Международный
научный журнал

Полипренолы листьев Vitis vinifera L. и их влияние на активность протеазы кишечника крыс в постнатальном онтогенезе


Polyprenols of leaves of Vitis vinifera L. and their effect on activity proteases in postnatal ontogenesis

Цитировать:
Зокирова У.Т., Каримова И.И., Хидирова Н.К. Полипренолы листьев Vitis vinifera L. и их влияние на активность протеазы кишечника крыс в постнатальном онтогенезе // Universum: Химия и биология : электрон. научн. журн. 2018. № 12(54). URL: http://7universum.com/ru/nature/archive/item/6649 (дата обращения: 16.10.2019).
 
Прочитать статью:


АННОТАЦИЯ

Исследованы полипренолы листьев дикого винограда Vitis viniferaS. Silvestris, произрастающего в Ташкентской области республики Узбекистан. С применением ВЭЖХ определен гомологический состав полипренолов 6,8% (n=10), 48,8% (n=11), 44,4% (n=12). Изучена корригирующая способность полипренолов на активность протеазы кишечника при воздействии хлорида свинца. Установлено, что восстановление активности протеазы репрессивно связано с возрастом и у растущих крыс выше по сравнению со старыми и половозрелыми крысами.

ABSTRACT

Polyprenols of leaves of wild grapes Vitis vinifera S. silvestris growing in the Tashkent region of the Republic of Uzbekistan were investigated. Using HPLC the homological composition of the polyprethenols were determined 6.8% (n=10), 48.8% (n=11), 44.4% (n=12). Correcting ability of polyprenols of the action of lead chloride on the intestinal hudrolase activity was studied. It has been. It has been established that protease activity is repressively associated with age and higher in the growing compared with old and sexually mature rats.

 

Ключевые слова: Vitis vinifera L.; полипренолы; сумма экстрактивных веществ; хлорид свинца; интоксикация; протеаза; кишечник.

Keywords:Vitis vinifera L.; polyprenols; totalextractive substances; lead chloride; intoxication; protease; intestines.

 

Введение

Виноград –Vitis vinifera L. семейства. Vitaceae – культивируется на Кавказе, в Украине, Молдове, Крыму и в Средней Азии [5, с. 60; 6, с. 7]. К европейско-азиатской группе относят один вид: Vitis vinifera L., который включает в себя подвиды Vitis vinifera subsp. sativa (виноград культурный) и различные культурные сорта, а также Vitis vinifera subsp. silvestris (виноград лесной). Вид Vitis vinifera L. делится на 3 эколого-географические группы. Восточная группа Vitis vinifera сonvar. orientalis Negr включает более 44 мало изученных сортов [6, с. 7; 3, с. 6].

Ранее нами были изучены полипренолы листьев белого винограда Vitis vinifera L. сорта «Буваки» и дикого винограда Vitis vinifera subsp. silvestris произрастающего вСурхандарьинской области, а также их гепатопротекторная активность их [8, с. 371; 15, с. 97].

Известно, что полипренолы обладают разно­образной биологической активностью, среди которой особый интерес представляет гепатопротекторная активность и способность стимулировать регенераторные процессы в организме [13, с. 107; 11, с. 4]. Изучена коррекция морфофункционального состояния печени при ожирении с препаратом ропрен на основе полипренолов хвойных пород. В результате показано, что включение в корм ропрена способствовало улучшению морфофункциональных показателей ожирения и нормализовало массу тела животных [9, с. 225].

На сегодняшний день в мире профилактика и поиск мер лечения патологических состояний, возникающих в пищеварительной системе в результате распространения солей тяжёлых металлов, является одной из актуальных проблем, стоящая перед биологами, экологами и сотрудниками здравоохранения. Согласно проводимым исследованиям, ежегодно в среднем свыше 400 тыс. тонн свинца в качестве техногенного металла выделяется в окружающую среду [10, с. 45]. Как известно, пищеварительная система, являясь первоначальным связывающим звеном между окружающей средой и организмом, подвергается воздействию раздражителя. Хроническое отрав-ление свинцом приводит к нефриту, анемии, параличу [4, с. 29; 1, с. 13]. Для лечения свинцовой интоксикации биологически активные соединения растительного происхождения являются перспек­тивными источниками при создании эффективных фармакологических препаратов [2, с. 8].

Исходя из вышеизложенного исследование кишечного пищеварения при воздействие ионов свинца и поиск соответствующих корригирующих соединений, несомненно, является актуальным направлением физиологических исследований.

Целью данного исследования является изучение полипренолов листьев дикого красного винограда Vitis vinifera subsp. Silvestris, произрастающего в Ташкентской областии его действия на коррекцию кишечных протеаз тонкой кишки крыс в постнатальном онтогенезе при воздействии хлорида свинца.

Методика исследования.

Выделение суммы экстрактивных веществ. Листья дикого красного винограда (100 г), собранной в Ташкентской области Паркентского района (2014 г.) измельчали до степени помола 2,0-3,0 мм. Экстрагировали трехкратно 96%-ным этиловым спиртом при гидромодуле 1:20(1:8, 1:6, 1:6) методом ультразвукового перемешивания. Все спиртовые экстракты объединяли, растворитель отгоняли на роторном испарителе при 400С. В результате получили сумму экстрактивных веществ (СЭВ) в количестве 13,54г (13,54% от ВСМ).

Выделение полипренолов из СЭВ. Сумму СЭВ (13,54г) разделяли на колонке. Колонка диаметром 3,0х135 см; в качестве адсорбента использовали силикагель КСК 100/250 меш, соотношение адсорбента к экстракту 15:1, элюент петролейный эфир: этилацетат 100:1. Были собраны 72 фракций по 10 мл. Фракции 42-65, содержащие полипренолы, объединяли. Выход 2,56 г (18,9 % от суммы экстрактивных веществ) с содержанием ПП 96,8% по ВЭЖХ. Выход фракции 66-72 был 0,61 г (с содержанием ПП- 33,3%). Общий выход ПП 2,76 от ВСМ. Полипренолы листьев VitisviniferaL. представляли собой светло-желтое масло. МС ИЭРПИ: C50H82O -721 (М+nNa); C55H90O -789 (М+nNa); C60H98O, 857 (М+ nNa).

Определение гомологического состава полипренолов проводили на хроматографе Agilent Technologies -1100 на колонке 0.46х150 мм Eclipse XDB-C-18. Подвижная фаза: градиентная 0-20 мин 0-75% В; 20-25 мин 75-100%В; 25-30 мин 100-0%В, скорость потока 0.75 мл/мин, время анализа 30 мин. Cистема А - смесь метанол - вода 9:1(v/v), В - метанол-гексан-изо-пропанол - 2:1:1. Профиль хроматографии снимали при 210 нм.

Определение активности протеаз кишечника проводили по методике [12, с. 20].

Результаты исследования и их обсуждения. Полипренолы листьев винограда Vitis vinifera subsp. silvestrisвыделялиразделением на колонке сумму экстрактивных веществ полученнойэкстракцией сырья 96%-ным этиловым спиртом ультразвуковом перемешивание. Выход полипренольной фракции составил 2,56 г с содержанием полипренолов 96,8%. Определение гомологического состава полипренолов проводили на хроматографе Agilent Technologies-1100. Количество пренолов определяли относительно хроматограммы стандартного образца по соотношению площадей пиков с помощью программы Agilent Chemstation. В качестве стандарта использовали полипренолы листьев -Rhuscoraria [14, с. 832]. Полученные данные приведены в табл. 1.

Таблица 1.

Гомологический состав полипренолов, % от веса фракции

Образец

ПП8

ПП9

ПП10

ПП11

ПП12

ПП13

ПП14

Общее содер-жание ПП в образцах

ПП

-

*

6,8

48,8

44,4

-

-

96,8

Стандарт- Rhus coraria-

-

-

3.46

60.85

20.47

13.31

-

98.09

 

Результаты анализа показали что, домини­рующими являются ундекапренол и додекапренол содержаниям 48,8% (n=11) и 44,4% (n=12), а содержание декапренола составляет лишь 6,8% (n=10).

Идентификацию полипренолов дикого винограда проводили с применением ИК-, 1Н С ЯМР–спектроскопии и масс-спектрометрии.

В ИК- спектре (ν,см-1) полипренолов имеются следующие характерные полосы поглощения: 3534 -свободная гидроксильная группа, 2924 С-Н СН2, СН3-группы, 2854 -С-Н СН2-, 1667 -С=С-, 1449 -СН3, СН2 групп, 1377 -С-Н СН3- группы, 1000- С-O (СН=СН-СН2-ОН), 835- С-Н (СН2-С(СН3)=СН-СН2) фрагмента.

В 1Н ЯМР-спектре имеются синглетные сигналы при 1,66 и 1,48 м.д. цис- и транс-метильных групп –СН2-С(СН3)-СН- в соотношении 2:1; мультиплет в области 1,76-2,125 м.д. характеризует метиленовые протоны изопреноидной цепи; дублет c центром 4,14 м.д.(J= 7,5 Гц) –метиленовые протоны концевого звена –СН-СН2ОН; уширеный синглет при 5,12 м.д. относится к олефиновым протонам середины цепи и триплет с центром 5,35 (J=7,2Гц) - к олефиновому протону концевого звена. Спектральные характеристики полипренолов соответствуют литературным данным [7, с. 328; 8, с. 374].

Влияние полипренолов винограда на активность протеаз кишечника были изучены в биофаке национального университета республики Узбекистан. Подопытные животные были разделены на три группы– первая группа контрольная, не подвергающая воздействию хлорида свинца, вторая опытная группа получила хлорид свинца (0,5 мг/кг), третья группа получала эту же дозу и полипренолы по 0,5 мг/кг. Каждая группа состояла из растущих, зрелых и старых крыс. В результате интоксикации хлоридом свинца активность фермента протеазы кишечника различных возрастных групп снизились на 47,6±3,4%, 41,9±3,1% и 34,7±3,3% соответ­ственно. У растущей группы животных применение полипренола способствовала восстанавлению активности фермента на 20,9±0,3%, у зрелых крыс на 16,1±1,6%, у старых крыс на 14,5±0,1% (Рис 1).

Следовательно, выше перечисленные сведения свидетельствуют о том, что полипренолы листьев Vitis viniferaL. способствуют увеличению активности фермента протеазы в слизистой оболочке кишечника, сниженной под влиянием хлорида свинца.

 

Рисунок 1. Влияние полипренолов на активность протеазы тонкой кишки в результате интоксикации хлорида свинца. (n=8). Контроль, PbCl2 (5,0 мг/кг), PbCl2 (5,0 мг/кг)+полипренол (5,0 мг/кг).
* Степень достоверности по сравнению с контролем * - Р<0,05; ** - Р<0,01; *** Р<0,001

 

Результаты диаграммы 1 показывает, что восстановление активности протеазы репрессивно связано с возрастом, и у растущих сильно выражается по сравнению со старыми и половозрелыми крысами.

Выводы. В результате исследования листьев дикого винограда Vitis vinifera S. silvestris установлен гомологический состав полипренолов с приме­нением ВЭЖХ и составляют 6,8% (n=10), 48,8% (n=11), 44,4% (n=12). Изучено корригирующее действие полипренолов растений Vitis vinifera S. silvestris на активность протеазы кишечника при интоксикации хлоридом свинца. Показано, что у растущей группы животных применение поли­пренола способствовала восстанавлению активности фермента на 20,9±0,3%, у зрелых крыс на 16,1±1,6%, у старых крыс на 14,5±0,1%.

 

Список литературы:
1. Влияние хронической свинцовой интоксикации на организм человека / М.А. Новикова, Б.Г. Пушкарев, Н.П. Судаков и др. // Сибирский медицинский журнал. – 2013. – № 2. – С. 13-16.
2. Каримова И.И. Садыков Б.А. Қўрғошин хлорид тузини ўсувчи каламушлар ингичка ичак карбогидразаларининг фаоллигига таъсирини экдистерон билан коррекциялаш // Ўзбекистон биология журн. – Тошкент, 2014. – № 3. – С. 8-11.
3. Коваль Н.М., Комарова Е.С., Мартьянова О.А. Настольная книга виноградаря. – 5-е изд. / Под ред. Н.Л. Артеменко. – Киев: Урожай, 1978. – 240 с.
4. Коробкова А.И., Сорокина Н.С., Молодкина Н.Н. Свинец и его действие на организм (обзор литературы) // Медицина труда. – 2001. – № 5. – С. 29-34.
5. Лавренов В.К., Лавренова Г.В. Современная энциклопедия лекарственных растений / Под ред. К.Г. Ткачен-ко. – СПб., М.: Нева, 2006. –271 с.
6. Негруль А.М. Виноградство / Под ред. Н.И. Иванова. – М.: Сельхозгиз, 1952. – 427 с.
7. Полипренолы листьев и стеблей растения Althaea officinalis / Н.К. Хидырова, Е.В. Ван, Р.Х. Шахидоятови др. // Химия природ.соедин. – 2012. – № 3. – С. 326-329.
8. Полипренолы листьев Vitis vinifera L. и их гепатопротекторная активность / У.Т. Зокирова, Н.К. Хидырова, Н.В. Турсунова и др. // Где опубликовано. – 2015. – № 3. – С. 371-374.
9. Попова Ю.Р., Атлас Е.Е. Коррекция морфофункционального состояния печени при ожирении // Вестник новых медицинских технологий. Электронный журнал. – 2017. – № 2. – С. 225-230.
10. Ревич Б.А. Химические вещества в окружающей среде городов России: опасность для здоровья населения и перспективы профилактики // Вести РАМН. – 2002. – № 9. – С. 45-49.
11. Рощин В.И., Султанов В.С. Средство для стимуляции процессов естественной регенерации печени // Патент России № 2252026C1. 2005. Бюлл. № 1.
12. Эргашев Н.А., Кучкарова Л.С., Садиков Б.А. Умумий протеолитик фаолликни аниқлашнинг модификацион услуби // Ўзб. биол. журнал. –Тошкент, 2005. – № 6. – С. 19-22.
13. Khidyrova N.K., Shakhidoyatov Kh.M. Plant polyprenols and their biological activity. Chem.Nat. Compd. 2002. Vol. 38. № 2. P. 107-117.
14. Mamatkulova N.M., Khidirova N.K., Mamadrahimov A.A., Shakhidoyatov Kh.M. Polyprenols from Leaves of Rhus coriaria. Chem. Nat. Compounds. 2014. Vol. 50. № 5. P. 832-835.
15. Zokirova U.T., Mamatkulova N.M., Khodjaniyazov Kh.U., Khidyrova N.K., Shakhidoyatov Kh.M. Polyprenols of Grape Vitis vinifera L. Leaves. Internat. J. Biochem. Res. Rev. 2013. Vol. 3. № 2. P. 97-107.

 

Информация об авторах:

Зокирова Умида Талибовна Umida Zokirova

мл. науч. сотр. института химии растительных веществ АН РУз,  Узбекистан, г. Ташкент

Junior Researcher, Institute of the Chemistry of Plant Substances Academy Science of Uzbekistan, Uzbekistan, Tashkent


Каримова Иродахон Иброхимжоновна Irodaxon Karimova

докторант национального университета имени Мирзо Улугбека, Узбекистан, г. Ташкент

doctorant, National University of Uzbekistan named after Mirzo Ulugbek, Uzbekistan, Tashkent


Хидырова Назира Кудратовна Nazira Khidirova

канд. хим. наук, старший научный сотрудник, ведущий научный сотрудник института химии растительных веществ АН РУз, Узбекистан, г. Ташкент

Candidate of Chemical Science, Senior Researcher, Institute of the Chemistry of Plant Substances Academy Science of Uzbekistan, Uzbekistan, Tashkent


Читателям

Информация о журнале

Выходит с 2013 года

ISSN: 2311-5459

Св-во о регистрации СМИ: 

ЭЛ №ФС77-55878 от 17.06.2013

ПИ №ФС77-66239 от 01.07.2016

Скачать информационное письмо

Включен в перечень ВАК Республики Узбекистан

Размещается в:

doi:

The agreement with the Russian SCI:

cyberleninka

google scholar

Ulrich's Periodicals Directory

socionet

Base

ROAR

OpenAirediscovery

CiteFactor

 

Поделиться

Лицензия Creative CommonsЯндекс.Метрика© Научные журналы Universum, 2013-2019
Это произведение доступно по лицензии Creative Commons «Attribution» («Атрибуция») 4.0 Непортированная.