Исследование влияния гранул «Гепатропин» на течение хронического экспериментального гепатита

АННОТАЦИЯ

Цель работы – изучение гепатопротекторной активности нового комплексного растительного средства гранул «Гепатропин» (внутрижелудочно 900 мг/кг один раз в день) на модели хронического гепатита, вызванного введением тетрахлорметана (50% масляного раствора в дозе 0,2 мл /100 г массы тела крысы три раза в неделю в течение 28 дней) и этанола (5% раствор вместо питьевой воды), в сравнении с референс-препаратом таблетками «Силибор» (внутрижелудочно 35 мг/кг один раз в день). Для оценки функционального состояния мембран гепатоцитов и степени воспалительной реакции определяли в сыворотке крови активность ферментов аланинаминотрансферазы (АлАТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), массовый коэффициент печени (МКП). Интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и активность антиоксидантной системы (АОС) оценивали соответственно по уровню ТБК-активных продуктов и восстановленного глутатиона (ВГ) в гомогенате печени. Желчеобразовательную и выделительную функцию печени оценивали по показателям: скорости секреции желчи, содержания желчных кислот и холестерина. Для гистологических исследований образцы печени фиксировали в 10% растворе формалина, заливали в целлоидин-парафин. Одни срезы окрашивали гематоксилином и эозином, другие срезы, полученные на замораживающем микротоме, окрашивали суданом IV. Результаты. Гранулы «Гепатропин» и таблетки «Силибор» способствовали существенному снижению МКП (соответственно с 4,41% до 3,51% и 3,55%) и активности ЩФ (соответственно в 1,28 и 1,5 раза), АлАТ и АсАТ (соответственно в 1,4; 1,75 раза и в 1,18; 1,28 раза) в сыворотке крови, ТБК-активных продуктов (соответственно в 1,82 и в 1,69 раза) и повышению уровня ВГ (соответственно в 3,8 раза) в гомогенате печени, а также повышению секреции желчи (соответственно на 125% и 42%), содержания желчных кислот (соответственно на 75,7% и 50,5%) и холестерина в желчи (соответственно на 75,1% и 37,5%) относительно аналогичных показателей группы контрольной патологии. Выводы. Установлено гепатопротекторное действие гранул «Гепатотропин», что подтверждается ингибированием процессов ПОЛ, повышением активности АОС, устранением явлений цитолиза гепатоцитов, воспаления и некроза, положительным влиянием на образование и секрецию желчи. За выраженностью нормализующего влияния на желчесекреторную функцию печени гранулы «Гепатотропин» имеют преимущество над препаратом сравнения.

ABSTRACT

The objective - study of the pharmacological activity of the new complex plant agent granules "Hepatropin" (intragastrically 900 mg/kg once daily) on chronic hepatitis model induced by carbon tetrachloride (50% oil solution in dose 0.2 ml/100g three times a week for 28 days) and ethanol (5% solution instead of drinking water), compared to reference drug tablets "Silibor" (intragastrically 35 mg/kg once per day). To evaluate the functional state of hepatocytes membranes and the extent of the inflammatory response activity of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), alkaline phosphatase (ALPh) in blood serum, the weight liver ratio (WLR) were determined. The intensity of lipid peroxidation (LPO) and activity of antioxidant system (AOS) were evaluated respectively by the level of TBA-active products and reduced glutathione (RG) in liver homogenate. Speed of bile secretion, content of bile acids and cholesterol have been were evaluated. Histological studies have been conducted.

Results. Granules "Нepatropin" and tablets "Silibor" contributed significantly reduce WLR (respectively from 4.41% to 3.51% and 3.55%), and ALPh activity (respectively 1.28 and 1.5 times lower), ALT and AST (respectively 1.4, 1.75 and 1.18, 1.28 times lower) in the blood serum, TBA-active products (respectively 1.82 and 1.69 times lower) and increase the VG level (respectively 3.8 times more) in the liver homogenate, and increase bile secretion (respectively on 125% and 42% more), the content of bile acids (respectively on 75.7% and 50.5% more) and cholesterol in bile (respectively on 75.1% and 37.5% more) versus similar indicators the of control pathology. Conclusions. Hepatoprotective effect of granules "Hepatotropin" was established, as evidenced by the LPO processes inhibition, increased AOS activity, reduction of hepatocytes cytolysis, inflammation and necrosis, positive influence on the formation and secretion of bile. The expression of the normalizing effect on bile secretion granules "Hepatotropin" have an advantage over the comparison drug.

 Таблица 1.

Все это свидетельствовало о хроническом течении патологического воспалительно-некротического процесса и высокой степени его активности. Все указанные изменения функционально-биохимических и патоморфологических показателей являются свидетельством формирования у животных хронического гепатита довольно высокой степени активности, что соответствует ряду исследований [15]. Фармакотерапия хронического гепатита гранулами «Гепатропин» и таблетками «Силибор» способствовала существенному снижению воспалительных проявлений, о чем свидетельствует достоверное снижение МКП и активности маркера воспаления и холестаза ЩФ относительно аналогичных показателей группы контрольной патологии. Исследование содержания продуктов ПОЛ и активности АОС под влиянием гранул «Гепатропин» показали отчетливое снижение ТБК-реактантов и повышение уровня ВГ в гомогенате печени относительно показателей группы контрольной патологии, что свидетельствует о снижении скорости патологических свободнорадикальных реакций и усилении антиоксидантной защиты. Следствием угнетения процессов ПОЛ является снижение проявлений цитолиза (активности ферментов АлАТ и АсАТ) (табл. 1).

На фоне лечения таблетками «Силибор» (рис. 10-11) очаги некроза паренхимы печени были в основном изолированными, меньшими по размеру относительно контрольной патологии. Выраженность воспалительной реакции варьировала, но в целом была меньше по сравнению с контрольной патологией. Пролиферация дуктул и гемокапилярные расстройства были также отчетливо снижены. На фоне таблеток «Силибор» (рис. 10-11) не наблюдали развития некроза паренхимы или он имел очаговый, изолированный характер. Как и на фоне гранул «Гепатропин» наблюдали варьирование ядер гепатоцитов по величине, гиперхромные ядра, полиплоидные клетки, достаточное количество двухъядерных клеток. Митозы отсутствовали. У животных, получавших «Силибор», жировая дистрофия отсутствовала у большинства крыс (рис. 12), в остальных животных она носила преимущественно умеренный очаговый характер. Известно, что жировая дистрофия гепатоцитов возникает как защитно-компенсаторная реакция на нарушение липидного обмена, но этот процесс носит обратимый характер. Начальный этап развития хронического воспаления печени под влиянием тетрахлорметана и этанола сопровождается развитием жировой дистрофии [6, 16]. Под действием исследуемых средств включаются защитно-компенсаторные механизмы организма (восстановление баланса системы ПОЛ/АОС), что приостанавливает переход острого процесса в хронический. Хронический процесс, характеризующийся некрозом, воспалительной инфильтрацией и признаками начального фиброза в печени животных группы контрольной патологии, на фоне исследуемых средств он менялся на менее выраженную патологию - жировую дистрофию гепатоцитов и восстановление нормальной морфологической структуры печеночной паренхимы. О повышении функциональной активности печени при фармакотерапии гранулами «Гепатропин» и таблетками «Силибор» свидетельствовали также показатели желчевыделительной и желчесинтетической функции органа: достоверно повышалась секреция желчи, содержание желчных кислот и холестерина в желчи – основных компонентов внешнего секрета печени (табл. 1). Гранулы «Гепатропин» при данных условиях эффективнее силибора восстанавливали желчеотделение и экскреторную функцию печени благодаря более выраженному гепатопротекторному действию, обеспеченному многогранными фармакологическими свойствами БАВ. Очевидно, преимущество гранул «Гепатропин» над референтным препаратом «Силибор» обеспечивается большим содержанием и разнообразием БАВ, входящих в состав растительного сырья. Это полифенольные соединения - флавоноиды, дубильные вещества, оксикоричные кислоты и др., обеспечивающие антиоксидантные, мембраностабилизирующие, антицитолитические и противовоспалительные свойства новой фитокомпозиции [5, 7, 8, 9, 16]. Благодаря указанным свойствам полифенольные соединения нормализуют структуру и функции мембран гепатоцитов, устраняют их деструкцию при цитолизе и чрезмерное уплотнение при холестазе и воспалении, снижают интенсификацию ПОЛ и повышают физиологические возможности АОС организма, способствуют восстановлению функциональной активности печени благодаря устранению нарушений метаболических процессов, обусловленных гибелью значительной части гепатоцитов. Более выраженный эффект объясняется присутствием в составе гранул «Гепатропин» и других БАВ, в частности витаминов, макро- и микроэлементов, органических кислот, эфирных масел, оказывающих метаболическое действие. В улучшении желчевыделительной и желчесинтетической функции печени преимущество гранул «Гепатотропин», несомненно, обеспечивают и растительные волокна пшеничных отрубей, усиливающих действие лекарственных растений [10].

Результаты исследования дают основание считать, что в условиях хронического поражения печени, вызванного тетрахлорметаном и этанолом, гранулы «Гепатотропин» оказывают гепатопротекторное действие. Это подтверждается ингибированием процессов ПОЛ, повышением активности антиоксидантной системы, устранением цитолиза гепатоцитов, воспаления и некроза, положительным влиянием на образование и секрецию желчи, стимуляцией синтетических процессов органа. Следует отметить, что за выраженностью нормализующего влияния на желчесекреторную функцию печени гранулы «Гепатотропин» имеют преимущество над препаратом сравнения таблетками «Силибор». Полученные результаты обуславливают перспективность дальнейшего изучения гранул «Гепатотропин» с целью обоснования целесообразности их включения в комплексную фармакотерапию повреждений гепатобилиарной системы.