IMMUNOCHROMATOGRAPHY IN DETERMINING SARS-COV-2 ANTIGEN AS ADDITION TO PCR TESTING

АННОТАЦИЯ

В статье изучена сопоставимость результатов по выявлению антигенов SARS-CoV-2, полученных при ПЦР-исследовании, и результатов иммунохроматографического экспресс-теста. Показана высокая эффективность экспресс-теста.

ABSTRACT

The article studied the comparability of the results for the detection of SARS-CoV-2 antigens obtained during PCR testing and the results of an immunochromatographic rapid test. High efficiency of rapid test is shown.

Ключевые слова: COVID-19, экспресс-тест, иммунохроматография.

Keywords: COVID-19, express test, immunochromatography.

Диагностика COVID-19 основана на ряде принципов, среди которых – молекулярно-биологические (ПЦР-тест), иммунохимические (иммуноферментный анализ, иммунохроматография) [1]. Каждая тест-система имеет как свои преимущества, так и недостатки. Традиционно наиболее распространенным методом выявления вирусных инфекций остается ПЦР-метод [2]. Данная методика основана на амплификации определенных участков генов вириона. Несмотря на высокую чувствительность и специфичность, ПЦР-исследование занимает достаточно много времени. Причем на практике описываются случаи ретроспективного положительного результата на SARS-CoV-2 у пациента, госпитализированного в стационар.

Как дополнение к ПЦР-тесту может быть предложен экспресс-тест для качественного определения антигена SARS-CoV-2 иммунохроматографическим методом в мазке из носоглотки человека “C-testAgCovid-19” (SARS-CoV-2)”.

Цель исследования: изучить сопоставимость результатов по выявлению антигенов SARS-CoV-2, полученных при ПЦР-исследовании, и результатовиммунохроматографического экспресс-теста.

Материалы и методы. В исследование включены пациенты, госпитализированные в СПб ГБУЗ «ГМПБ №2» в период с 11.04.2022 по 17.04.2022. Проведено исследование антигенов SARS-CoV-2, с помощью ПЦР-исследования и иммунохроматографического экспресс-теста (ООО «Контрольный тест», Россия).

Экспресс-тест представляет собой набор реагентов, предназначенных для качественного определения нуклеокапсидного протеина антигена SARS-CoV-2 иммунохроматографическим методом в мазке из носоглотки человека для скрининга пациентов с бессимптомным, легким или острым течением заболевания на раннем этапе. Указанный тест зарегистрирован в качестве медицинского изделия и имеет регистрационное удостоверение РЗН 2021/15285 от 14.09.2021.

Принцип экспресс-метода заключается в следующем. Антигены SARS-CoV-2 в образце мазка связываются с антителами против SARS-CoV-2 на поверхности частиц коллоидного золота, что приводит к образованию комплекса золотых частиц антиген-антитело. Комплексы мигрируют на мембране из-за капиллярного эффекта и, как результат, захватываются антителами, иммобилизованными на тестовой линии. Две окрашенные линии в области контрольной линии «С» и области тестовой линии «Т» указывают на наличие COVID-19. Одна окрашенная линия в области контрольной линии «С» указывает, что результат теста на COVID-19 отрицательный. Отсутствие окрашенной линии в контрольной области «С» указывает на ложный тест.

Результаты исследования.Экспресс-тест продемонстрировал однозначную диагностическую ценность. Так, экспресс-тест показал отчетливый положительный результат у пациентов с положительным ПЦР-результатом. Особенно это коррелировало с амплификацией на 20-30 циклах.

Стоит отметить, что среди включенных в исследование пациентов, у 100 больных выявили положительный ПЦР-тест на SARS-CoV-2, из которых у 43 пациентов амплификация шла на 20-30 циклах.

Данный экспресс-подход показал высокую эффективность в диагностике COVID-19. Особенно актуальным указанный метод был бы в качестве скрининга и дополнительного диагностического пособия к ПЦР-методу. Важно отметить, что метод исследования, основанный на полимеразной цепной реакции, длится несколько часов. Данная особенность делает диагностику несколько запоздалой. Кроме того, данная технология характеризуется существенными трудовыми и материальными затратами. Для выполнения ПЦР-исследования необходима целая команда высококомпетентных сотрудников, специализирующихся в данной области.

Предложенная как дополнительная диагностическая методика – экспресс-тест – лишена вышеперечисленных недостатков: на оценку результата теста отводится не более 15 минут, комплектность набора минимальна – тест-картридж и буферный раствор во флаконе-капельнице.

Процедура забора биологического материала абсолютно идентична с соответствующим протоколом для ПЦР-исследования.Так, для сбора образца используется тампон-зонд, протокол забора материала из носоглотки стандартен [2].

Вышеописанная техника пробоподготовки для выполнения экспресс-теста характеризуется относительной простотой выполнения, минимальными временными затратами и, как следствие, минимизацией ошибок преаналитического этапа. Стоит отметить, что по данным ряда авторов на преаналитический этап исследования приходится до 70% всех погрешностей клинико-лабораторных исследований.

Выводы. Таким образом, экспресс-тест для качественного определения антигена SARS-CoV-2 иммунохроматографическим методом в мазке из носоглотки человека “C-testAgCovid-19” (SARS-CoV-2)” может служит прекрасным дополнением к ПЦР-методу. Исследование еще раз подтвердило высокую диагностическую ценность экспресс-метода, который характеризуется минимальными временными, трудовыми и материальными затратами, но при этом обладает высоким диагностическим потенциалом.

Список литературы:

1. Кураков Ф.А., Цветкова Л.А. Оценка перспектив разработки вакцины от коронавирусной инфекции средствами патентного анализа. Менеджер здравоохранения. 2020;4:52–57.
2. Инструкция по применению экспресс-тест для качественного определения антигена SARS-CoV-2 иммунохроматографическим методом в мазке из носоглотки человека “C-testAgCovid-19” (SARS-CoV-2)”