Применение метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для количественного определения парацетамола в некоторых лекарственных препаратах

АННОТАЦИЯ

В работе приведена методика количественного определения парацетамола в различных лекарственных средствах с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Показана возможность количественного определения лекарственных препаратов, содержащих кроме витамина С ещё и другие компоненты. Проведены математические расчеты полученных результатов методами математической статистики.

ABSTRACT

The paper presents a method for quantitative determination of paracetamol in various medicinal products using high-performance liquid chromatography (HPLC). Shows the possibility of quantitative determination of pharmaceutical preparations containing vitamin C in addition to other components. Mathematical calculations of the results obtained by methods of mathematical statistics are carried out.

Ключевые слова: парацетамол, высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), количественное определение, лекарственные препараты.

Keywords: paracetamol, high-performance liquid chromatography (HPLC), quantitative determination, drugs.

Введение

С ростом спроса на комбинированные анальгетико-жаропонижающие и противовоспалительные препараты, в то время, когда пандемия короновируса становится все более распространенной в мире, разработка конкретных методов определения парацетамола в этих препаратах остается одной из актуальных задач химического анализа и фармации в целом [1,2]. В настоящее время среди препаратов, содержащих парацетамол, наиболее распространены: "ТайлолХот", "Цефекон Д", "Грипхот", "Анвимакс" и другие [3-5].

В составе этих препаратов болеутоляющее и жаропонижающее действие оказывает парацетамол, который становится актуальным и востребованным. При определении состава различных лекарственных средств с учетом  воздействия влаги и света на гидролиз и окисление первоочередным ставится вопрос их воздействия на организм человека [6].

Поэтому целью данного исследования является разработка чувствительной и точной методики количественного определения парацетамола из смеси многокомпонентных лекарственных препаратов и витаминов с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым (УФ) детектированием.

Материалы и методы. Исследования проводили на микроколоночном жидкостном хроматографе "Shimadzu - 10A HPLC System SCL-10A Vp Controller" с УФ-спектрофотометрическим детектором (Япония). В работе была использована хроматографическая колонка Synergi Hydra 250х2 мм 4 мкм, скорость потока 0,31 мл/мин, состав подвижной фазы 0,8 мл фосфорной кислоты в воде, ацетонитрил. Градиент 0- 5 мин 1-35% фазы Б (ацетонитрил), 5-9,0 мин 35% фазы Б (ацетонитрил), 9 – 9,2 мин 35-1% фазы Б (ацетонитрил), 9,2 – 18 мин 1% фазы Б (ацетонитрил). Объем анализируемой пробы 20 мкл, температура комнатная 25 °С.

Для количественного анализа из множества комбинированных анальгетико-жаропонижающих лекарственных средств, содержащих парацетамол, нами был выбран: "АнвиМакс" – таблетки, содержащие парацетамола 0,36 г, аскорбиновой кислоты 0,3 г, глюконата кальция моногидрата  0,1 г,  римантадина гидрохлорида 0,05 г, рутозида тригидрата 0,02 г, лоратадина 0,003 г. Из состава данного препарата  видно, что помимо основного компонента парацетамола и добавок содержится также и аскорбиновая кислота, как антиоксидант. В связи с этим нами было изучено влияние этих компонентов на параметры снятия хроматограммы.

Определение содержания парацетомола в препарате проводили по отношению площадей пиков на хроматограммах стандарта (таблетки парацетомола) и препарата.

Методика

Методика проведения пробоподготовки. Точную навеску (200 мг) препарата растворяют в 50 мл воды с добавлением 50 мкл фосфорной кислоты, смесь выдерживают на ультразвуковой ванне в течение 20 мин при 30 °С. Далее колбу доводят до метки деионизированной водой. После чего с каждой колбы берут по 5 мкл раствора, вводят в колонку и анализируют при полном соблюдении указанных выше хроматографических условий. Дальнейшие расчеты по количественному определению парацетамола в лекарственных формах проводят по формуле:

где Х – количество парацетамола в граммах в таблетке, h_i – площадь пика парацетамола на хроматограмме испытуемого раствора лекарственного препарата, hст – площадь пика парацетамола на хроматограмме рабочих стандартных образцов, а_i– содержание парацетамола в навеске раствора стандартного образца (в граммах), а – содержание парацетамола в навеске порошка растертых таблеток (в граммах), b – средняя масса таблетка (в граммах) [6].

Статистическая обработка результатов исследования проведена с использованием компьютерной программы «LCMSsolution Main».

Результаты исследования и их обсуждение

Первоначально изучали хроматограмму чистого парацетамола, для этого брали таблетку парацетомола (540 мг) с содержанием парацетомола 500 мг перетирали в  ступке. Точную навеску (20 мг) порошка растворяли в 50 мл воды с добавлением 50 мкл фосфорной кислоты, смесь подвергали воздействию ультразвука в ультразвуковой ванне в течение 20 мин. При 30⁰С. Далее колбу доводили до метки деионизированной водой. Полученный результат представлен в рис. 1.

Рисунок 1. Хроматограмма парацетомола 200 мкг/мл

Из полученных результатов можно сделать вывод, что время удерживания парацетамола составляет 8.541 минут. Это, в свою очередь, позволяет определить  количестввенное содержание парацетамола в  составе сложной смеси лекарств.

При изучении влияния компонентов подвижный фазы на хроматографическое поведение парацетамола, аскорбиновой кислоты (рис.2) видно, что изменение процента ацетонитрила в элюенте не влияет на удержание парацетамола. Это объясняется полярностью молекул, которые слабо взаимодействуют с сорбентом и выходят из второй колонки после аскорбиновой кислоты.

Рисунок 2. Результат ВЭЖХ препарата АнвиМакс 2 мг/мл. Разделения компонентов лекарственной смеси: 1-витамин С, 2-парацетамол

Полученные результаты показали, что витамин С в препарате “АнвиМакс” выводится за 3.331 минуты, а парацетамол-за 8.524 минуты.

Также была проведена работа по определению количества витамина С из смеси витаминов (рис. 3.).

Рисунок 3. Хроматограмма смеси витаминов (витамин С 3.3 мин – 100 мкг/мл)

Полученные результаты показывают, что время выхода витамина С из смеси витаминов соответствует препарата “АнвиМакс”.

Результаты параллельных количественных определений парацетамола в лекарственной форме представлены в таблице.

Таблица 1.

Результаты определения содержания парацетамола и витамина С в составе препарата АнвиМакс

Таким образом, предложена методика количественного определения парацетамола в многокомпонентных лекарственных формах. Разработанная методика продемонстрировала высокую информативность. Она может быть использована в работе контрольно-аналитических лабораторий аптечных управлений при контроле качества лекарственных препаратов, содержащих парацетамол.

Список литературы:

1. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия: в 2 т. Пятигорск: Пятигорская гос. фарм. акад., 2003. Т. 2. 608 с.
2.  Рузметов У.У., Туракулов А.У., Сманова З.А. Кондуктометрическое определения парацетамола. Современное состояние и перспективы науки о функциональных полимерах. Ташкент-2020. -443 с.
3. Тимченко В.Н., Павлова Е.Б. Жаропонижающие препараты в лечении инфекционных заболеваний у детей. Лечащий врач. 2008. №9. С. 71-73.
4. Голубинцкий Г.Б., Будко Е.В. Количественное определение компонентов лекарственных препаратов жаропонижающего, анальгезирующего, противопростудного действия методом градиентной высокоэффективной жидкостной хроматографии. Химико-фармацевтический журнал. 2006. Т. 40. № 11. С. 52-56.
5. Пикуза О.И., Закирова А.М. Эффективность применения комбинированного жаропонижающего препарата в терапии острых респираторных заболеваний. Практика педиатра. 2016. №5. С. 44-48.
6. Мехтиханов С.Д., Шапиев Б.И., Гамзатова П.А. Применение метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для количественного определения парацетамола в комбинированных анальгетико-жаропонижающих лекарственных препаратах. Вестник ДГМА № 2 (11), 2014. C. 71-74.