Антибактериальная активность композитного препарата, содержащего олеиновую кислоту

 АННОТАЦИЯ

Определена антимикробная активность композитного препарата, содержащего олеиновую кислоту. Оценка антимикробной активности проводилась методом диффузии в агар с использованием следующих штаммов микроорганизмов: Staphylococcus aureus: Staphylococcus Epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus pyogenes, Escherichia Coli ЛП6, Escherichia Coli ЛН 7, Proteus, Pseudomonas, Klebsiella, Candida.

ABSTRACT

The antimicrobial activity of a composite preparation containing oleic acid was determined. Antimicrobial activity was assessed by diffusion into agar using the following strains of microorganisms: Staphylococcus aureus: Staphylococcus Epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus pyogenes, Escherichia Coli LP6, Escherichia Coli LN 7, Proteus, Pseudomonas, Klebsiella, Candida.

Ключевые слова: композитный препарат,олеиновая кислота, лецитин, антибактериальная активност

Keywords: composite preparation, oleic acid, lecithin, antibacterial activity.

Введение

В последние годывсе актуальнее становится изыскание и введение в медицинскую практику новых антибактериальных препаратов. Недостатком большинства из этих средств является снижение терапевтической эффективности в результате появления резистентных штаммов возбудителей, что диктует необходимость поиска новых средств, лишенных этих отрицательных свойств. В ходе поиска новых перспективных препаратов авторами синтезированы антимикробные пептиды и изучены по выявлению резистентности некоторых штаммов бактерий к антимикробным пептидам и антибиотикам в целом [1]. Известны длинноцепочечные ненасыщенные жирные кислоты, которые могут быть использованы в качестве потенциальных антибиотиков, особенно в отношении патогенных микроорганизмов, таких как Е.Coli, St.Аureus, микробактерии и Helico-bacterpylori [2]. Авторами был изучен многокомпонентный синтез между ароматическими альдегидами, производными анилина и β-кетоэфирами. Полученные соединения исследовались на проявление антимикробной активности по отношению к штаммам EscherichiaColi ATCC 6538-P и Staphylococcusaureus ATCC 25922 и были установлены их минимальные подавляющие концентрации.Определена высокая антимикробная активность йодсодержащего препарата в отношении как грамположительных, так и грамотрицательных микроорганизмов [4]. Установлена конечная концентрация препарата при которой сохраняется высокая противомикробная активность, которая составляет 1%.

При анализе литературных источников нами не обнаружены данные о антибактериальной активности композитных препаратов, содержащих олеиновую кислоту.В связи с этим, основной целью данной работы стало - определение антибактериальных свойств нового композитного препарата, содержащего олеиновую кислоту (ЛОКЭ).

Микробиологические исследования проводились в условии микробиологической лаборатории Ташкентского стоматологического института (г. Ташкент).

Экспериментальная часть

Получение антибактериального композитного препарата.13г фосфолипидного концентрата помещают в круглодонную колбу, снабженную обратным холодильником, термометром и мешалкой, добавляют 11г вазелиновогомасла и 10,3 г миндального масла, нагревают при 40 ^оС  в течение 3 часов до полного растворения концентрата. Полученный раствор охлаждают до 20 ^оС и вводят 2,1 г олеиновой кислоты, 0,7 мл дистиллированной воды и выдерживают при этой температуре в течение 2 часов. После этого в смесь добавляют 0,5 г жасмина и перемешивают на механической мешалке при комнатной температуре в течение 1ч. Реакционную смесь тщательно перемешивают до образования однородной массы.

Определение антимикробной активности осуществляли методом диффузии в агар по отношению к 10 тест-культурам. Метод основан на оценке угнетения роста тест-микроорганизмов определенными концентрациями испытуемого средства [5]. Чувствительность определяли в отношении следующих антибиотиков: нанохитозан и АБ Орлокс. Диаметры зон угнетения роста тест–микроорганизма при помощи соответствующих приборов измеряли с точностью до 0,1 мм.

Статистическая обработка данных. Измерения экспериментальных данных проводили в трех повторах и рассчитывали средние значения. Полученные данные были подвергнуты статистическому анализу. Статистическую обработку полученных результатов проводили при помощи программы Microsoft Excel. Достоверность отличий осуществляли по критерию Стьюдента. Величина уровня значимости р для критерия Стьюдента не превышал 0,05. 

Результаты и обсуждение

Синтез препарата и методика его получения, структура и физико-химические характеристики описаны ранее [6]. В данной работе изучена антибактериальная активность синтезированного ранее препаратав условиях invitro. Для определения антибактериальной активности использовали 10 штаммов микроорганизмов.

Полученные результаты по антибактериальной активности препарата на основе олеиновой кислоты, эфирного масло лецитина и жасмин(ЛОКЭ)представлены в таблице и рисунке. В качестве препаратов сравнения использованы нанохитозан и АБ Орлокс.

Таблица 1.

Изучение чувствительности микробов к композитному препарату ЛОКЭ в условиях invitro (M±m) мм.

Примечание: единицы приведены в мм зоны задержки роста микробов

Антибактериальную активность препарата оценивали по размеру (в мм) зоны задержки роста микробов.

Следует особо подчеркнуть, что препарат ЛОКЭ начиная с концентрации 0,5% оказал действие на 6 видов микробов, при этом более чувствительными оказались Str. pyogenes и грибы рода Candida. Препарат в концентрации 1,0% еще более усилило антибактериальную активность, так в этой концентрации она действует на 7 видов микробов. При этом, на 3 видах микробов она оказала выраженное действие. И наконец, препарат в концентрации 5,0% оказала действие на 7 видов микробов, при этом на 6 видов отмечено выраженное действие.

Рисунок 1. Результаты чувствительности микробов к препарату ЛОКЭ в 5% концентрации.

1-Staph. Aureus;2-Staph. Epidermidis; 3-St. saprofiticus; 4-Str. Pyogenes 5- Esch. ColiЛП6-Esch. ColiЛН 7-Proteus 8-Pseudomonas 9-Klebsiella 10-Candida

Сравнительное изучение чувствительности микробов к композитному препарату ЛОКЭ и стандартным препаратам показало, что препарат ЛОКЭ действует на многие микроорганизмы лучше, чем нанохитозани Орлокс.

На основании полученных микробиологических данных препарат ЛОКЭ можно рассматривать перспективным антибиотиком и можнорекомендовать для дальнейшего исследования с целью определения эффективности invivo.

Выводы

1. На основании проведенных микробиологических исследований по изучению антибактериальной активности композитного препарата ЛОКЭ установлено, что с увеличением его концентрации усиливается антибактериальное действие.
2. В отличие от аналогов исследуемый препарат проявляет заметную активность к 7 видам микробов, при этом на 6 видов отмечено выраженное действие.

Список литературы:

1. Х.Г. Мусин. Антимикробные пептиды — потенциальная замена традиционным антибиотикам //Russian Journal of Infection and Immunity - Infektsiya i immunitet, 2018.-Vol. 8. -№ 3.-Pp. 295–308.
2. Е.В. Гуляева, Е.В. Токмакова, Н.М.Мурашова, Е.В. Юртов Лецитиновые органогели на основе фосфолипидного концентрата "Мослецитин"/ Успехи в химии и химической технологии, 2007. –Т.XXI.–№8 (76).
3. Янкин А.Н., Носова Н.В., Гейн В.Л. Синтез и антимикробная активность функционализированных производных пиперидина//Вестник  пермской государственной фармацевтической академии, 2014. –№ 14. –С.109-111.
4. Шантыз А.Х., Мирошниченко П.В., Хайруллин Д.Д. Определение антибактериальной активности нового йодсодержащего препарата  //Ученые записки Казанской государственной академм ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана, 2014.–Т.220. –№4. –С. 231-234.
5. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: метод. указания МУК 4.2.1890–04// Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия, 2004. –Т. 6. –№ 4. -С. 306–359.
6. Matkarimova N.S., Maksumova O.S.Synthesis and study of antibacterial activity of licithin organogel with (oa) under invitro conditions. Scopus Journal of Critical Reviews., 2020. -Vol 7. -Issue 7. -Р. 58-63.