МЕТОД ЛЕЧЕНИЯ ПОВЕРХНОСТНЫХ ДЕФЕКТОВ КОЖИ ПУТЕМ ПРИМЕНЕНИЯ КЛЕТОЧНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)

АННОТАЦИЯ

В статье изложены результаты экспериментального применения созданной тканеинженерной конструкции из шелковой отваренной марли с добавлением аллофибробластов для оптимизации регенерации поверхностных дефектов кожи. Данные объективного исследования локального статуса мягких тканей и общего состояния экспериментальных животных свидетельствуют о положительном эффекте тканеинженерной конструкции для оптимизации заживления поверхностных дефектов кожи. Основываясь на показателях морфологического исследования поверхностного дефекта, можно сделать вывод, что применение тканеинженерной конструкции способствует сокращению сроков заживления раны и на 14-е сутки при размере дефекта 1х1 см, морфология образовавшегося кожного покрова не отличается от нативной кожи.

ABSTRACT

The article presents the results of the experimental application of the created tissue-engineered structure made of boiled silk gauze with the addition of allofibroblasts to optimize the regeneration of surface skin defects. The data of an objective study of the local status of soft tissues and the general condition of experimental animals indicate a positive effect of tissue-engineered construction to optimize the healing of superficial skin defects. Based on the indicators of the morphological study of the surface defect, it can be concluded that the use of a tissue-engineered structure helps to reduce the time of wound healing, and on the 14th day, with a defect size of 1x1 cm, the morphology of the formed skin does not differ from the native skin.

Ключевые слова: регенеративная медицина, тканеинженерная конструкция, фибробласты, коллаген, заживление раны, дефект кожи.

Keywords: regenerative medicine, tissue engineering structure, fibroblasts, collagen, wound healing, skin defect.

Актуальность. Применение дермальных фибробластов является перспективным методом для лечения дефектов кожи. Данные клетки легко культивируются в лабораторных условиях, не теряя своих функций. Благодаря ключевой роли в поддержании гомеостаза ткани, фибробласты, как никакие другие клетки, способны эффективно создавать условия для пролиферации и миграции других типов клеток [2, c.30]. Полученные на сегодняшний день данные достоверно демонстрируют высокую клиническую эффективность и безопасность применения фибробластов для коррекции косметических дефектов и лечения длительно незаживающих ран и ожогов (Ларионова К.Д., Кислицын П.В., Квицинская Н.А.,2011).Крайне важным вопросом остается вопрос выбора подложки (носителя) клеточных структур, так как на сегодняшний день не существует идеально подобранной структуры носителя клеток, работы в этом направлении являются крайне перспективными и востребованными (Wahl EA, Fierro FA, Peavy TR, et al.,2015). Биополимерные материалы, наиболее часто используемые в тканевой и регенеративной медицине: альгинаты- полисахарид из бурых морских водорослей; коллаген- белок внеклеточного матрикса; желатин-термически денатурированный коллаген; хитозан- производное хитина (раки, крабы, креветки); фиброин шелка-белок кокона [3, c.47].

Одним из перспективных материалов в качестве раневого покрытия ран при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области в Республике Узбекистан является шелковая отваренная марля [1, c.49]

Цель исследования. Изучить эффективность применения тканеинженерной конструкции, состоящей из шелковой отваренной марли и фибробластов при поверхностных дефектах кожи.

Материалы и методы. Оценку эффективности тканеинженерной конструкции, из шелковой отваренной марли и аллофибробластов изучали путем изучения раневого процесса поверхностного дефекта кожи, сформированного на спинке половозрелых крыс-самцов, размером 1х1 см. круглой формы.

Животные были разделены на три группы по 6 особей в каждой группе.

В 1-ой экспериментальной группе для терапии поверхностного дефекта кожи применена подложка из шелковой отваренной марли с аллофибробластами.

В 2-ой экспериментальной группе для терапии поверхностного дефекта кожи применена шелковая отваренная марля без аллофибробластов.

Животным 3-й контрольной группы терапия ушитой раны поверхности кожных покровов не проводилась.

Создание модели экспериментального поверхностного дефекта мягкой ткани осуществляли путем формирования с помощью скальпеля в области спины дефекта кожи на глубину до фасции по пластиковому шаблону размером 1x1cм, после предварительного сбривания волос и обработки операционного поля бетадином длиной 3.0 см. Затем в сформированный дефект помещали созданную тканеинженерную конструкцию (ТИК) с аллофибробластами, которую фиксировали к коже животного швами.

Наблюдение проводилось в течение 1-х, 3-х, 7-х, 14-ти суток. В ходе экспериментов оценивались локальный статус, общее состояние, потребление корма и воды, изменение массы тела (каждые 3 дня), особенности поведения, интенсивность и характер двигательной активности, координация движений, реакция на внешние раздражители, частота и глубина дыхательных движений, состояние шерстного и кожного покрова, окраска слизистых оболочек, положение хвоста, количества и вид фекальных масс, регистрировались клинические признаки интоксикации

Экспериментальные гистоморфологические исследования были проведены в соответствии с общепринятыми правилами. В установленные сроки животные выводились из эксперимента для забора материала для гистологических исследований. Эвтаназия осуществлялась согласно Положениям ИСО 10993 – 2 под общей анестезией. Кожа и мягкие ткани были помещены в 10%-й раствор формалина и переданы для дальнейших морфологических исследований в отделе клеточных технологий с электронной микроскопией МНИЛ   Ташкентской медицинской академии.

Результаты собственных исследований. Сравнительный анализ кожи животных после декапитации, определили, что в первой опытной группе, где применялась шелковая марля с аллофибробластами определяется дерма с узелками фибробластов (рис.1,2)

Во второй опытной группе, где применялась шелковая марля без фибробластов наблюдается истончение эпидермиса, мышечный слой с дистрофией (рис.3,4)

В третьей контрольной группе животных, где заживление проходило самостоятельно дерма отечная, видны сальные железы и волосы, также наблюдается дистрофия миоцитов (рис. 5,6) 

Заключение. Основываясь на показателях морфологического исследования поверхностного дефекта, можно сделать вывод, что применение тканеинженерной конструкции (шелковая отваренная марля+аллофибробласты) способствует заживлению раны, морфология которой не отличается от нативной кожи. Результаты экспериментальных исследований подтверждают перспективность дальнейшего более глубокого изучения свойств предложенной тканеинженерной конструкции из шелковой отваренной марли и аллофибробластов для оптимизации регенерации поверхностных дефектов кожи.

Список литературы:

1. Kh.A. Zhuraev, N.V. Khramova.Evaluation of the effectiveness of silk medical marley for purulent wounds of the maxillofacial area // EUROPEAN SCIENCE-2020.- № 7 (56). -С.47-50
2. Зорин В.Л., Зорина А.И., Петракова О.С., Черкасов В.Р. Дермальные фибробласты для лечения дефектов кожи //Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. -2009.-4.-С.26-40
3. Храмова Н.В., Амануллаев Р.А., Махмудов А.А. Тканеинженерные конструкции в медицинской практике// Журнал биомедицины и практики. -2020.-№ 5.-С.45-50