ИЗУЧЕНИЕ ИНГИБИРОВАНИЯ СЕРДЕЧНЫМИ ГЛИКОЗИДАМИ СТРОФАНТИДИНОВОГО РЯДА ФЕРМЕНТА Nа,K-AТФАЗЫ И ИХ ПОЛОЖИТЕЛЬНО–ИНОТРОПНОЕ ДЕЙСТВИЕ

INHIBITION OF Na,K-ATPASE BY CARDIAC GLYCOSIDES OF THE STROPHANTHIDINE SERIES AND THEIR POSITIVE INOTROPIC EFFECTS
Цитировать:
ИЗУЧЕНИЕ ИНГИБИРОВАНИЯ СЕРДЕЧНЫМИ ГЛИКОЗИДАМИ СТРОФАНТИДИНОВОГО РЯДА ФЕРМЕНТА Nа,K-AТФАЗЫ И ИХ ПОЛОЖИТЕЛЬНО–ИНОТРОПНОЕ ДЕЙСТВИЕ // Universum: химия и биология : электрон. научн. журн. Умарова Ф.Т. [и др.]. 2022. 5(95). URL: https://7universum.com/ru/nature/archive/item/13563 (дата обращения: 29.01.2023).
Прочитать статью:
DOI - 10.32743/UniChem.2022.95.5.13563

 

АННОТАЦИЯ

Проведён анализ влияния структурно различающихся сердечных гликозидов группы строфантидина на ферментативную активность Nа,K-AТРазы и их положительно–инотропного действия на папиллярную мышцу. Константы ингибирования рассчитывались методом математического моделирования динамических систем по методу Рунге-Кутта. Положительно–инотропный эффект изучался на папиллярных мышцах левого желудочка крыс. Обнаружена корреляция между структурой сердечных гликозидов, их ингибирующим эффектом и  изометрическим сокращением папиллярной мышцы.

ABSTRACT

Analysis of the influence of structurally differing heart glycosides of the group of stroopantidine on the enzymatic activity of Nа,K-AТРаse and their positive-inothropic effect on the papillary muscle is carried out. The inhibition constants were calculated by the method of mathematical modeling of dynamic systems according to the runge-kutta method. A positive-inotropic effect was studied on the papillary muscles of the left-handed roof of rats. A correlation was detected between the structure of heart glycosides, their inhibiting effect and isometric contraction of the papillary muscle.

 

Ключевые слова: ингибиторы ферментов, структура фермента, структура белка, ингибирование сердечного гликозида, кардиотонические стероиды, взаимосвязь структура-активность, положительный инотропный эффект.

Keywords: enzyme inhibitors, enzyme structure, protein structure, cardiac glycoside inhibition, cardiotonic steroids, structure-activity relationship, positive-inothropic effect.

 

Nа,K-AТФаза  представляет  ферментную систему, осуществляющая противоградиентный перенос ионов натрия и калия  через клеточную мембрану за счет энергии гидролиза АТФ. Фермент входит в состав наружных мембран  всех животных  клеток и обеспечивает поддержание ионного гомеостаза клетки. Na,K-АТФаза  состоит  из двух пептидных цепей: каталитической a-субъединицы, куда входят ионные центры, ингибиторный участок, центры связывания и гидролиза субстрата, и гликопротеина β-субъединицы [1, 2]. Оба полипептида образуют компактную глобулу, насквозь пронизывающую мембрану [3].

Специфическими ингибиторами Na,K-АТФазы являются сердечные гликозиды, связывающиеся в рецепторном участке фермента. Этот класс растительных соединений относится к кардиотоническим препаратам, с давних времен используемых для борьбы с сердечной недостаточностью. Различают сердечные гликозиды дигиталисного и строфантидинового ряда. Молекулы сердечных гликозидов состоят из генинов (агликонов) и гликонов. Агликоны имеют стероидную цикло - пенитанперигидрофенантреновую структуру, у которых в положении С 17 имеется ненасыщенное лактонное кольцо. В зависимости структуры лактонного кольца генины сердечных гликозидов подразделяют на карденолиды (с пятичленным ненасыщенным кольцом) и буфадиенолиды (с шестичленным дважды ненасыщенным кольцом).  Под гликонами подразумевают остатки циклических сахаров, связанные через кислородный мостик с агликонами в положении С-3 и от этой части зависит сродство сердечных гликозидов к белкам плазмы и миокарда, всасывание и выведение из организма [4]. Na,K-АТФаза является аллостерическим ферментом и не конкурирует с субстратом за место связывания.

Сердечные гликозиды оказывают прямое избирательное действие на миокард и оказывают положительный инотропный эффект, вызывающий усиление сердечных сокращений, отрицательный хронотропный эффект, приводящий к урежению частоты сердцебиений,  отрицательный дромотропный эффект, связанный с уменьшением проводимости. Положительное инотропное действие сердечных гликозидов  проявляется в условиях сердечной недостаточности, когда удельный объем ограничен вследствие снижения сократимости миокарда.

Целью исследования было изучение процесса торможения сердечными гликозидами строфантидинового ряда высокоочищенного  препарата  Na,K-АТФазы (90 % чистоты по белку), полученного из медулы почек свиньи с оценкой инотропного эффекта на папиллярных мышцах крыс и установления корреляции между структурой изученных сердечных гликозидов,  их ингибирующим эффектом и положительно- инотропным действием препаратов.

Материалы и методы.

В работе использовали сердечные гликозиды,  любезно предоставленные Институтом химии растительных веществ АН РУз, а также ATP, EDTA («Reanal», Венгрия), трис («Serva», ФРГ), остальные реактивы отечественного производства квалификации х.ч. или ос.ч.

Выделение препарата Na,K-ATP-азы из мозгового слоя почек свиньи осуществляли по методу Йоргенсена [5] в градиенте плотности сахарозы с удельной активностью 25 мкмоль Фi, на 1 мг белка в мин. АТФ-азную активность определяли по высвобождению неорганического фосфата в среду инкубации, содержащую 130 мМ NaCl, 5 мМ КС1, 2 мМ MgCl, 1 мМ АТР, 1 мМ ЭДТА, 30 мМ трис, рН 7,5 в присутствии 0,1 мл сердечного гликозида (Na-K-АТФазная активность) и без него (общая АТФазная активность). Неорганический фосфат определяли по методу Дальсаля [6]. Содержание белка определяли по модифицированному методу Лоури [7].

К растениям, содержащим сердечные гликозиды, относятся разные виды наперстянки (Digitalis purpurea L., Digitalis Lanata Ehrh. и др.) - дигитоксин, дигоксин; Строфантин (Strophanthinum ) - сердечный гликозид, содержащийся в семенах некоторых многолетних тропических растений (лианах) кутровых (Аросупасеае), строфантин G (Strophanthus gratus) – уабаин, (Strophanthus Коmbe) – строфантин К.; ландыш (Соnvallaria majalis L, .)- конваллотоксин; разные виды желтушника (Еrysimum саnescens Roth., Еrуsimum cheiranthоides L.) - эризимин, эризимозид; джут длинноплодный (Соrсhоrus оlitоrius L.) - олиторизид, корхорозид.  

Сердечные гликозиды группы строфантидина были выделены из растений Средней Азии и частичного синтеза в Институте химии растительных веществ АН РУз. Исследуемые вещества растворяли в воде, а также этиловом спирте и вносили в образец в таком количестве, чтобы конечная концентрация спирта составляла не более 2-4 %.

Кинетические исследования проводились в предстационарном состоянии при [S]0 >> [E]0 , где [S]0 и [E]0 ‒ начальные концентрации субстрата и фермента при содержании белка в пробе 2 мкг/мл (1,3·10-8 М), концентрациях субстрата 1·10-4 - 1·10-3М, концентрации ингибитора 1·10-5 М. Эксперименты по ферментативной активности проводили для каждой концентрации АТР по накоплению фосфора неорганического как в присутствии ингибитора так и без него как было описано в работе [8].

Инотропный эффект сердечных гликозидов изучали на папиллярных мышцах левого желудочка крыс. Препарат сердечной мышцы помещали в термостатируемую перфузионную камеру из органического стекла с питательным раствором при температуре 300С. Стимуляцию папиллярных мышц проводили электрическим током с частотой 1 Гц, продолжительность импульса 1 мс. Амплитуду изометрического сокращения папиллярных мышц измеряли при концентрациях сердечных гликозидов 5∙10-7, 1∙10-7 и 5∙10-8 г/л, расчеты проводили в % к контролю.

Полученные результаты обрабатывали статистически с помощью программы “Origin 8.6”. Данные оценивали, используя параметрический t-критерий Cтьюдента, выражали в виде M±m. Достоверными считали результаты при р<0,05.

Результаты и обсуждение

В таблице 1 приведены структурные формулы строфантидина и его производных, их константы ингибирования, положительно- инотропные активности соединений.

Расчет констант ингибирования проводился методом математического моделирования динамических систем.

Ферментативную реакцию в случае одностороннего превращения субстрата можно выразить уравнениями (1) и (2):

где E – фермент; S – субстрат; ES – фермент- субстратный комплекс; P - продукт реакции; I – ингибитор, EI - фермент- ингибиторный комплекс; k+1 и k-1 –константы скорости реакций образования и расщепления фермент- субстратного комплекса; k+2 -константа скорости распада фермент-субстратного комплекса, k+3  и k-3 - константы скорости ассоциации и диссоциации фермент-ингибиторного комплекса.

Таблица 1.

Ингибирование строфантидином и его производными активности Nа,K-AТФазы и их положительно–инотропное действие на папиллярных мышцах

 

Наименование соединений

Структурная формула соединений

Кинг

мкМ/л

Положительно-инотропное действие (% к контролю)

5·10-7

г/мл

1·10-7

г/мл

5·10-8

г/мл

 

Общая формула

 

 

 

 

1

Строфантидин

1,22

20,5±

1,78

12,4±

1,31

6,3±

0,24

2

Строфантидин-3-ацетат

1,10

42,4±

2,02

17,6±

1,81

12,0±

0,93

3

Строфантидол

1,46

12,5±

0,97

-

-

4

Строфантидиновая кислота

26,7

-

-

-

5

17α-Окси-строфантидин-3-ацетат

3,91

-

-

-

6

17α-Псевдо-строфантидол

48,2

-

-

-

7

Корхорозид-А (строфантидин-3-бонвинозид)

1,33

72,4±

3,41

46,3±

2,73

36,2±

2,18

8

Эризимин (строфантидин-3-дигитоксозид)

1,24

62,5±

3,12

40,2±

2,42

20,4±

1,81

9

Строфантидин-5-рамнопиранозид-3-ацетат

1,98

25,4± 1,85

15,1±

1,77

7,5±

0,22

10

К-строфантин-β (строфантидин-3-стро-фантобиозид)

1,11

66,7±

2,54

39,8±

1,92

22,2±

1,66

11

Эризимозид (строфантидин-3-дигиланидобиозид)

1,31

70,1±

3,17

45,6±

2,47

32,7±

2,04

12

Строфантидин-3,5-бисрамнопиранозид

1,82

66,1±

2,77

44,8±

2,26

29,3±

1,95

 

Проведение ферментативной реакции методами предстационарной кинетики в условиях избытка субстрата, который много больше фермента S>> E приводит к линеарезации кривых, что значительно упрощает вычисление констант скоростей реакции [9, 10, 11]. Однако в предстационарном состоянии кинетику ферментативной реакции необходимо проводить в очень узком временном диапазоне меньше 1 секунды, где требуются высокоточные спектрометры. В некоторых работах для определения констант использовались методы математического моделирования динамических систем в сочетании с методами компьютерной итерации (т. е. многократно повторяющийся численный метод) [12]. В нашей работе эксперименты по ферментативной кинетике проводились при S>>E и для вычисления кинетических параметров применялся метод математического моделирования динамической системы Рунге-Кутта. Константы ингибирования определяли по формуле Кi = k-3/k3 методом наименьших квадратов, отклонения составляли 0,003.

Механизм положительного инотропного действия сердечных гликозидов связывают с их способностью повышать содержание ионов кальция в кардиомиоцитах. Ингибирование Na,K-АТФ-азы мембраны кардиомиоцитов под действием сердечных гликозидов приводит к увеличению внутриклеточного содержания ионов натрия, который за счет трансмембранного обмена на внеклеточные ионы кальция, стимулирует его поступление в клетку и способствует высвобождению дополнительных количеств кальция из саркоплазматического ретикулума. Кальций взаимодействуя с тропониновым комплексом, устраняет его тормозящее влияние на сократительные белки миокарда, что приводит к большему образованию актомиозиновых связей и сильному сокращению сердечной мышцы [4].

В таблице 1 константы ингибирования сердечных гликозидов представлены в микромолях на литр, положительно- инотропное действие выражалось в % к контролю амплитуды изометрического сокращения папиллярных мышц при концентрациях сердечных гликозидов 5∙10-7 , 1∙10-7 и 5∙10-8 г/л. В исследованные сердечные гликозиды входили строфантидин (соед.1) и аналоги агликона (соед.2-6), моногликозиды строфантидина (соед.7-9), дигликозиды строфантидина (соед.10-12). Для агликонов характерно наличие цис-связи между кольцами A и B, C и D, а также транс-связи между кольцами B и C. Конфигурационные изменения на С-17 атоме углеродного скелета приводят к сильной потере ингибирующей способности.

В структуре строфантидина характерным является наличие в молекуле альдегидной группы в положении С-10, метильной группы в положении С-13, гидроксильной группы в радикалах при С-3, при С-5 и в положении С-14. Из таблицы 1 видно, что строфантидин обладает сильным ингибирующим действием на Na,K-АТРазу (Кi =1,22 мкМ) и в этом он близок к наиболее известному кардиостероиду уабаину (Кi =1,04 мкМ). Строфантидин и оказывает умеренное положительно- инотропное действие, соответствующее ≈20, 12 % при концентрациях 5∙10-7, 1∙10-7 г/л. Ацетилирование 3-ОН группы строфантидина привело к высокому уровню торможения фермента (Кi =1,10 мкМ) и к увеличению положительно- инотропного действия в ≈ 42 - 12% при концентрациях 5∙10-7 -5∙10-8 г/л. Под действием строфантидола, имеющего спиртовую группу при R1 – радикале, ингибирование фермента уменьшилось в 1,2 раза и влияние на папиллярную мышцу свелось к минимуму, составив лишь ≈12 % при концентрации 5∙10-7 г/л. Однако введение кислотной группы в R1 - радикал агликона резко на 2 порядка снизило ингибирующую способность строфантидиновой кислоты (Кi =26,7 мкМ) и лишило ее положительно- инотропного действия. В ≈ 3 раза уступает своему агликону по эффекту торможения 17α –оксистрофантидин - 3-ацетат, имеющий дополнительную гидроксильную группу при С-15 и ацетатную при С-3 радикале, также не влияющий на папиллярную мышцу. Практически не тормозит ферментативную активность псевдострофантидол (Кi =48,2 мкМ) с нарушенной структурной целостностью стероидного ядра агликона и не оказывает положительно- инотропного действия.

Среди гликонов высокое ингибирующее действие проявляют моногликозиды строфантидина с сахарным компонентом, присоединенным через С-3-ОН группу молекулы агликона. Молекула корхорозида-А, с введенным С-3-бонвинозидом тормозит ферментативную активность с Кi =1,33 мкМ и оказывает сильное положительно- инотропное действие в ≈ 72 - 36% при концентрациях 5∙10-7 -5∙10-8 г/л. Эризимин с С-3-дигитоксозидом подавляет ферментативную активность (Кi =1,24 мкМ) сродни строфантидину, но превышает его по положительно-инотропному эффекту в ≈62 - 20% при концентрациях 5∙10-7 -5∙10-8 г/л. Введение в ацетат строфантидина углеводного остатка в С-5-ОН группу, что видно на молекуле строфантидин-5-рамнопиранозид-3-ацетата, приводит к уменьшению эффекта торможения фермента в ≈1.6 раза (Кi =1,98 мкМ) и снижению изометрического сокращения мышцы в ≈ 25 – 7,5% при вышеназванных концентрациях.

Дигликозиды строфантидина, имеющие два углеводных производных – биозидов, введенных в молекулу через С-3 –ОН радикал, отличаются сильным эффектом торможения ферментативной активности и высоким влиянием на сердечную мышцу. К-строфантин - ß (строфантидин-3-строфантобиозид) ингибирует Na,K-АТРазу с Кi =1,11 мкМ , и оказывает сильное положительно- инотропное действие, составляющему ≈ 66 -22% при концентрациях 5∙10-7 -5∙10-8 г/л. Не отстает от него и эризимозид (строфантидин-3-дигиланидобиозид) ингибирующий ферментативную активность с Кi =1,31 мкМ и проявляющий положительно- инотропный эффект, равный ≈70 -32% при тех же концентрациях. Но введение двух сахарных компонентов через С-5 и С-3 группы в молекулу строфантидин-3,5-бисрамнопиранозида сразу снизило процесс торможения примерно в 1,5 раза, сохранив при этом положительно- инотропное действие в ≈66 -12% при аналогичных концентрациях.

Анализ влияния большого числа структурно различающихся сердечных гликозидов строфантидинового ряда на ферментативную активность Na,K-АТРазы позволил выявить взаимосвязь между структурой изученных соеди-нений и их ингибирующим действием. Также установлена взаимосвязь между процессом торможения производными строфантидина ферментативной активности и их положительно- инотропным действием на сердечную мышцу.

Изучение генинов строфантидина показало, что для связывания с рецепторным участком Na,K-АТРазы весьма важным является структурная целостность стероидного ядра агликона и наличие при С-17 ненасыщенного лактонового кольца. Так замена в строфантидине альдегидной группы в положении С-10 на спиртовую и особенно кислотную группировки, введение дополнительной ОН-группы в С-17 положение (соед. 3-6) снижало, а сильные изменения в структуре псевдострофантидола лишало ее ингибирующей способности. Не оказывали эти соединения и положительно- инотропного действия. Для активации агликона предполагается наличие внутримолекулярного Н – мостика между ОН группой С-14 положения и кислородом при С-22, который обеспечивает подходящую конформацию лактонового кольца. Однако в молекуле 17α –оксистрофантидин - 3-ацетата и особенно псевдострофантидола не наблюдалось должной конформации лактонового кольца.  

У моногликозидов и дигликозидов строфантидина  наибольшим торможением ферментативной активности и высоким положительно- инотропным эффектом отличались соединения с введенными через С-3-ОН группу углеводными компонентами (соед. 6,7,11,12). Наличие одной и двух сахарных компонент в молекуле сердечного гликозида, связанных с R3 – радикалом весьма важно для стабилизации фермент- ингибиторного комплекса как за счет водородных связей в сахарном остатке, так и благодаря полярным группировкам углеводной компоненты, увеличивающих степень растворимости кардиостероидов. Присоединение сахарного компонента через С-5-ОН группировку вызвало снижение процесса торможения ферментативной активности гликонов. Таким образом для активации сердечных гликозидов весьма важным является не только обеспечение при С-17 ненасыщенного лактонового кольца, но и наличие гидроксильных групп при С-3, С-5 и С-14 положениях.

Основным показанием положительно-инотропного действия сердечных гликозидов  является сердечная недостаточность, обусловленная перегрузками сердца (артериальная гипертензия, клапанные пороки сердца, атеросклеротический кардиосклероз). При сердечной недостаточности сердечные гликозиды увеличивают ударный и минутный объем, снижают венозное давление и объем циркулирующей крови, улучшают кровоснабжение миокарда. Увеличение силы сердечных сокращений под влиянием кардиостероидов при сердечной недостаточности не сопровождается повышением потребления кислорода миокардом, поскольку уменьшение объема сердца и развиваемого им напряжения переводят его на энергетически более выгодный уровень работы.

Гликозиды группы строфантидина являются полярными, мало растворимы в липидах, практически не проникают в соединительную ткань, быстро оказывают действие, быстро выводятся из организма, не обладают кумулятивными свойствами [13]. В проведенной нами работе прослеживается корреляция между ингибирующим действием сердечных гликозидов и их положительно- инотропного действием на сердечную мышцу. Эти данные согласуются с работой [14] по влиянию производных уабаина и дигоксина на сократимость миоцитов желудочков кошки, где была обнаружена большая положительно-инотропная вариабельность между соединениями как с сильным так и слабым действием препаратов в зависимости от структуры. причем некоторые давали полные инотропные эффекты до наступления автоматизма, в то время как другие оказывали минимальную инотропию даже при больших концентрациях, вызывающих токсичность. Несмотря на то, что в ряде работ выдвигаются альтернативные механизмы инотропии, индуцированные гликозидами как активация каналов высвобождения кальция через рецепторы рианодина, в режиме скольжения, через пути передачи сигналов они не выдерживают проверок и как было показано с использованием уабаина, дигоксина и ацетилстрофантидина [15] не находят практических подтверждений изменять переходные процессы Ca2+ в инотропных процессах. Хотя в рамках в рамках современной терапии сердечной недостаточности используется также введение β-блокаторов, это не смогло отодвинуть на второй план применение сердечных гликозидов, которые успешно применяются в клинической практике в лечении сердечной патологии [16]. Применение сердечных гликозидов при начальной или скрытой сердечной недостаточности является не только терапевтическим, но и профилактическим мероприятием, с помощью которого можно выправить имеющиеся функциональные нарушения и предотвратить развитие явной недостаточности сердца.

Таким образом проведенные нами исследования по взаимодействию сердечных гликозидов строфантидинового ряда с Nа,К-АТФазой, определение кинетических параметров фермента, вносят существенный вклад в понимание природы процессов регуляции фермента специфическими ингибиторами. Совместное изучение активности cердечных гликозидов на молекулярном уровне на транспортном ферменте и положительно инотропном действии на сердечной мышце оказывает неоценимый вклад для поиска перспективных кардиотонических препаратов в качестве высоко-эффективных лекарственных препаратов целенаправленного действия.

 

Список литературы:

  1. Jorgensen P.L., Pedersen P.A. Structure-function relationships of Na, K , ATP, or Mg binding and energy transduction in Na,K-ATPase // Biochim. et biophys. Acta. 2001. Vol.1505.№1. Р.57-74.
  2. Laursen M., Yatime L., Nissen P., Fedosova N. Crystal structure of the high-affinity Na+,K+-ATPase – ouabain complex with Mg2+ bound in the cation binding site //| PROC. NATL. ACAD. SCI. 2013. Vol.110. №27. Р. 10958–10963.
  3. Clausen M.V., Hilbers F., Poulsen H. The Structure and Function of the Na,K-ATPase Isoforms in Health and Disease // Frontiers in Physiology. 2017. Vol.8, № 371. Р.1-16.
  4. Cornelius F., Kanai R., Toyoshima C. A Structural View on the Functional Importance of the Sugar Moiety and Steroid Hydroxyls of Cardiotonic Steroids in Binding to Na,K-ATPase // J. Biological Chemistry. 2013. Vol.288. Р. 6602-6616.
  5. Jorgensen P.L. Purification and characterization of (Na+,K+)-ATPase. III. Purification from the outer medulla of mammalian kidney after selective removal of membrane components by sodium dodecylsulphate // Biochim. et biophys. acta. 1974. V. 356. № 1. P. 36—52.
  6. Panusz H.T., Graczyk G., Wilmanska D., Skarzynski J. Analysis of Orthophosphate-Pyrophosphate Mixtures Resulting from Weak Pyrophosphatase Activities // Anal. Biochem. 1970. V. 35. P. 494—504.
  7. Hartree Е.F. Determination of protein. A modification of the Loury method has a lines Photometric response // Anal. Biochem. 1972. V. 48. № 2. P. 422—427.
  8. Umarova F.T., Khushbactova Z.A., Batirov E.H. and Mekler V.M. Inhibition of (Na+,K+)-ATPase by Flavonoids and Their Inotropic Effect. Investigation of the Structure-Activity Relationship // Membr. Cell Biol. 1998. Vol.12. № 1. PP. 27-40.
  9. Березин И.В., Варфоломеев С.Д. Биокинетика // Москва. 1979. «Наука», 312 с.
  10. Clarke R.J., Apell H.J., Kong B.Y. Allosteric Effect of ATP on Na+,K+-ATPase Conformational Kinetics // Biochemistry. 2007. Vol. 46, PP. 7034-7044.
  11. Kane D.J., Fendler K., Grell E., Bamberg E., Taniguchi K., Froehlich J.P., Clarke, R.J. Stopped-flow kinetic investigations of conformational changes of pig kidney Na+,K+-ATPase // Biochemistry. 1997. Vol.36. PP.13406-13420.
  12. Garcia A., Rasmussen H.H., Apell H.J., Clarke J. Kinetic Comparisons of Heart and Kidney Na+,K +-ATPases // Biophysical Journal. 2012. Vol.103. Р. 677–688.
  13. Харкевич Д.А. Фармакология. М.:Изд. группа «ГЭОТАР-Медиа», 2012.750 c.
  14. Ruch S.T., Nishio M., Wasserstrom A.J. Effect of Cardiac Glycosides on Action Potential Characteristics and Contractility in Cat Ventricular Myocytes: Role of Calcium Overload // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 2003. Vol. 307. № 1. PP. 419-428.
  15. Altamirano J., Li X., DeSantiago J., Piacentino V., Houser S.R., Donald M.B. The inotropic effect of cardioactive glycosides in ventricular myocytes requires Na+–Ca2+ exchanger function // J Physiol. 2006. Vol. 575. № 3. PP. 845–854. 
  16. Konstantinou D.M., Karvounis H., Giannakoulas G. Digoxin in Heart Failure with a Reduced Ejection Fraction: A Risk Factor or a Risk Marker? // Cardiology. 2016. Vol. 134. №3. PP. 11–319.
Информация об авторах

мл. науч. сотр., Институт биофизики и биохимии при НУУз, Узбекистан, г. Ташкент

Junior Researcher, Institute of Biophysics and biochemistry, National University of Uzbekistan, Uzbekistan, Tashkent

преподаватель, Национальный Университет Узбекистана, Узбекистан, г. Ташкент

Lecturer, National University of Uzbekistan, Uzbekistan, Tashkent

преподаватель, Национальный Университет Узбекистана, Узбекистан, г. Ташкент

Lecturer, National University of Uzbekistan, Uzbekistan, Tashkent

доцент, Национальный Университет Узбекистана,  Узбекистан, г. Ташкент

Assistant professor, National University of Uzbekistan, Uzbekistan, Tashkent

ст. науч. сотр., Институт химии растительных веществ АН РУз, Узбекистан, г. Ташкент

Senior researcher, Institute of Chemistry of Plant Substances, Uzbek Academy of Sciences, Uzbekistan, Tashkent

PhD, ст. науч. сотр., лаборатория растительных цитопротекторов, Институт биоорганической химии АН РУз, Узбекистан, г. Ташкент

 

PhD, Senior Research Scientist, Laboratory of Plant Cytoprotectors, Institute of Bioorganic Chemistry of the Academy of Sciences of the Republic of Uzbekistan, Tashkent, Uzbekistan

 

Журнал зарегистрирован Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор), регистрационный номер ЭЛ №ФС77-55878 от 17.06.2013
Учредитель журнала - ООО «МЦНО»
Главный редактор - Ларионов Максим Викторович.
Top