10.2478/v10102-011-0027-5. Liu H., Ren C., Liu W., Jiang X., Wang L., Zhu B., Jia W., Lin J., Tan J., Liu X. Embryotoxicity estimation of commonly used compounds with embryonic stem cell test //Molecular medicine reports. – 2017. – Т. 16. – №. 1. – С. 263-271.
21.  Liu H., Ren C., Liu W., Jiang X., Wang L., Zhu B., Jia W., Lin J., Tan J., Liu X. Embryotoxicity estimation of commonly used compounds with embryonic stem cell test //Molecular medicine reports. – 2017. – Т. 16. – №. 1. – С. 263-271.
22.  Matata D. Z., Moshi M. J., Machumi F., Ngassapa O. D., Swanepoel B., Oosthuizen K. and van de Venter M. Isolation of a new cytotoxic compound, 3-((Z)-heptadec-14-enyl) benzene-1-ol from Rhus natalensis root extract //Phytochemistry Letters. – 2020. – Т. 36. – С. 120-126.
23.  Phytochemical evaluation, embryotoxicity, and teratogenic effects of Curcuma longa extract on zebrafish (Danio rerio) //Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. – 2019. – Т. 2019.
24.  Rakhimov R.N, Abdulladzhanova N.G., Kamaev F.G. Phenolic compounds from Euphorbia franchetii (В.Fedtsch) and Euphorbia сanescens L// Chemistry of Natural Compounds – 2011. – №. 2. – V. 47. – P. 286-287.
25.  Rakhimov R.N., Qodirova Sh.O, Abdulladjanova N.G, Ziyayev D.A, Komilov Q.O, Elmurodov B, Shamuratov B.A, Ziyavitdinov J.F. Elucidation of structures of new ellagitannins from plants of euphorbiaceous //Journal of Critical Reviews. – 2020. – Т. 7. – №. 3. – С. 431-437. DOI:// dx.doi,org/jcr.07.03.81.
26.  Rakhimov R.N., Кhoshimov N, Akhmedova G.B, Azizov V.G Investigation of the effect of polyphenol euphorbin on the transport of L Glutamate and calcium channels to synaptosomes of rat brain //European Journal of Medicine. – 2018. – №. 6. – С. 72-82.
27.  Saquib Q., Ahmed S., Ahmad M. S., Al-Rehaily A. J., Siddiqui M. A., Faisal M. and Al-Khedhairy A. A. Anticancer efficacies of persicogenin and homoeriodictyol isolated from Rhus retinorrhoea //Process Biochemistry. – 2020. – Т. 95. – С. 186-196.
28.  Sylvia A. Opiyo, Peter W. Njoroge, Ephantus G. Ndirangu, Kennedy M. Kuria, A Review of Biological Activities and Phytochemistry of Rhus Species, American Journal of Chemistry, Vol. 11 No. 2, 2021, pp. 28-36. doi: 10.5923/j.chemistry.20211102.02.
29.  Tohma H., Altay A., Köksal E., Gören A. C., Gülçin İ. Measurement of anticancer, antidiabetic and anticholinergic properties of sumac (Rhus coriaria): analysis of its phenolic compounds by LC–MS/MS //Journal of Food Measurement and Characterization. – 2019. – Т. 13. – №. 2. – С. 1607-1619.
30.  Veeren, B., Ghaddar, B., Bringart, M., Khazaal, S., Gonthier, M. P., Meilhac, O., Diotel . N., Bascands, J. L. Phenolic profile of herbal infusion and polyphenol-rich extract from leaves of the medicinal plant antirhea borbonica: toxicity assay determination in zebrafish embryos and larvae //Molecules. – 2020. – Т. 25. – №. 19. – С. 4482.
31.  Vuolo M. M., Lima V. S., Junior M. R. M. Phenolic compounds: Structure, classification, and antioxidant power //Bioactive compounds. – Woodhead Publishing, 2019. – С. 33-50.