доц. кафедры медицинской биологии с основами генетики, ГОУ Таджикский государственный медицинский университет имени Абуали ибни Сино, Таджикистан, г. Душанбе
Гепатозащитные свойства густого экстракта клубней топинамбура «Интерес» (ГЭКТИ) и «Сарват» (ГЭКТС), культивируемых в республике Таджикистан при токсическом гепатите
АННОТАЦИЯ
Данная статья посвящена гепатопротекторным свойствам густого экстракта клубней топинамбура сортов «Интерес» и «Сарват», культивируемых на территории Южного Таджикистана. Токсический гепатит вызывали подкожным введением 50 %-ного масляного раствора СС14 в дозе 2 мл/кг массы 3 раза в неделю в течение одного месяца. Активность аланин- и аспартатаминотрансферазы, щелочной фосфатазы определяли при помощи тест-наборов фирмы «Витал-Диагностик» (Россия) на биохимическом анализаторе “Stat Fax 1904 Plus” (США). Определение концентрации общего холестерина, триглицеридов в плазме крови проводили при помощи биохимических методов с использованием тест-наборов фирмы «Витал-Диагностик» (Россия) на биохимическом анализаторе “Stat Fax 1904 Plus” (США). Оптическую плотность измеряли при 505 нм. Единицы измерения –Ммоль/л. Линейный диапазон измерения – до 25,8 Ммоль/л. Полученные данные свидетельствуют о том, что месячная интоксикация крыс гепатотоксином способствует повышению активности маркеров цитолитического синдрома, нарушению антиоксидантной, антитоксической функции и липидного обмена. Внутрижелудочное введение густого экстракта клубней топинамбура сортов «Интерес» (ГЕКТИ) и «Сарват» (ГЭКС) в дозах 0,35 и 0,5 г /кг массы в течение одного месяца (по сравнению с контрольными животными) улучшает биохимические показатели состава крови подопытных крыс, при этом достоверно (Р < 0,001) снижает активность маркеров цитолотического синдрома (АлТ, АсТ, ШФ). Кроме того, испытуемые средства, вводимые в указанных дозах в течение месяца, улучшают показатели концентрации липидов состава сыворотки крови по сравнению с контрольными сериями почти до уровня показателей интактных крыс.
Наряду с этим улучшают антиоксидантную, антитоксическую функцию печени и показатели билирубина, что по всей вероятности свидетельствует о гепатопротекторных свойствах испытуемых средств.
ABSTRACT
The article is devoted to hepatoprotective properties of dense extract of artichoke tuber varieties of “Interes” and “Sarwat”, cultivated in the South of Tajikistan. Toxic hepatitis is induced by subcutaneous intrusion of 50 % oil solution of CC14 in dose 2 ml / kg of body weight 3 times per week for one month. The activity of alanine and aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase is determined using test kits of the company “Vital Diagnostics” (Russia) on the biochemical analyzer “StatFax 1904 Plus” (USA). Concentration determination of total cholesterol, triglycerides in blood plasma is made using biochemical techniques with the use of test kits of the company “Vital Diagnostics” (Russia) on the biochemical analyzer “Stat Fax 1904 Plus” (USA). Optical dense is measured at 505 nm. Units of measurement – Mmol / l. Linear measuring range – up to 25.8 mmol / l. Obtained data indicates that the monthly intoxication of rats by hepatotoxin enhances the activity of cytolytic syndrome markers, breach of antioxidant, anti-toxic function and lipid metabolism. Intragastric intrusion of dense extract of artichoke of varieties “Interes” (GEKTI) and “Sarwat” (GEKS) at doses 0,35 and 0,5 g / kg for one month (as compared to controled animals) improves blood biochemical indexes of experimental rats, thus significantly (P <0.001) reduces the activity of cytolytic syndrome markers (AlT, AsT, ShF). Furthermore, tested means which are introduced at the indicated doses during a month, improve composition concentration indicators of serum lipid compared with the control series almost to the indicators level of intact rats.
Along with that antioxidant, antitoxic liver function and parameters of bilirubin are improved that likely indicate hepatoprotective properties of the test agents.
Актуальность. Неблагоприятная экологическая обстановка в связи с химизацией сельского хозяйства, непосредственным воздействием токсических веществ на организм человека, алкоголизм, наркомания, продолжающиеся рафинирования продуктов питания, потребление различных фастфудов, генномодифицированных продуктов, энергетических напитков, а также воздействие техногенных веществ – все это способствует изменению биохимических реакций в организме живых существ и является основным критерием развития различных патологических процессов, в том числе заболеваний печени и гепатобилиарной системы [1; 11; 10; 19].
Установлено, что печень является главным фильтром, обезвреживающим чужеродные токсические вещества, проникающие в организм человека посредством приема пищи, лекарственных препаратов и химических токсикантов [7; 9]. Согласно Жолобову И.С. и соавт. (2013), невозможно найти такое звено обмена веществ в организме, которое так или иначе не было бы связано с обменными процессами, протекающими в печени [9; 18].
По данным ВОЗ, в настоящее время в мире 2 млрд. человек живут с патологией печени, что более чем в 100 раз превышает распространенность ВИЧ-инфекции. Кроме того, от побочного воздействий лекарственных средств в мире ежегодно страдает 1 млн. человек. Установлено, что 180 тысяч случаев из-за негативного (токсического) воздействия лекарственных средств заканчиваются летальным исходом [6; 13].
В связи с этим с точки зрения лечения и профилактики заболеваний гепатобилиарной системы особый интерес представляют малотоксичные гепатопротекторы, получаемые на основе растительного сырья и эфирных масел и обладающие антиоксидантными свойствами [1; 2; 16; 17; 3; 14].
Согласно литературным источникам, топинамбур наряду с гипогликемическими, гиполипидемическими, антиоксидантными свойствами обладает определенными гепатозащитными и детоксицирующими свойствами [20; 12].
Целью настоящего исследования явилось изучение гепатозащитных свойств ГЭКТИ и ГЭКТС на фоне токсического гепатита.
Материал и методы. Исследование было проведено на 40 белых крысах обоего пола линии Wistar с исходной массой 190–220 г. Животные были распределены следующим образом: 1. Интактные; 2. Контрольные (ССl4-2 мл/кг) подкожно 3 раза в недели в течение одного месяца; 3–4. Животные, получавшие ГЕКТИ в дозах 0,35–0,5 г/кг на фоне ССl4; 5–6. Животные, получавшие ГЕКС в дозе 0,35–0,5 г/кг; 7. Крысы, получавшие карсил в дозе 0,2 г/кг по вышеуказанной схеме.
Животные находились в стандартных условиях содержания и кормления в виварии ЦНИЛ ТГМУ им. Абуали ибни Сино. в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приказ МЗ СССР № 1179 от 10.10.83) и правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и научных целей (Страсбург, 1986).
Токсический гепатит вызывали методом подкожного введения 50 %-ного масляца раствора СС14 в дозе 2 мл/кг массы 3 раза/нед. в течение одного месяца. Активность аланин- и аспартатаминотрансферазы, щелочной фосфатазы определяли при помощи тест-наборов фирмы «Витал-Диагностик» (Россия) на биохимическом анализаторе “Stat Fax 1904 Plus” (США). Определение концентрации общего холестерина, триглицеридов в плазме крови проводили при помощи биохимических методов с использованием тест-наборов фирмы «Витал-Диагностик» (Россия) на биохимическом анализаторе “Stat Fax 1904 Plus” (США). Оптическую плотность измеряли при 505 нм. Единицы измерения – Ммоль/л. Линейный диапазон измерения – до 25,8 Ммоль/л. Количество образующегося окрашенного продукта, измеряемое при 505 нм, прямо пропорционально концентрации триглицеридов в пробе. Линейный диапазон измерения – до 8 Ммоль/л.
Содержание билирубина в сыворотке крови определяли по биолатесту марки Bioscience. Антитоксическую функцию изучали по продолжительности гексеналового сна. Гексеналовый сон воспроизводили внутрибрюшинным введением препарата в дозе 40 мг/кг.
Статистическую обработку результатов проводили на персональном компьютере в операционной системе Windows XP с использованием приложения MS Office Excel. О достоверности различий судили по величине критерия Стьюдента-Фишера (Ойвин И.А., 1962; Лакин Г.Ф., 1990).
Результаты и их обсуждение. Согласно результатам исследования, представленным в табл. 1, СС14 вызывает повышение активности маркеров цитолитического синдрома АлАТ, АсАт и ШФ по сравнению с интактными животными на 89, 104, 123, 7 % соответственно, активность МДА повышается в 6 раз. Месячное введение ГЭКТИ и ГЭКТС в дозах 0,35 и 0,5 г/кг способствовало ослаблению гепатотоксического действия тетрахлорметана на выживаемость крыс, у получавших испытуемые средства в дозах 0,5 г/кг, что составило 85 %, а у контрольных животных – 50 %.
Таблица 1.
Влияние испытуемых средств на активность маркеров цитологического синдрома и МДА сыворотки крови крыс на фоне СС14. М±m (n = 7)
|
Серия опытов и дозы в г/кг |
Показатели в |
||||
|
АлТ-Ед/л |
АсТ-ед/л |
ШФ-ед/л |
МДА нмоль/мл |
||
|
Интактные |
75,0±3,24 |
62,6±2,12 |
284,6±9,5 2,5± 0,15 |
||
|
СС14-2 мл/кг 3 раза в неделю в течение одного месяца |
|||||
|
Контрольные |
142,8±6,6 Р <0,001 |
128,8 ±5,84 Р <0,001 |
636,7± 10,5 Р < 0,001 |
16,6±0,96 Р <0,001 |
|
|
ГЭКТИ-0,35 г/кг |
100,6 ±5,25 Р < 0,001 |
84,3±4,76 Р< 0,001 |
390,8± 7,4 Р <0,001 |
10,8±0,8 Р <0,001 |
|
|
ГЭКТИ-0,5 г/кг |
96,5 ±3,33 Р < 0,001 |
70,6±2,47 Р < 0,001 |
330,0± 5,2 Р <0,001 |
9,0±0,75 Р <0,001 |
|
|
ГЭКТС- 0,35 г/кг |
108,9± 6,63 Р <0,001 |
95,8±4,44 Р <0,001 |
380,5 ±6,65 Р <0,001 |
11,4±0,87 Р <0,001 |
|
|
ГЭКТС-0,5 г/кг |
98,8±4,06 Р < 0,001 |
89,5±3,34 Р <0,001 |
349,5±3,86 Р < 0,001 |
8,6±0,94 Р <0,001 |
|
|
Карсил 0,2 г/кг |
101, 5±5,05 Р < 0,001 |
84,9±0,56 Р <0,001 |
399,8±5,5 Р < 0,001 |
9,95±0,76 Р <0,001 |
|
Примечание: Значение Р для контрольных дана по сравнению с интактными, а для подопытных животных – по сравнению с контрольными сериями
Испытуемые средства стимулировали нормализацию биохимических показателей крови; показатели активности АлТ, АсТ и ЩФ в сериях, получавших ГЭКТИ в указанной дозе, по сравнению с СС14-индуцированными животными статистически значимо снизились на (35,4, 32,3 и 47 % соответственно), а показатель активности МДА в сыворотке крови – на 47,5 %. В сериях, получавших ГЭКТС, активность вышеуказанных ферментов снизилась на 30,8, 30,5, 41,5, 48,2 % соответственно.
При сравнительном анализе полученных результатов установлено, что испытуемые средства по эффективности не уступают препарату сравнения, обладающему гепатопротекторными свойствам – карсилу.
Как известно, при токсическом поражении печени наблюдается нарушение липидного обмена (общего холестерина, триглицеридов, фосфолипидов, а также билирубина и сахара крови [6; 2].
Согласно полученным результатам (рис. 1 и рис. 2), концентрация О холестерина и фосфолипидов в составе крови контрольных крыс по сравнению с интактными животными снизилась на 13 и 50 %, уровень триглицеридов, билирубина и сахара крови повышался на 38,3 %, 109, 12,7 % соответственно.
ОХС-Ммоль/л ТГ-Ммоль/л ФЛ-Г/л.
/Shakhsufbekova.files/image001.png)
Рисунок 1. Влияние ГЭКТИ и Сарват в дозах 0,35 и 0,5 г/кг на липидный обмен на фоне СС14. 1. Интактные. 2. Контрольные-СС14. 3–4. ГЭКТИ-0,35–0,5 г/кг. 5–6. ГЭКТС-0,35–0,5 г/кг. 7. Карсил 0,2 г/кг
Месячное введение ГЭКТИ и ГЭКТС в дозах 0,35 и 0,5 г/кг массы улучшало показатели липидов, билирубина и сахара крови.
У животных, которых лечили ГЭКТИ и ГЭКТС в дозе 0,35 и 0,5 г/кг массы в течение месяца, концентрация холестерина по сравнению с контрольными сериями почти возвращалась к показателям интактных крыс. Уровень триглицеридов в сериях, получавших испытуемые средства в дозе 0,5 г/кг массы, по сравнению с контрольными достоверно (Р < 0,001) снижалось. Таким образом, испытуемые средства по эффективности не уступают препарату сравнения карсилу.
Билирубин-Мкмоль/л Сахар крови-Ммоль/л.
/Shakhsufbekova.files/image002.png)
Рисунок 2. Влияние ГЭКТИ И ГЭКТС на уровень билирубина и сахара крови при токсическом гепатите. 1. Интактные. 2. Контрольные-СС14. 3–4. ГЭКТИ-0,35–0,5 г/кг. 5–6. ГЭКТС-0,35–0,5 г/кг. 7. Карсил 0,2 г/кг
Гепатозащитные свойства ГЭКТИ и ГЭКТС также проявились при изучении антитоксических функций печени (на модели гексеналового сна) на фоне СС14.
Гексеналовый сон в мин. (гексенал 40 мг/кг).
/Shakhsufbekova.files/image003.png)
Рисунок 3. Антиоксидантные свойства ГЭКТИ и ГЭКТС на фоне токсического гепатита. 1. Интактные. 2. Контрольные-СС14. 3–4. ГЭКТИ-0,35–0,5 г/кг. 5–6. ГЭКТС-0,35–0,5 г/кг. 7. Карсил 0,2 г/кг
Согласно полученным результатам (рис. 3), время продолжительности сна у контрольных крыс по сравнению с интактными животными удлинялось на 33,3 %. Продолжительность гексеналового сна под действием ГЭКТИ и ГЭКТС в указанных дозах по сравнению с контрольными сериями укорачивалось на 23,4 %, 25 %, 22,7 %, 27,5 % соответственно. Показатели препарата сравнения карсила были аналогичными с испытуемыми средствами.
Установлено, что биологически активные вещества состава клубней топинамбура оказывают положительное влияние на функциональную активность печени. В том числе, утилизируя глюкозу, они способствуют синтезу гликогена и тем самым обеспечивают высокий уровень энергетического обмена, что, по всей вероятности, стимулирует процессы синтеза белка, обмен холестерина и метаболизм желчных кислот, улучшая функцию гепатобилиарной системы [4]. Топинамбур сохраняет потенциальные возможности печени в борьбе с различными заболеваниями и токсическими факторами внешней среды [5; 15].
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что ГЭКТИ и ГЭКТС, полученные из культивируемых на территории Южного Таджикистана, обладают гепатозащитными свойствами, что, по всей вероятности, связано с биологически активными веществами состава клубней топинамбура, которые смягчают токсическое воздействие гепатотоксина на печеночные клетки и тем самым улучшают антитоксическую функцию и внутрипеченочные обменные процессы.
Список литературы:
References: