ВЛИЯНИЕ КОМПЛЕКСНОЙ МЕДИКАМЕНТОЗНОЙ ТЕРАПИИ НА ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ОСТРОМ ДЕСТРУКТИВНОМ ПАНКРЕАТИТЕ

АННОТАЦИЯ

Исследование оценивало влияние консервативной терапии на морфологические изменения при экспериментальном ОДП у крыс. Модель воспроизводили с помощью додецилсульфата натрия. Животных разделили на контрольную группу и группу лечения. Оценивали индексы кровообращения, некроза, воспаления и репарации через 24, 96 и 192 часа. Терапия достоверно снижала индекс кровообращения через 24 часа (p<0.05) и воспаления через 192 часа (p<0.01), но не влияла на некроз. К 96 часам отмечалось ускорение репарации (p<0.01), однако к 192 часам её интенсивность снижалась (p<0.05). Результаты демонстрируют ограниченную эффективность стандартного лечения при ОДП, что требует разработки новых подходов.

ABSTRACT

The study assessed the effect of conservative therapy on morphological changes in experimental ADP in rats. The model was reproduced using sodium dodecyl sulfate. Animals were divided into a control group and a treatment group. The indices of blood circulation, necrosis, inflammation and reparation were assessed after 24, 96 and 192 hours. The therapy significantly reduced the blood circulation index after 24 hours (p<0.05) and inflammation after 192 hours (p<0.01), but did not affect necrosis. By 96 hours, acceleration of reparation was noted (p<0.01), but by 192 hours its intensity decreased (p<0.05). The results demonstrate the limited effectiveness of standard treatment for ADP, which requires the development of new approaches.

Ключевые слова: острый деструктивный панкреатит, консервативная терапия, патоморфология, экспериментальная модель, крысы.

Keywords: acute destructive pancreatitis, conservative therapy, pathomorphology, experimental model, rats.

Введение. Острый деструктивный панкреатит (ОДП) представляет собой сложную клиническую проблему, успешное решение которой во многом зависит от двух фундаментальных аспектов: оперативной диагностики и своевременного начала патогенетически направленного лечения. Многочисленные клинические исследования подтверждают, что в подавляющем большинстве случаев острого панкреатита (примерно 85-90%) положительных результатов удается достичь благодаря применению комплексного консервативного подхода [1, 2].

Современные терапевтические стратегии при ОДП включают мультимодальное воздействие, сочетающее противовоспалительные препараты, объемную инфузионную поддержку, блокаторы желудочной секреции, прокинетические средства, антибактериальную терапию и ингибиторы протеолиза. Особую важность приобретает раннее начало интенсивной терапии, которая не только способствует снижению частоты инфекционно-септических осложнений, но и обеспечивает четкую демаркацию некротических очагов, предотвращает развитие полиорганной недостаточности и в конечном итоге приводит к значительному снижению показателей летальности [3-5].

Именно эти соображения послужили основанием для проведения настоящего экспериментального исследования, направленного на углубленное изучение эффективности различных вариантов консервативной терапии в условиях смоделированного ОДП.

Цель исследования — оценить влияние комплексной консервативной терапии на патоморфологические изменения поджелудочной железы и околопанкреатической клетчатки при ОДП предложенным способом.

Материалы и методы. Для выполнения эксперимента использованы 36 самок линии «Wistar», которые были распределены на 2 группы по 18 крыс: 1-я группа — моделирование ОДП с последующим динамическим наблюдением, 2-я группа — моделирование ОДП с проведением стандартной консервативной терапии в течение первых 3-х суток. Воспроизведение ОДП осуществлялось под общей анестезией путем выполнения лапаротомии и введения в ткань поджелудочной железы 0,3 мл 10% раствора ионного детергента додецилсульфата натрия. Выведение крыс из эксперимента производилось через 24, 96 и 192 часа (1, 4 и 8 суток соответственно). Далее осуществлялись забор всей ткани поджелудочной железы с околопанкреатической клетчаткой и выполнение патоморфологического исследования. Вся работа с животными проведена в соответствии с «Европейской Конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» (Страсбург, 1986), а также с соблюдением «Правил и норм гуманного обращения с биологическими объектами исследований» УО «Гродненский государственный медицинский университет». С целью анализа патогистологических данных нами предложена специальная таблица с оценкой по визуально-аналоговому принципу. Характерные для ОДП изменения были разделены на 4 категории с соответствующими показателями: расстройства кровообращения (отек, полнокровие, тромбозы, кровоизлияния), некрозы (жировые, тканевые в поджелудочной железе, секвестрация), воспаление (демаркационное в клетчатке, демаркационное в поджелудочной железе, гнойное в клетчатке, гнойное в поджелудочной железе), репарация (продуктивное воспаление и грануляционная ткань, фиброз, атрофия, липоматоз). Первые 3 категории относятся к повреждению поджелудочной железы, категория репарации характеризует восстановительные процессы в органе. С целью повышения объективизации морфологических изменений и их математической обработки с последующим статистическим анализом нами предложено рассчитывать индекс категории. Каждый из показателей оценивался в баллах от 0 до 4 согласно таблице. После оценки патогистологических изменений у животных баллы показателей отдельной крысы внутри категории суммировались. Средние значения сумм трактовались как индекс категории (индекс расстройств кровообращения (ИРК), индекс некрозов (ИН), индекс воспаления (ИВ) и индекс репарации (ИР) соответственно). Далее индексы категорий по отдельности сравнивались между исследуемыми группами крыс на контрольные сутки.

Результаты и обсуждение. Спустя 24 часа на патоморфологическом исследовании у крыс группы №1 наблюдалось наличие распространенных некрозов в поджелудочной железе и околопанкреатической клетчатке, незначительный интерстициальный отек и полнокровие сосудов, единичные тромбозы, умеренная лейкоцитарная инфильтрация, нарушение ацинарной структуры поджелудочной железы, что соответствует средней степени тяжести ОДП. Через 96 часов в данной группе отмечалось усиление сосудистых реакций (нарастание отека, полнокровия сосудов, увеличение количества тромбозов и кровоизлияний), нарастание гнойного демаркационного воспаления в клетчатке и поджелудочной железе, появление очагового продуктивного воспаления вокруг некрозов. К 8-м суткам уменьшались признаки расстройств кровообращения (отек, тромбозы, полнокровие, кровоизлияния), гнойное воспаление постепенно заменялось продуктивным и грануляционной тканью, нарастало количество участков фиброза, атрофии и мелких фокусов липоматоза, которые отграничивали имеющиеся зоны некроза в ткани поджелудочной железы и околопанкреатической клетчатки.

При выполнении микроскопического исследования в группе №2 спустя 24 часа также, как и в группе №1, определялись преимущественно распространенные некрозы поджелудочной железы с околопанкреатической клетчаткой, нарушение ацинарной структуры, умеренные сосудистые реакции и гнойное воспаление. Через 96 часов у животных сосудистые реакции начинали нарастать, сохранялось демаркационное гнойное воспаление вокруг зон некроза вплоть до секвестрации некротизированных фрагментов поджелудочной железы. По прошествии 192 часов во 2 группе был менее выражен воспалительный компонент, грануляционная ткань постепенно заменялась зонами фиброза, атрофии и липоматоза, однако восстановление шло менее интенсивно, чем в группе №1.

Исходя из описания гистологической картины, патоморфологические изменения в группе консервативного лечения №2 оказались сходны с таковыми в группе №1, при этом какое-либо положительное влияние в группе №2 отсутствовало.

Проведение сравнительного анализа индексов категорий между группой №1 и группой №2 выявило указанные в таблице 1 различия.

Таблица 1.

Сравнение индексов категорий у животных групп №1 и №2 в послеоперационном периоде на контрольные временные интервалы

Примечания: M – среднее арифметическое вариационного ряда, SD – стандартное отклонение; Статистики критерия Уэлча: t – статистика критерия, df – число степеней свободы, p – уровень статистической значимости; «Sh-W:» – W- статистики критерия Шапиро-Уилка в группах; N – абсолютное количество выживших животных; «—» – нормальность распределения выборки и уровень статистической значимости определить не представляется возможным.

Проведенные исследования показали, что у животных группы №2, которым проводилась стандартная консервативная терапия, относительно группы №1 спустя 24 часа достоверно снизился ИРК в 1,48 раза (p<0,05). В свою очередь ИН уменьшился незначительно – в 1,11 раза, а ИВ даже увеличился на 3,19%, при этом статистической значимости обнаружено не было (p>0,05). ИР на этом временном интервале сравнить не представилось возможным ввиду нулевых показателей в обеих группах (0±0). Вышеуказанная разница в индексах говорит о сходном развитии повреждения в поджелудочной железе и околопанкреатической клетчатке обеих групп животных при некотором снижении сосудистых реакций в группе №2.

По прошествии 96 часов снижение ИРК у крыс 2 группы оказалось не настолько значительным – в 1,04 раза. Аналогично предыдущему снизился и ИН – в 1,05 раза. В свою очередь ИВ уменьшился в 1,31 раза, однако все 3 категории повреждения не характеризовались статистической значимостью (p>0,05). Важно отметить повышение ИР в 2 раза, где при сравнении была определена статистическая достоверность — p<0,01. Таким образом, через 96 часов достоверного снижения процессов повреждения в группе стандартного лечения №2 не было выявлено, однако определялось значимое нарастание репарации в органе на данном временном интервале.

По истечении 192 часов ИРК в группе №2 оказался выше в 2,2 раза, а ИН снизился в 1,18 раза, при этом статистической значимости не было определено (p>0,05). В то же время, ИВ достоверно снизился в 1,66 раза (p<0,01), что говорит об ослаблении воспаления в группе №2. Однако в этой группе в отличие от предыдущего временного интервала ИР оказался статистически значимо ниже в 1,79 раза (p<0,05), и эта разница свидетельствует о менее интенсивном течении восстановительных процессов в поджелудочной железе после смоделированного ОДП. На основании этих изменений однозначно судить о тенденции репаративных процессов в группе №2 нельзя.

Заключение. На основании вышеизложенного, кроме снижения ИРК спустя 24 часа и ИВ через 192 часа статистически достоверных изменений у крыс группы №2 зафиксировано не было. Это говорит об отсутствии значимого влияния консервативной терапии на морфологические изменения поджелудочной железы и околопанкреатической клетчатки при развитии ОДП на анализируемый промежуток времени. Отсутствие данных изменений в исследуемых группах крыс объяснено более поздним разрешением некробиотических процессов, и, как следствие, медленным началом репаративных явлений.

Список литературы:

1. Randomized controlled trial on sterile fluid collections management in acute pancreatitis: should they be removed? / E. Zerem, G. Imamovic, S. Omerović, B. Imširović // Surgical endoscopy. – 2009. – Vol. 23, № 12. – Р. 2770–2777.
2. Zerem, E. Treatment of severe acute pancreatitis and its complications / E. Zerem // World Journal of Gastroenterology. – 2014. – Vol. 20, № 38. – Р. 13879-13892.
3. Стяжкина, С. Н. Современные методы диагностики острого панкреатита / С. Н. Стяжкина, А. И. Галяутдинова, Д. Р. Маннанова // Modern Science. – 2020. – № 9-2. – С. 208–215.
4. van den Berg, F. F. Update on the management of acute pancreatitis / F. F. van den Berg, M. A. Boermeester // Current opinion in critical care. – 2023. – Vol. 29, № 2. – Р. 145–151.
5. Immediate versus Postponed Intervention for Infected Necrotizing Pancreatitis / L. Boxhoorn, S. M. van Dijk, J. van Grinsven [et al.] // The New England journal of medicine. – 2021. – Vol. 385, № 15. – Р. 1372–1381.